同型半胱氨酸（HCY）檢測(cè)方法及臨床意義

吉林省洮南市人民醫(yī)院（137100）楊雙全

同型半胱氨酸，又名高半胱氨酸，是一種非必需氨基酸，是甲硫氨酸在肌肉等組織內(nèi)在合適的內(nèi)環(huán)境代謝產(chǎn)物，是一種多功能損傷因子。人體血漿中HCY正常值范圍5～15μmol/L，若超出則可診斷為高半胱氨酸血癥（HHCY），HCY被廣泛應(yīng)用于心腦血管病診斷之中[1]。本次研究就HCY檢測(cè)方法及臨床意義研究進(jìn)展進(jìn)行概述。

1 HCY檢測(cè)方法

HCY檢測(cè)方法較多，現(xiàn)有的檢測(cè)方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，靈敏度均較高，高效液相色譜法準(zhǔn)確度、穩(wěn)定性較高，可作為HCY檢測(cè)參考方法，但處理標(biāo)本能力不足，不能進(jìn)行批量檢測(cè)，單一酶催化熒光比色法操作簡(jiǎn)單，處理標(biāo)本量大，可進(jìn)行臨床篩查，循環(huán)酶法操作簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確可靠，具有較大的發(fā)展?jié)摿Α?/p>

1.1 放射酶分析法 取新的EDTA抗凝血立即進(jìn)行離心，均等分成2管，一支-20℃留存待測(cè)，另一支以強(qiáng)酸處理，沉淀、離心出蛋白質(zhì)，取上清液再以堿性溶液去極中性化，-20℃保存。以二硫蘇糖醇還原2管標(biāo)本，37℃下溫育10min，得到具有放射性的S-腺苷-L-HCY，進(jìn)行高效液相色譜（HPLC）定量分析。在生理?xiàng)l件下，70%的HCY與蛋白質(zhì)以二硫化物形式存在，該法敏感度遠(yuǎn)高于普通的氨基酸分析儀，與HPLC敏感性相當(dāng)，但檢測(cè)效率易受還原劑干擾，且具有放射性，操作繁瑣。

1.2 氣相色譜檢測(cè)法 該法可同時(shí)測(cè)定半胱氨酸、蛋氨酸、胱硫醚等多種相關(guān)物質(zhì)，靈敏度、特異性均較高，當(dāng)前較成熟的技術(shù)為HPLC，在中高級(jí)醫(yī)院均得到普及。HPLC根據(jù)柱前或柱后技術(shù)，又衍生出多種改進(jìn)方法。氣相色譜檢測(cè)法缺點(diǎn)：①儀器設(shè)備昂貴，不利于大規(guī)模推廣應(yīng)用，無(wú)法作為動(dòng)態(tài)指標(biāo)監(jiān)測(cè)技術(shù)；②樣品處理、層析條件等實(shí)驗(yàn)室干擾因素較多，隨機(jī)誤差較高，需做好內(nèi)部質(zhì)控、標(biāo)準(zhǔn)化。近年來(lái)，國(guó)外還涌現(xiàn)出氣相色譜-質(zhì)譜（GCMS）聯(lián)用法、高效液相熒光檢測(cè)法等改進(jìn)技術(shù)，前者靈敏度高，后者操作簡(jiǎn)單、迅速、精確[2]。

1.3 免疫學(xué)測(cè)定法 該法是當(dāng)前應(yīng)用最廣的HCY檢測(cè)方法，是由放射酶分析法改進(jìn)而來(lái)，利用特異性較高的抗S-腺苷HCY單克隆技術(shù)，采用免疫法、熒光偏振法測(cè)定含量。操作簡(jiǎn)單，快捷高效，全自動(dòng)化程度高，隨機(jī)誤差低。

1.4 高效毛細(xì)管電泳法 50℃、PH=8條件下，以ABD-F衍生留存物，在室溫條件下，以560V/cm光滑溶凝硅石毛細(xì)管分離，以二極管檢測(cè)器測(cè)定，操作簡(jiǎn)單，耗材少，但靈敏度偏低。

2 HCY臨床意義

2.1 HCY與心腦血管病

2.1.1 HCY與動(dòng)脈粥樣硬化 研究發(fā)現(xiàn)，中度升高HHCY血癥是動(dòng)脈粥樣硬化疾病獨(dú)立危險(xiǎn)因素。HCY參與該病機(jī)制尚不清楚，可能與其誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷、加速血栓形成、促脂質(zhì)氧化、促血管平滑肌細(xì)胞、促炎癥反應(yīng)等作用有關(guān)。HHCY是動(dòng)脈粥樣硬化獨(dú)立危險(xiǎn)因素，故可導(dǎo)致冠心病發(fā)生。

2.1.2 HCY與不穩(wěn)定型斑塊 不穩(wěn)定斑塊是血栓性疾病重要危險(xiǎn)因素，研究顯示早期冠心病患者、急性心肌梗死（AMI）血漿中HCY水平均高于不穩(wěn)定型心絞痛、穩(wěn)定型小心絞痛，而AMI、不穩(wěn)定型心絞痛HCY水平差異不顯著，提示HCY可能與斑塊不穩(wěn)定有關(guān)。

2.1.3 HCY與腦血管病 有相當(dāng)一部分頸動(dòng)脈狹窄引起的腦卒中患者，無(wú)吸煙等不良行為，無(wú)高血壓等危險(xiǎn)病史，研究表明，此類患者約1/3患者合并HHCY血癥[3]。

2.1.4 HCY與急性血管事件 冠心病介入治療術(shù)后，患者HCY水平顯著上升，HCY與介入治療后并發(fā)癥密切相關(guān)，HCY可作為介入治療術(shù)后急性血栓形成、擴(kuò)張后血管夾層預(yù)測(cè)指標(biāo)。

2.1.5 HCY與心力衰竭 HCY可增加非臨床期高血壓患者心力衰竭風(fēng)險(xiǎn)，男性增加約2倍，女性增加約3倍。

2.2 HCY與腎臟病 多數(shù)HCY經(jīng)腎臟代謝清除，正常人血漿中約70%的HCY經(jīng)腎臟清除，血漿中留存7.5%～10%，與HCY有關(guān)的甲基轉(zhuǎn)移酶等物質(zhì)均存在于腎組織中，若發(fā)生腎功能減退，HCY水平可迅速升高，慢性腎衰竭患者發(fā)生心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)是一般人群10～20倍[4]。

2.3 HCY與老年癡呆癥和帕金森氏病 經(jīng)臨床研究證實(shí)，當(dāng)HCY＞14μmol/L，老年癡呆發(fā)生率增加1.8倍。HCY＞11.2μmol/L，三年后大腦顳葉（包括海馬）快速萎縮。

2.4 HCY與妊娠合并癥 妊娠期特有的血液、代謝系統(tǒng)變化及HCY循環(huán)代謝特點(diǎn)使血漿HCY水平與妊娠相關(guān)疾病發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[5]。妊娠中期血漿HCY上升并發(fā)妊娠高血壓風(fēng)險(xiǎn)增加3～4倍，妊娠高血壓孕婦血漿HCY是普通妊娠者1～2倍。HCY升高增加胎盤(pán)血栓形成風(fēng)險(xiǎn)，HHCY胎盤(pán)血栓塞風(fēng)險(xiǎn)約為1%～2%。高HCY是胎盤(pán)血管性疾病獨(dú)立危險(xiǎn)因素，與胎盤(pán)早剝密切相關(guān)。血漿HCY還與先天性心臟病、妊娠丟失密切相關(guān)，可作為不良妊娠結(jié)局預(yù)測(cè)指標(biāo)。