結核分枝桿菌感染者TB-IGRA試驗檢測IFN-γ的臨床意義

肖作漢，孟 岡，孫文錦，王立志

(湖北省鄂州市中心醫院感染科 436099)

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·臨床研究·

結核分枝桿菌感染者TB-IGRA試驗檢測IFN-γ的臨床意義

肖作漢，孟 岡，孫文錦，王立志△

(湖北省鄂州市中心醫院感染科 436099)

目的 探討結核分枝桿菌γ-干擾素(IFN-γ)在不同類型結核分枝桿菌感染者中的表達水平及臨床意義，為結核分枝桿菌IFN-γ體外釋放(TB-IGRA)定量試驗的臨床診斷提供依據。方法 選擇該院112例結核分枝桿菌感染住院患者為疾病組，其中痰涂菌陽肺結核(活動性)患者55例；痰涂菌陰肺結核患者28例；痰涂菌陰肺外結核患者29例。選擇同期健康體檢者22例為健康對照組。采用TB-IGRA定量試驗測定兩組患者血漿中特異性IFN-γ水平，同時與血抗結核抗體、痰涂片抗酸染色及痰菌培養、結核菌素試驗(TST)等方法進行比較。結果 疾病組血漿IFN-γ水平均明顯高于健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；痰涂菌陽肺結核患者血漿IFN-γ水平均明顯高于其他患者，差異有統計學意義(P<0.05)。TB-IGRA定量試驗對結核分枝桿菌感染者的敏感性達87.5%，準確率89.7%，經比較均高于其他診斷方法(P<0.05)。而特異性除TST方法除外，其他方法比較差別無統計學意義(P>0.05)。結核患者血漿IFN-γ濃度不受TST紅腫硬結直徑的影響。結論 結核分枝桿菌感染者血漿IFN-γ水平普遍升高，特別是痰涂菌陽性肺結核患者升高明顯，TB-IGRA定量試驗對結核分枝桿菌感染診斷具有較高的臨床意義。

γ干擾素； 結核分枝桿菌； 痰涂片； 肺結核

目前臨床結核病病原學診斷主要依賴細菌學涂片和培養檢查。但涂片敏感性低，特異性差；培養時間長，陽生率也只有30%或更低。多年來國內外學者一直在探索快速、敏感、特異、簡便的實驗室診斷方法。其中結核分枝桿菌γ-干擾素(IFN-γ)體外釋放(TB-IGRA)定量試驗作為一種早期的診斷方法迅速發展，在國外已得到廣泛應用[1-3]。本研究通過TB-IGRA定量試驗法測定112例結核分枝桿菌感染者血漿中特異性IFN-γ的水平，探討TB-IGRA定量試驗用于結核病的臨床診斷、療效觀察的意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇本院2011年6月至2013年6月112例結核分枝桿菌感染住院患者為疾病組，其中男92例，女20例，平均年齡(50.4±14.12)歲。痰涂菌陽肺結核(活動性)患者55例，其中男49例，女6例，平均年齡(54.45±10.73)歲。痰涂菌陰肺結核患者28例，男19例，女9例，年齡(35.10±2.80)歲。痰涂菌陰肺外結核患者29例，男24例，女5例，平均年齡(37.17±12.68)歲。所有患者均經臨床表現，細菌學，影像學及抗結核藥物療效明確診斷。選擇同期健康體檢者22例為健康對照組，其中男15例，女7例，平均年齡(50.4±11.20)歲。兩組間一般資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，組間具有可比性。

1.2 儀器和試劑 TB-IGRA定量檢測試劑盒(北京萬泰公司)，結核菌素純蛋白衍化物(PPD)成都生物制品研究所，AF2/FAME16/20全自動酶標儀(瑞士Hamilton公司)；Heal Forle二級生物安全柜(蘇州安泰空氣技術有限公司)。

1.3 檢測方法 (1)TB-IGRA檢測。按照說明書操作，采集患者肝素抗凝靜脈血3～5 mL，常溫送檢。盡快分裝到本底對照管綠色(N)；測試培養管無色(T)，陽性對照培養管紅色(P)3個培養管中，于37 ℃恒溫箱培養22 h后，全血4 000 r/min離心10 min，吸取血漿進行聚合酶鏈反應(ELISA)檢測IFN-γ水平。檢測范圍10～240 pg/mL；檢測管-本底對照大于或等于14 pg/mL為陽性。(2)結核菌素試驗(TST)。所有研究對象在采血后于前臂皮內注射PPD 5個單位，由本院結核病科有經驗人員操作。72 h檢測反應，結果用直尺量取硬結平均直徑并記錄。以紅腫硬塊直徑是否大于5 mm作為判斷是否感染結核分枝桿菌的標準。(3)血清標本結核抗體檢測，痰涂片及痰結核分枝桿菌培養均按常規結核分枝桿菌實驗室檢測方法進行。

1.4 觀察指標 觀察兩組IFN-γ水平及各自的陽性率，比較TB-IGRA檢測與結核菌素試驗、痰涂片抗酸染色、結核抗體等其他檢測方法的符合率。

2 結 果

2.1 兩組IFN-γ檢測結果比較 疾病組血漿IFN-γ水平明顯高于健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。菌陽肺結核患者血漿IFN-γ水平均明顯高于其他組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組IFN-γ檢測結果比較

注：同健康對照組比較，aP<0.05，同菌陽肺結核組比較，bP<0.05。

2.2 TB-IGRA實驗同其他方法的比較 TB-IGRA對結核分枝桿菌感染者的敏感性達87.5%，準確率89.7%，經比較均高于其他診斷方法(P<0.05)。而特異性除TST(PPD)方法外，其他方法比較差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

2.3 結核分枝桿菌感染者PPD試驗與血漿IFN-γ濃度的關系 疾病組痰涂菌陽肺結核患者IFN-γ濃度為(199.00±113.00)pg/mL；痰涂菌陰結核病患者IFN-γ濃度為(202.00±189.00)pg/mL。結果顯示血漿IFN-γ濃度同TST(PPD)皮膚試驗的直徑大小之間并無線性關系(P>0.05)。

表2 TB-IGRA同其他方法檢測結果比較(%)

注：與其他方法比較，aP<0.05；與TST(PPD)方法比較，bP>0.05。

3 討 論

感染結核分枝桿菌后人體內產生針對結核分枝桿菌的特異性效應T細胞，利用結核特異性抗原再刺激效應T細胞，可使其分泌特異性IFN-γ，通過ELISA技術定量檢測IFN-γ，間接反映人體內結核分枝桿菌感染情況[4-5]。本研究結果表明，疾病組血漿特異性IFN-γ水平均明顯高于健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；痰涂菌陽肺結核組血漿IFN-γ水平明顯高于其他組，差異有統計學意義(P<0.05)。說明感染了結核分枝桿菌的患者血漿IFN-γ表達水平普遍上調，發展為活動性肺結核后血漿IFN-γ水平明顯升高，這與伍仕敏等[6]和劉佳文等[7]所報道的觀點一致。此外，TB-IGRA試驗對結核病診斷的靈敏性達87.5%，特異性達91.1%，陽性預測值為93.1%，陰性預測值79.3%，準確性為89.7%，明顯高于其他幾種方法(P<0.05)。而且以外周血為檢測標本采樣方便，可有效診斷結核分枝桿菌感染和抗結核治療效果。另外，本研究進一步分析了TST(PPD)試驗與血漿IFN-γ濃度的關系，結果表明血漿特異性IFN-γ濃度不受皮膚硬結直徑的影響，這與劉旭暉和肖和平[8]觀點不一致，具體原因還有待進一步探討。

總之，快速診斷結核分枝桿菌感染對于預防和控制結核病非常重要。TB-IGRA顯示出了很多優點，對于快速判斷結核分枝桿菌感染有可靠的參考價值，隨著方法的改進以及新抗原的應用，以后會成為新一代的診斷方法。

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10.3969/j.issn.1672-9455.2015.04.050

A

1672-9455(2015)04-0549-02

2014-07-14

2014-09-28)

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