探究溶血標本對酶聯免疫法檢測HBsAg的影響

陳燕

(江蘇無錫江陰市人民醫院　江蘇　無錫　214400)

探究溶血標本對酶聯免疫法檢測HBsAg的影響

陳燕

(江蘇無錫江陰市人民醫院江蘇無錫214400)

摘要目的：探討溶血標本對酶聯免疫法檢測HBsAg的影響。方法：選取2013年12月-2015年3月來我院進行治療的患者126例，其中陰性標本51個，乙型肝炎患者標本75個，進行常規檢測后認為造成溶血情況，使用酶聯免疫法進行檢測，觀察HBsAg的具體情況。結果：經過檢驗后發現，溶血情況的發生對測定結果有一定的干擾，從乙肝患者的血液標本吸光度情況方面來看，受到的干擾較大，但是并不影響對疾病結果的判定，P>0.05，無顯著性差異和統計學意義。結論：溶血標本對酶聯免疫法檢測HBsAg的影響不大，在血紅蛋白小于10g/L的情況下并不會對異性肝炎病毒表面的抗原測定的結果產生影響，但是患者的標本產生溶血情況依然不能忽視。

關鍵詞溶血標本；酶聯免疫法；HBsAg的影響；吸光度情況；血紅蛋白

為了探討溶血標本對酶聯免疫法檢測HBsAg的影響，我院特進行了一次研究，取得了較為良好的效果，現將具體情況報告如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2013年12月-2015年3月來我院進行治療的患者126例，其中陰性標本51個，乙型肝炎患者標本75個。

1.2 方法

進行常規檢測后認為造成溶血情況，使用酶聯免疫法進行檢測。酶聯免疫法使用的儀器有：sysmex kx-21N血球分析儀、RT-600酶標分析儀、RT-300洗板機、振蕩器、乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑，乙型肝炎病毒表面抗原診斷試劑主要由萬泰生物藥業提供。

1.3 操作方式

收集所有患者標本的紅細胞，將期分別放在冰箱中進行冷凍，造成溶血情況。使用含量為0.9%的NaCl溶液對標本的血紅蛋白含量進行調整，將其控制在5g/L、10g/L。進行酶聯免疫法檢測按照使用的說明書進行即可，采用樣本吸光度值和臨界值進行比較，對患者陰陽性情況進行判定。

1.4 統計學方法

對上述患者各項記錄數據進行分類和匯總處理，采取統計學軟件SPSS19.0對上述匯總數據進行分析和處理，計量資料采用t檢驗，計數資料采用卡方檢驗，P<0.05，具有顯著性差異和統計學意義。

2.結果

經過檢驗后發現，血紅蛋白小于5g/L時陽性檢出的例數有3例，陰性檢出的例數有48例，檢出率為5.88%。血紅蛋白小于10g/L時陽性檢出的例數有3例，陰性檢出的例數有48例，檢出率為5.88%。

將上述情況與空白標本的結果進行對比，將相關結果輸入統計學軟件，X2=2.134，P<0.05，具有顯著性差異和統計學意義。

在HBsAg炎性標本測定結果方面，所有患者的檢測結果均為陽性，P>0.05，無顯著性差異和統計學意義。在乙肝患者的標本結果中，溶血情況的發生會使吸光度情況產生波動，在本次研究中，乙型肝炎患者血紅蛋白5g/L的標本吸光度增加了13.04%；乙型肝炎患者血紅蛋白10g/L的標本吸光度增加了15.08%。

3.討論

酶聯免疫檢測測定的方式主要是以抗原和抗體分子為測定靶標的方法，亦是目前最為常用的實驗室診斷方法之一，屬于標記免疫技術的一種。側重測定發生需要經過采樣、保溫、洗滌、比色等步驟進行性操作。如果在操作的過程中稍有差池就會出現溶血情況[1]。

溶血情況的發生會給檢驗的結果造成較為嚴重的影響，為了降低此種情況發生的幾率，在實驗的各個步驟中都需要特別注意：1、在加樣時需要直接將樣本加到反應杯的底部，不能將其加到反應杯的上部和邊緣，尤其是酶試劑[2]，這樣能夠減少非特異性吸附現象的發生；2、加樣步驟完成之后需要將其放置在振蕩器中，但是需要注意的是振蕩器的速度不能過快，放置發生液體飛濺的情況發生；3、在洗滌的過程中需要采用洗板機，并且需要將程序設置為雙吸，清洗液的劑量為350μl，將潛水泵的壓力調整到合適的范圍內[3]。另外需要注意的是，清洗反應杯之后需要確認反應杯之間是否發生污染現象，這樣才能夠減少非特異性吸附情況發生的幾率；4、酶標分析儀比色過程中采用雙波長，雙波長的應用能夠大大減少非特異性吸附對結果的影響，另外還能夠減少反應杯外壁是否存在手印等不易察覺的贓物，降低了對結果的影響。

綜上所述，溶血標本對酶聯免疫法檢測HBsAg的影響不大，在血紅蛋白小于10g/L的情況下并不會對異性肝炎病毒表面的抗原測定的結果產生影響，但是患者的標本產生溶血情況依然不能忽視，尤其是在比色結果處在臨界值的標本，需要采取相應的措施進行補救，這樣才能夠在最大程度上提高疾病診斷的正確率，減少漏診、誤診情況的發生。上述觀點具有極強的臨床推廣價值，值得在臨床中大力推廣應用。

參考文獻

[1]張海軍. 類風濕因子對酶聯免疫法檢測HBsAg的影響[J]. 內蒙古醫學雜志,2013,03:295-297.

[2]張金鳳,劉春娃. 溶血標本對酶聯免疫法檢測HBsAg的影響[J]. 中國當代醫藥,2011,07:92.

[3]李建華,王萬倉. 溶血和帶血細胞標本對HBsAg結果的影響[J]. 檢驗醫學與臨床,2008,18:1122-1123.

【中圖分類號】R556.7

【文獻標識碼】B

【文章編號】1009-6019(2015)15-0043-02