EGFR、Ki-67在三陰性乳腺癌中的表達及相關性臨床研究

栗艷松

乳腺癌是當今世界上嚴重危害女性健康的惡性腫瘤之一，全世界每年新發現的病例超過100萬，在我國隨著經濟的發展，人民生活水平的提高，乳腺癌發病率呈逐步上升的趨勢。其中三陰性乳腺癌(triple negative breast cancer，TNBC)是指雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)和人表皮生長因子受體2(Her-2)均為陰性的乳腺癌，占全部乳腺癌的 10% ～ 20.8%［1］。TNBC與其他類型乳腺癌相比較，具有侵襲性強、預后差的特點［2，3］，并且缺乏內分泌及特異性靶向治療靶點［4，5］。本研究通過免疫組織化學的方法分析EGFR、Ki-67在TNBC中的表達，了解它們與病理特征和預后的關系，并研究EGFR、Ki-67基因表達的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集我院病理科2008至2013年有完整標本檔案的TNBC 67例和NTNBC 125例臨床資料。所有病例術前均未接受放射治療和化學治療，患者均為女性。

1.2 檢測方法 采用免疫組化 SP法，第一抗體EGFR、Ki-67及SP通用試劑盒均購自福州邁新生物技術開發有限公司，操作步驟按試劑盒說明書進行。用已知陽性切片作陽性對照，PBS緩沖液代替一抗作陰性對照。

1.3 陽性判定標準 陽性物質為棕黃色，ER、PR、Ki-67陽性信號位于細胞核;Her-2按照乳腺癌Her-2檢測指南(2009版)標準判定［6］，細胞膜陽性(+++)視為陽性。EGFR免疫組化染色以細胞漿(或細胞膜)中出現棕黃色顆粒沉著為陽性細胞。

1.4 統計學分析 應用SPSS 22.0統計軟件，計數資料比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 EGFR、Ki-67在乳腺癌中的表達比較 EGFR、Ki-67在TNBC及NTNBC中的陽性率比較，差異有統計學意義(P＜0.05)。見表1。

表1 EGFR、Ki-67在乳腺癌中的表達比較 例(%)

2.2 EGFR、Ki-67的表達與TNBC臨床病理參數的關系 EGFR在TNBC中的表達與年齡、腫瘤大小、淋巴結轉移及病理學分級無關(P＞0.05)，與病理類型有關(P＜0.05)。Ki-67在TNBC中的表達與年齡、腫瘤大小、淋巴結轉移、病理類型及病理學分級無關(P＞0.05)。見表2。

表2 EGFR、Ki-67表達與TNBC臨床病理參數的關系 例

2.3 EGFR、Ki-67在TNBC中的表達 EGFR陽性表達定位于細胞漿，Ki-67陽性表達定位于細胞核。見圖1～4。

圖1 EGFR陽性(SP×100)

圖2 EGFR陽性(SP×400)

圖3 Ki-67陽性(SP×100)

圖4 Ki-67陽性(SP×400)

3 討論

EGFR是跨膜酪氨酸激酶生長因子受體，是人表皮生長因子(HER)家族成員之一，EGFR是一種糖蛋白，是原癌基因c-erbB-1的表達產物，主要位于細胞膜，被激活后產生酪氨酸激酶活性，進一步激活了下游的信號通路，調節細胞增殖、生長等過程［7］。EGFR過度激活可以促進腫瘤細胞增殖、轉移，抑制凋亡。有研究通過抑制EGFR及其下游信號通路，研制了新一代治療TNBC的納米藥物［8］。研究表明，EGFR的過表達在乳腺癌中達14% ～90%，與組織學類型、分級及淋巴結轉移等有關［9］，本研究中，EGFR在TNBC中明顯高表達，顯著高于 NTNBC組，與劉莉萍等［10］報道一致。

Ki-67是一種與增殖細胞相關的核抗原，因為半衰期短，為1 h或更短，所以可以準確的反應腫瘤細胞的增殖活性［11，12］。Ki-67陽性表達說明腫瘤細胞增殖活躍。Nakagawa等［13］研究表明，在TNBC中Ki-67高表達與淋巴結轉移有顯著關系。另有研究表明，在TNBC中Ki-67高表達組比Ki-67低表達組更容易復發［14］。在本研究當中，TNBC組Ki-67的陽性表達率明顯高于NTNBC組，表明TNBC的增殖活性強，提示Ki-67高表達很可能是TNBC預后差的一個重要原因。

本研究結果顯示在TNBC中EGFR與Ki-67均高表達，但是兩者無相關性，與張淼等［15］研究結果一致，但與有些文獻報道不完全一致，考慮到可能與樣本量的大小及樣本的構成不同等因素有關，這點應該需要擴大樣本量進一步研究。

1 Bauer KR，Brown M，Gress RD，et al.Descriptive analysis of estrogen receptor(ER)-negative，progesterone receptor(PR)-negative，and HER2-negative invasive breast cancer，the so-called triple-negative phenotype:a population-based syudy from the California cancer Registry.Canaer，2007，109:1721-1728.

2 Haffty BG，Yang Q，Reiss M，et al.Locoregional relapse and distand metastasis in conservatively managed triple negative early-stage breast cancer.J Clin Oncol，2006，24:5652-5657.

3 Dent R，Trudeau M，Pritchard KI，et al.Triple-negative breast cancer:clinical features and patterns of recurrence.Clin Cancer Res，2007，13:4429-4434.

4 Cleator S，Heller W，Coombes RC.Triple-negative breast cancer:therapeutic options.Lancet Oncol，2007，8:235-244.

5 Rakaha EA，El-Sayed ME，Gteen AR，er al.Prognostic markers in Triplenegative breast cancer.Lancet Oncol，2007，109:25-32.

6 乳腺癌Her-2檢測脂南(2009版)編寫組.乳腺癌Her-2檢測脂南(2009 版).中華病理學雜志，2009，38:836-840.

7 Kuhnen C，Winter BU.EGFR-expression in pulmonary neuroendocrine cell hyperplasia.Pathologe，2006，27:147-151.

8 Inoue S，Patil R，Portilla AJ，et al.Nanobiopolymer for direct targeting and inhibition of EGFR expression in triple negative breast cancer.Plos one，2012，7:31070.

9 張永華，孫治軍.表皮生長因子與乳腺癌的研究進展.現代腫瘤醫學，2011，19:1454-1456.

10 劉莉萍，孫鳳玲，魏亞，等.表皮生長因子、P53、Ki-67在三陰性乳腺癌的表達及其意義.腫瘤研究與臨床，2013，25:669-671.

11 Ciulla MM，Acquistapace G，Toffetti L，et al.Ki-67 cytop lasmic expression:observations in norm al tissue from heart atr ia lappendages of healthy rats.Cell Cycle，2009，8:2125-2127.

12 Preusser M，Heinzl H，Gelpi E，et al.Ki67 index in intracrania lependymom a:a promising histo patho logical cand idate biom arker.Histopathology，2008，53:39-47.

13 Nakagawa M，Bando Y，Nagao T，et al.Expression of p53，Ki-67，E-cadherin，N-cadherin and TOP2A in triple-negative breast cancer.Anticancer research，2011，31:2389-2393.

14 Keam Seock-Ah B，Kyung-Hun I，Lee D，et al.Ki-67 can be used for further classification of triple negative breast cancer into two subtypes with different response and prognosis.Breast cancer research(BCR)，2011，13:R22-R25.

15 張淼，任力，胡蓉，等.Ki-67、EGFR在三陰性及非三陰性乳腺癌中的表達與相關性分析.武警醫學，2014，25:1256-1258.