植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）NDC75017 產γ-氨基丁酸的影響因素及其代謝機制

李 理，滿朝新，劉少敏，李 婷，牛婕婷，姜毓君,,*

（1.東北農業大學食品學院，乳品科學教育部重點實驗室，黑龍江 哈爾濱 150030；2.東北農業大學 國家乳業工程技術研究中心，黑龍江 哈爾濱 150028）

?

植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）NDC75017 產γ-氨基丁酸的影響因素及其代謝機制

李 理1，滿朝新2，劉少敏1，李 婷1，牛婕婷1，姜毓君1,2,*

（1.東北農業大學食品學院，乳品科學教育部重點實驗室，黑龍江 哈爾濱 150030；2.東北農業大學 國家乳業工程技術研究中心，黑龍江 哈爾濱 150028）

摘 要：為探索植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum）NDC75017產γ-氨基丁酸（gamma-aminobutyric acid，GABA）的影響因素及相關代謝機制，首先采用響應面法，對菌體積累GABA的發酵條件進行優化。其次，分別采用高效液相色譜和實時熒光定量反轉錄聚合酶鏈式反應（real-time reverse transcript polymerase chain reaction）測定了不同時間點GABA產量和谷氨酸脫羧酶（glutamic acid decarboxylase，GAD）編碼基因gadB的相對表達量。L. plantarum NDC75017發酵過程中產GABA的最佳底物（谷氨酸鈉）、輔酶（5’-磷酸吡哆醛）的添加量和發酵初始pH值分別為68.03 mmol/L、20.92 μmol/L和4.65。底物與輔酶之間、輔酶與發酵初始pH值之間的交互作用能夠顯著地影響GABA的積累（P＜0.05）。發酵48 h內，基因gadB表達量呈現先升高后下降的趨勢，與GABA產量的變化趨勢并不完全一致。上述結果表明：底物、輔酶和發酵初始pH值以及它們之間的交互作用是影響L. plantarum NDC75017產生GABA的關鍵因素。同時GABA的積累不僅受到GAD和gadB的影響，其他與GABA支路（GABA shunt）相關的酶和基因也參與了GABA的代謝。

關鍵詞：γ-氨基丁酸；植物乳桿菌；谷氨酸脫羧酶；發酵

γ-氨基丁酸（gamma-aminobutyric acid，GABA）是一種在自然界廣泛分布的非蛋白質氨基酸。GABA最早被確定為哺乳動物神經中樞的一種抑制性神經遞質[1]，具有調節血壓[2]、調節激素分泌[3]、保護腎臟功能[4]、改善大腦機能[5]和增強機體免疫力[6]等多種生理功能。目前，GABA可以通過化學法和生物法進行制備。與化學制備法相比，生物法具有條件溫和、節能環保等優點[7]。微生物生長代時短且易于大規模培養，食品和藥品行業中常通過 微生物積累代謝產物的方式獲得相應產品。乳酸菌是一種公認的食品級安全的微生物，且許多乳酸菌均具有較強的GABA合成能力[8]，因此通過乳酸菌制備GABA是一種安全有效、切實可行的方法。

乳酸菌中GABA的合成主要是通過谷氨酸脫羧酶（glutamic acid decarboxylase，GAD）催化底物谷氨酸（Glu）及其鹽類進行α-脫羧實現的。影響乳酸菌GABA積累量的因素有Glu及其鹽類、磷酸吡哆醛（pridoxal phosphate，PLP）、發酵pH值、培養基組成及外源添加成分等[9]。上述因素主要能夠增強乳酸菌細胞內GAD的活性，而GAD的表達會受到其編碼基因gad表達的影響。目前報道乳酸菌GAD的編碼基因有gadA、gadB和gadC[10]，一些乳酸菌只有一種GAD的編碼基因，而有的乳酸菌則含有多個編碼基因[9]。GABA的代謝途徑和機制在乳酸菌中的研究并不是十分深入，目前的研究主要針對GAD催化底物脫羧這一反應過程，是否有其他的代謝途徑（包括酶和基因）參與其中并不是十分清楚。

植物乳桿菌是被廣泛應用在食品工業中的乳酸菌之一，多種植物乳桿菌及其亞種具有益生特性[10-11]。本研究以一株產GABA的Lactobacillus plantarum NDC75017為研究對象，通過響應面法（response surface methodology，RSM）確定該菌株合成GABA的最佳發酵條件；同時采用實時熒光定量反轉錄聚合酶鏈式反應（real-time reverse transcript polymerase chain reaction，real-time RT-PCR）技術對發酵過程中不同時間點的GAD編碼基因gadB的表達量進行測定。上述研究不僅確定L. plantarum NDC75017積累GABA的最佳發酵條件及各因素間的相互影響；同時從基因水平上對該菌株積累GABA的方式和途徑進行初步探究，從而為解析L. plantarum GABA的代謝途徑提供一定依據。

1　材料與方法

1.1菌株與培養基

產GABA的L. plantarum NDC75017分離自內蒙古通遼地區傳統自制發酵乳，保藏于東北農業大學乳品科學教育部重點實驗室菌種庫（甘油管，－80 ℃）。

改良MRS培養基（g/L）：蛋白胨5、胰蛋白胨10、牛肉膏5、酵母粉5、葡萄糖20、瓊脂20。

1.2試劑與儀器

RNA保護試劑（No.76506）、RNA提取試劑盒（No.74104）德國Qiagen公司；PrimerScriptTMRT PCR試劑盒、DNaseⅠ、RNA酶抑制劑寶生物工程（大連）有限公司；GABA標準品、5’-磷酸吡哆醛、鄰苯二甲醛美國Sigma公司；色譜級甲醇和四氫呋喃天津光復精細化工研究所；無 水乙醇、無水乙酸鈉、硼酸等均為國產分析純。

7500Real Time PCR儀美國Applied Biosystems公司；Waters 2695GPC高效液相色譜儀美國Waters公司；Hypersil ODS2 C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）色譜柱大連依利特分析儀器有限公司；GL-21M高速冷凍離心機上海市離心機械研究所；Delta320pH計瑞士梅特勒-托利多有限公司。

1.3方法

1.3.1菌種活化與發酵

保藏菌種以2%比例接種于MRS液體培養基（pH 5.8）中，37 ℃條件下培養12 h。保藏菌種經上述方法活化2 次后即得到工作菌種。

取250 mL三角瓶內裝100 mL MRS液體培養基，工作菌種內含約108CFU/mL（平板計數），3%接種，37 ℃靜置發酵48 h。

1.3.2響應面試驗設計

在前期單因素試驗優化L. planta rum GABA產量的基礎上[12]，選擇L-谷氨酸鈉（L-monosodium gluamte，L-MSG）添加量（A）、PLP添加量（B）和發酵初始pH值（C）3 個因素與GABA產量進行響應面設計。通過Design-Expert 7.1.6軟件對試驗數據進行回歸分析，預測L. plantarum產GABA的最佳發酵條件。

1.3.3L. plantarum中總RNA的提取

分別于發酵0、4、8、12、24、48 h時取發酵液0.5 mL加入1 mL RNA保護試劑，混勻后室溫靜置5 min；4 ℃、10 000×g離心15 min，棄掉上清液，后續步驟按RNA提取試劑盒操作說明書步驟進行。

1.3.4RNA完整性及純度鑒定

提取到的RNA經DNaseⅠ酶解（37 ℃，15 min；65 ℃，10 min）以去除RNA樣品中殘留的基因組DNA。1%瓊脂糖凝膠電泳檢測RNA樣品完整性；OD260 nm/OD280 nm檢測RNA樣品純度。

1.3.5 RNA反轉錄為cDNA

操作按PrimerS criptTMRT試劑盒說明書并做適當改進，冰盒上配制反轉錄體系：5×PrimerScriptTMBuffer 4 μL，PrimerScriptTMRT Enzyme MixⅠ1 μL，隨機的6核苷酸引物1 μL，Oligo dT Primer 1 μL，RNA模板8 μL，加無RNase水至20 μL。RT-PCR反應條件（熱循環儀進行）：37 ℃，15 min；85 ℃，10 s。

1.4指標測定

1.4.1L. plantarum發酵液中GABA含量的測定

樣品前處理及柱前衍生：取適量發酵液10 000×g，4 ℃離心15 min；取上清液80 μ L與鄰苯二甲醛（o-phthalaldehyde，OPA）按1∶10體積比例混合，室溫暗處反應1 min，反應液過0.22 μm濾膜后待上機檢測。

色譜條件[11]：采用高效液相色譜（high performance liquid chromatograph，HPLC）對發酵液中GABA含量進行檢測。流動相：V（0.05 mol/L醋酸鈉緩沖液）∶V（甲醇）∶V（四氫呋喃）=50∶49∶1；流速：1 mL/min；紫外檢測波長：338 nm；洗脫時間：15 min；柱溫：30 ℃。

1.4.2L. plantarum發酵過程中gadB表達量的測定

以反轉錄成的cDNA為模板進行實時熒光定量PCR。利用軟件Primer 5.0對檢測基因gadB和管家基因GAPDH設計特異性引物（表1）。按照試劑盒說明書配制反應體系：Premix Ex TaqTM（2×）10 μL，PCR正向引物和反向引物（10 μmol/L） 0.4 μL，ROXⅡ 0.4 μL，cDNA模板2 μL，SYBG 1 μL，加無菌雙蒸水至20 μL。實時熒光定量PCR反應條件：95 ℃預變性10 s；95 ℃ 5 s，60 ℃ 34 s，40 個循環。每次PCR反應均進行擴增產物的熔解曲線分析，以確定擴增產物的特異性。基因表達量的定量以GAPDH為內參基因，以無菌雙蒸水代替cDNA模板作為陰性對照，分析各基因Ct值（每個樣品設置5 次平行實驗）。利用2－△△Ct法對gadB表達量進行相對定量（其中，Ct是擴增基因達到閾值時的循環數，△Ct是目的基因與內參基因Ct值差值，△△Ct是實驗各時間點與實驗起始時間點△Ct值差值）。

表1　熒光定量PCR引物的堿基序列、Tm值及引物的大小Table 1 Sequencess, Tmand lengths of primers used for real-time PCR

1.5數據處理

采用SPSS軟件中的Duncan’s多重比較檢驗法對實驗數據進行多重顯著性分析。

2　結果與分析

2.1響應面分析

對影響L. plantarum積累GABA的L-MSG添加量（A）、PLP添加量（B）、發酵初始pH值（C）進行了三因素三水平響應面分析，根據Box-Behnken原理設計試驗及結果見表2。通過Design Expert軟件對表2中的數據進行二次多元回歸擬合，得到了GABA積累量（Y）的預測值對編碼自變量A、B和C的二次多項式回歸方程：Y＝431.05－92.76A－4.82B＋49.32C＋58.31AB＋35.21AC＋131.59BC－137.94A2－99.21B2－86.28C2。模型方程回歸方差分析（表3）顯著性結果表明，該模型回歸顯著（P＜0.05），并且該模型的R2=0.958 9；RA2dj=0.906 0，說明回歸方程擬合程度良好，可靠性較高，自變量和響應值之間的線性關系高度顯著，可用于植物乳桿菌產GABA含量的理論預測。

表2　Box-Behnken響應面分析方案與試驗結果Table 2 Response surface design with experimental and predicted values of GABA yield

表3　回歸模型方差分析Table 3 Analysis of variance of regression model for ooptimizing fermentation conditions for GABA accumulationn

2.2L. plantarum GABA產量的影響因素及發酵條件的確定

利用軟件對表2中數據進行二次多元回歸擬合，得到相應的二次回歸方程響應面及等高線見圖1～3。由圖1可知，當發酵初始pH值為4.5時，GABA大量積累的底物濃度范圍是50～75 mmol/L。在此范圍內，當PLP濃度為10～15 μmol/L時，GABA的產量隨輔酶添加量的增大而升高；繼續增大輔酶添加量，GABA的積累量反而降低。L-MSG可以明顯影響發酵過程中GABA的積累量，但PLP對其影響并不明顯，而二者之間的交互作用卻對其產量影響明顯（表3），說明了輔酶對GABA的影響具有一定底物依賴性。Bai Qingyun等[13]在研究粟米種子發酵產生GABA過程中同樣發現了相似的結果。一些還研究指出，發酵過程中pH值的變化會影響GABA的積累量，這是由于發酵環境的pH值不僅可以影響微生物生長，還可以影響微生物體內某些關鍵酶的活性[14-16]。上述實驗結果表明，底物添加量、輔酶添加量和發酵初始pH值均是影響L. plantarum合成GABA的關鍵因素（底物添加量和發酵初始pH值影響顯著），且各因素間的交互作用也對其合成量影響明顯。經軟件分析，預測得到GABA的最優發酵條件：L-MSG添加量為68.03 mmol/L、PLP添加量為20.92 μmol/L、發酵初始pH值為4.65。

圖 11 L-MSG添加量和PLP添加量交互作用對GABA產量的影響Fig.1 Effect of interaction between L-MSG concentration and PLP concentration on GABA accumulation

圖 22 L-MSG添加量和發酵初始pH值交互作用對GABA產量的影響Fig.2 Effect of interaction between L-MSG concentration and initial fermentation pH on GABA accumulation

圖3　PLP添加量和發酵初始pH值交互作用對GABA產量的影響Fig.3 Effect of interaction between PLP concentration and initial fermentation pH on GABA accumulation

2.3不同發酵時間點gadB表達量及GABA產量的變化

圖 44 L. plantarum NDC75017總RNA完整性鑒定Fig.4 Integrity identification of total RNA extracted from L. plantarum NDC75017

由圖4可知，按響應面分析得到的最佳條件對L. plantarum進行發酵，分別于發酵 0、4、8、12、24、48 h時提取菌體RNA。RNA經1%瓊脂糖電泳檢測23S和16S條帶清晰，5S條帶較弱，說明RNA完整性較好；紫外分光光度計檢測OD260 nm/OD280 nm比值大于1.9，說明RNA純度較高，可用于后續反轉錄實驗。RNA反轉錄成cDNA后進行Real-time PCR，以GAPDH為內參基因對不同發酵時間點gadB的表達量進行相對定量分析（圖5）。以發酵0 h的表達量為參照，gadB表達量隨發酵時間的延長呈現先升高后下降的趨勢，24 h時表達量達到最高值。與相同發酵時間點GABA的產量相比（圖6），二者的變化趨勢有所不同。發酵初期（0～4 h），GABA的產量已有顯著增加，從12.065 mg/L增加至73.742 mg/L，而gadB的表達量卻沒有明顯的改變。發酵進入菌體生長的穩定期后，gadB的表達量在24 h達到峰值后又下降，48 h時表達量處于較低水平，然而GABA的積累量則在24～48 h這個時間段大量積累，達到整個發酵過程中的最高值（390.70 mg/L）。文獻[8]報道乳酸菌合成GABA主要受到GAD酶的影響，但也有文獻指出GABA在基因或轉錄水平上的調控與GAD編碼基因的關系并不是非常密切[20]。與基因表達相比，相關產物的合成具有一定的滯后性，但本實驗的結果顯示，GABA的產量與gadB的表達在時間上的關系并不是單純的滯后關系，因此推測發酵過程中菌體合成GABA可能并不只受到GAD和其編碼基因gadB的影響，應該還有其他酶和/或基因參與其中的調控。

圖 55 L. plantarum NDC75017不同發酵時間點ggaaddBB相對表達量（n==55）Fig.5 Relative expression of gadB in L. plantarum NDC75017 at different time points (n=5）

圖 66 L. plantarum NDC75017不同發酵時間點GABA積累量Fig.6 GABA accumulation by L. plantarum NDC75017 at different time points during fermentation

植物中G A B A的代謝途徑是從三羧酸循環（tricarboxylic acid cycle，TCA）中衍生出來的一個側枝，又稱GABA支路（GABA shunt）。這個短的代謝途徑中除了含有GAD酶外，還有兩個與GABA分解代謝相關的酶，分別為GABA轉氨酶（GABA-T）和琥珀酸半醛脫氫酶（succinate-semialdehyde dehydrogenase， SSADH）[17]。Yang Runqiang[18]和Guo Yuanxin[19]等分別研究了GABA支路和多胺降解途徑對發酵蠶豆和大豆中GABA積累的影響，他們指出GAD和二胺氧化酶（diamine oxidase，DAO）的活性都會影響蠶豆和大豆發酵過程中GABA的積累。在微生物（乳酸菌）發酵過程中是否也存在與GABA支路相偶聯的代謝途徑（包括關鍵酶和調控基因）共同影響著GABA的積累還沒有明確的報道，需要通過進一步的實驗加以驗證。

GABA代謝相關酶（脫羧酶和轉氨酶）功能性作用的發揮與其編碼基因的表達密切相關，因此研究乳酸菌發酵過程中關鍵調控基因的表達對理解乳酸菌GABA的代謝具有重要幫助。Mazzoli等[20]采用轉錄組學結合蛋白組學的分析方法，考察了不同發酵條件下，乳酸乳球菌（Lactococcus lactis）產生GABA的相關蛋白和基因的表達情況。研究發現，在添加有一定量底物谷氨酸時，有30 個基因和/或蛋白與不添加谷氨酸時的表達量有明顯差異，這樣的結果說明了乳酸菌發酵過程中GABA產量的積累不是僅受到一個基因的單獨調控，而是存在多個基因的共同調控。

3　結 論

植物乳桿菌（L. Plantarum）NDC75017發酵過程中產GABA的最佳底物、輔酶的添加量以及發酵初始pH值分別為68.03 mmol/L、20.92 μmol/L和4.65。L-MSG、PLP添加量和發酵初始pH值能夠影響L. plantarum NDC75017發酵過程中GABA的積累，其中L-MSG濃度和發酵初始pH值對其影響顯著。上述3 個影響因素中，底物添加量與輔酶添加量、輔酶添加量與發酵初始pH值之間形成的交互作用也對GABA產量的積累產生明顯的影響。發酵過程中基因gadB的表達量和GABA積累量的變化趨勢不同證明了L. plantarum NDC75017合成GABA不僅受到GAD和其編碼基因影響和調控，同時，其他與GABA支路相偶聯的代謝途徑和調控基因可能也參與其中。

參考文獻：

[1]葉惟憐. γ-氨基丁酸的發現史[J]. 生理科學進展, 1986, 17(2): 187-189.

[2]KAUZUHITO H, MASAYUKI K, KATSUO K. Mechanism underlying gamma-aminobutyric acid-induced antihypertensive effect in spontaneously hypertensive rats[J]. European Journal of Pharmacology, 2002, 438: 107-113.

[3]GAO Shangfeng, BAO Aiming. Corticotropin-releasing hormone, glutamate, and gamma-aminobutyric acid in depression[J]. Neuroscientist, 2011, 17(1): 124-144.

[4]OZKAN Y, YILMAZ O, TUZCU M, et al. Effects of dietary taurine and gamma-aminobutyric acid on the steroil CoA desaturase and delta 6, 5 desaturase enzyme activities in liver tissues of rats[J]. Journal of Animal and Veterinary Advances, 2008, 7(11): 1450-1457.

[5]ESQUIFINO A I, CANO P, JIMENEZ V, et al. Changes of prolactinregulatory mechanisms in aging: 24 h rhythms of serum prolactin and median eminence and adenohypophysial concentration of dopamine, serotonin gamma-aminobutyric acid, taurine and somatostatin in young and aged rats[J]. Experimental Gerontology, 2004, 39: 45-52.

[6]SOLTANI N, QIU H, ALEKSIC M, et al. GABA exerts protective and regenerative effects on islet beta cells and reverses diabetes[J]. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United Stated of America, 2011, 108(28): 11692-11697.

[7]LI Haixing, QIU Ting, GAO Dandan, et al. Medium optimization for production of gamma-aminobutyric acid by Lactobacillus brevis NCL912[J]. Amino Acids, 2010, 38: 1439-1445.

[8]LI Haixing, CAO Yusheng. Lactic acid bacterial cell factories for gamma-aminobutyric acid[J]. Amino Acids, 2010, 39: 1107-1116.

[9]TRAMONTI A, VISCA P, de CANIO M, et al. Functional characterization and regulation of gadX, a gene encoding an AraC/XylS-like transcriptional activator of the Escherichia coli glutamic acid decarboxylase system[J]. Journ al of Bacte riology, 2002, 184(10): 2603-2613.

[10]BRINQUES G B, AYBU M A Z. Effect of microencapsulation on survival of Lactobacillus plantarum in simulated gastrointestinal conditions, refrigeration, and yogurt[J]. Journal of Food Engineering, 2011, 103: 123-128.

[11]de VRIES M C, VAUGHAN E E, KLEEREBEZEM M, et al. Lactobacillus plantarum-survival, functional and potential probiotic properties in the human intestinal tract[J]. International Dairy Journal, 2006, 16: 1018-1028.

[12]薛玉清. 富含γ-氨基丁酸發酵乳的研制[D]. 哈爾濱: 東北農業大學, 2012.

[13]BAI Qingyun, CHAI Meiqing, GU Zhenxin, et al. Effects of components in culture medium on glutamate decarboxylase activity and γ-aminobutyric acid accumulation in foxtail millet (Setaria italic L.) during germination[J]. Food Chemistry, 2009, 116: 152-157.

[14]NORIKO K, JUN S, SHINICHI K, et al. Production of γ-aminobutyric acid (GABA) by Lactobac illus paracaseiisolated isolated from traditional fermented foods[J]. Food Microbiol o gy, 2005, 22: 497-504.

[15]SEUNG Y C, MIN J P, KI M K, et al. Production of high γ-aminobut yric acid (GABA) sour kimchi using lactic acid bacteria isolated from Mukeunjee kimchi[J]. Food Science and Biotechnology, 2011, 20(2): 403-408.

[16]CAGNO P D, MAZZACANE F, RIZZELLO C G, et al. Synthesis of γ-aminobutyric acid (GABA) by Lactobacillus plantarum DSM19463: functional grape must beverage and dermatological applications[J]. Applied Microbiology and Biotechnology, 2010, 86: 731-741.

[17]宋紅苗, 陶躍之, 王慧中, 等. GABA在植物體內的合成代謝及生物學功能[J]. 浙江農業科學, 2010(2): 225-230.

[18]YANG Runqiang, GUO Qianghui, GU Zhenxin. GABA shunt and polyamine degradation pathway γ-aminobutyric acid accumulation in germinating fava bean (Vicia faba L.) under hypoxia[J]. Food Chemistry, 2013, 136: 152-159.

[19]GUO Yuanxin, YANG Runqiang, CHEN Hui, et al. Accumulation of γ-aminobutyric acid in germinated soybean (Glycine max L.) in relation to glutamate decarboxylase and diamine oxidase activity induced by additives under hypoxia[J]. European Food Research and Technology, 2012, 234: 679-687.

[20]MAZZOLI R, PESSIONE E, DUFOUR M, et al. Glutamate-induced metabolic changes in Lactococcus lactis NCDO 2118 during GABA production: combined transcriptomic and proteomic analysis[J]. Amino Acids, 2010, 39: 727-737.

Influencing Factors and Metabolic Mechanism of Gamma-Aminobutyric Acid Accumulation by Lactobacillus plantarum NDC75017

LI Li1, MAN Chaoxin2, LIU Shaomin1, LI Ting1, NIU Jieting1, JIANG Yujun1,2,*
(1. Key Laboratory of Dairy Science, Ministry of Education, College of Food Science and Engineering, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China; 2. National Research Center of Dairy Engineering and Technology, Northeast Agricultural University, Harbin 150028, China)

Abstract:The objectives of this work were to explore the factors influencing gamma-aminobutyric acid (GABA) accumulation by Lactobacillus plantarum NDC75017 and the relevant metabolic mechanism. Response surface methodology (RSM) was adopted to optimize the fermentation conditions for GABA production. Then, GABA production and the expression of glutamic acid decarboxylase (GAD) encoding gene gadB at different time points were measured by high performance liquid chromatography (HPLC) and real-time reverse transcription PCR (real-time RT-PCR), respectively. The optimal concentrations of L-mono sodium glutamate (L-MSG) and 5’-pridoxal phosphate (PLP), and initial fermentation pH were 68.03 mmol/L, 20.92 μmol/L, and 4.65, respectively. Meanwhile, the yield of GABA was also significantly affected by the interactions between L-MSG and PLP, and between PLP and pH (P < 0.05). In the fermentation process (0–48 h), the expression of gadB increased at first and then decreased after 24 h, which was different from the variation trend of GABA production. These results indicated that the concentrations of L-MSG and PLP, initial fermentation pH, and their interactions could significantly affect GABA accumulation by L. plantarum NDC75017. Meanwhile, in addition to GAD and gadB, other related enzymes and genes related to the GABA shunt might be also involved in the synthesis of GABA by L. plantarum NDC75017.

Key words:gamma-aminobutyric acid; Lactobacillus plantarum; glutamic acid decarboxylase; fermentation

doi:10.7506/spkx1002-6630-201507016

中圖分類號：TS201.3

文獻標志碼：A

文章編號：1002-6630（2015）07-0084-06

*通信作者：姜毓君（1971—），男，教授，博士，研究方向為食品科學。E-mail：yujun_jiang@163.com

作者簡介：李理（1988—），女，碩士研究生，研究方向為食品微生物與生物技術。E-mail：jenniferli19881107@gmail.com

基金項目：國家自然科學基金面上項目（31171718）；國家高技術研究發展計劃（863計劃）項目（2011AA100902）；黑龍江省科研機構創新能力提升專項計劃項目（YC13D005）

收稿日期：2014-04-02