使用高效液相色譜儀檢測蔬菜農藥殘留的幾點體會

徐培培　馬　強

（1江蘇省如東縣農產品質量檢測中心　226400；2蘇州大學衛(wèi)生與環(huán)境技術研究所）

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使用高效液相色譜儀檢測蔬菜農藥殘留的幾點體會

徐培培1馬強2

（1江蘇省如東縣農產品質量檢測中心226400；2蘇州大學衛(wèi)生與環(huán)境技術研究所）

本文主要從農產品的前處理、使用器皿、流動相及色譜使用前的預處理等幾個方面介紹高效液相色譜儀的正確使用和日常維護。

高效液相色譜儀；農產品；正確使用；日常維護

高效液相色譜儀是分析實驗室常用的測試儀器之一，其應用越來越廣泛。在使用過程中，若使用方法不當會導致分析數(shù)據(jù)錯誤，直接影響所測數(shù)據(jù)的準確性和儀器的正常工作。農產品質量安全現(xiàn)在越來越受到廣大消費者的重視，本文主要介紹在使用高效液相色譜儀測定農產品農藥殘留時，前處理需要注意的事項。

1　農產品的前處理環(huán)節(jié)

檢測時需稱取樣品25.00g。新鮮剛粉粹的樣品可直接稱取；解凍后的樣品，在稱取時應先混勻解凍液和解凍物再稱取。加入乙腈進行勻漿的過程，每次勻漿完1個樣品應徹底清洗勻漿機，勻漿的時間和頻率一定要按標準操作。加鹽過濾后，1批樣品需同時搖勻和靜置，保證搖勻次數(shù)和靜置時間一樣，確保平行性。靜置后吸取定量溶液置于燒杯中，可以進行蒸干或風干。蒸干時應確保有1～2滴溶液的狀態(tài)，避免完全蒸干，否則會損失農藥殘留的量。蒸干操作不熟練，可采用風干方法。在過凈化柱的環(huán)節(jié)，應先清洗凈化柱，操作過程中應確保凈化柱的海綿部分不能過干，要使溶液與海綿上部分相切。甲醇定容環(huán)節(jié)，應采用少量多次方法用甲醇清洗燒杯進行定容，以確保農藥殘留量不會損失。

2　儀器使用時對環(huán)境的要求

使用高效液相色譜儀時，控制環(huán)境溫度在4～35℃，操作期間應盡量降低溫度變化幅度，防止形成露珠；環(huán)境相對濕度保持45%～85%；保證通風良好，沒有酸性或堿性氣體，沒有溶劑蒸汽。儀器不可直接暴露在陽光下，保持環(huán)境整潔，避免強烈振動和晃動。

3　使用器皿的選擇及清洗

高效液相色譜儀對環(huán)境條件特別敏感，實驗器具應保持潔凈，否則影響實驗結果的準確性。有些樣品會在試管壁、燒杯壁吸附殘留，每次使用的燒杯、試管都應進行超聲清洗，后用蒸餾水清洗、烘干。測定標準樣品，濃度較高，進樣針最好專針專用，每次用完后用甲醇進行浸泡、清洗。

4　色譜分析前的準備工作

采用高效液相色譜分析法，最常用紫外檢測器，因此所用溶劑的吸光度要非常小，可使用甲醇、乙醇、乙腈等。有機溶劑空氣含量高，在未使用失效的流動相時，應盡量除去溶解在流動相中的氣體，否則基線會因為氣泡干擾、單向閥的故障、柱效降低而產生波動。分析前，重視色譜柱的預處理和平衡過程。實驗前，首先用純甲醇進行排氣、沖洗色譜柱和管路30min左右，將色譜柱中的純有機溶劑替換掉，然后再用所需流動相進行足夠時間的平衡，大約1h。在色譜柱平衡30min時打開檢測器，平衡近1h時打開色譜工作站，點擊查看基線是否走平直，基線走平直后方可進行分析檢測，以保證檢測結果的準確性和保留時間的重復性。調流速時，要按小梯度向上調節(jié)，緩慢進行，直至調到所需流速。分析前的流動相脫氣、色譜管路及泵內排氣非常重要，否則在實驗過程中就會造成檢測器噪聲加大、泵的流速不穩(wěn)、壓來回波動很大、降低柱效、檢測器采集的圖像基線很難穩(wěn)定和走直、出現(xiàn)基線漂移和波動、色譜峰面積不重現(xiàn)，最終影響峰面積的讀取。

5　色譜分析過程中操作進樣

手動進樣，樣品要通過0.45um的過濾器進行過濾，除去樣品中外來的物質和灰塵。若樣品杯中有上次進樣時的樣品殘留，應先在LOAD位置時，以注射器將流動相注入進樣閥內清洗幾次，然后將進樣閥板手扳至INJECT位置，再以流動相清洗幾次，再將樣品注射到進樣閥里。按照上述步驟操作，可避免由進樣閥引起的污染，從而消除干擾峰并提高分析結果的準確性。

6　數(shù)據(jù)和圖像結果分析

色譜工作站的積分設置方式有兩種：一種是自動積分，一種是手動積分。要將兩者積分方法有效結合使用。

7　高效液相色譜議的日常維護

色譜分析結束后，應及時清洗色譜柱。用純甲醇溶劑將吸附在柱內的極性小的物質洗脫下來，清理30min以上，色譜柱中不可進入含有微粒的樣品。高壓泵在有氣泡時，功能正常，在更換試劑瓶或給瓶中添加溶劑時必須停泵。若不經常使用色譜儀，也應定期清洗色譜柱，每月清理1次，每次30min以上。每4個月用超聲波清洗機清洗溶劑過濾器。

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