牛羊副結(jié)核病的流行、診斷及防制

張忠健

(黑龍江省肇東市畜牧獸醫(yī)局,黑龍江肇東 151100)

牛羊副結(jié)核病的流行、診斷及防制

張忠健

(黑龍江省肇東市畜牧獸醫(yī)局,黑龍江肇東 151100)

副結(jié)核病也叫副結(jié)核性腸炎,是由副結(jié)核分枝桿菌所致的主要是牛的一種慢性傳染病。其顯著特征是間歇性或持續(xù)性的頑固性腹瀉和漸進(jìn)性消瘦,以及增生性腸炎導(dǎo)致的腸黏膜呈腦回狀增厚。

副結(jié)核病;診斷;防制

1 流行病學(xué)

病畜和帶菌畜是主要傳染源。本病主要經(jīng)消化道感染，但也可經(jīng)胎盤感染。副結(jié)核分枝桿菌主要引起牛（尤其是乳牛）發(fā)病，幼年牛最易感。除牛外，綿羊、山羊、駱駝、鹿、豬、馬、驢等動(dòng)物也可患病。本病潛伏期甚長(zhǎng)，可達(dá)6～12個(gè)月或更長(zhǎng)，故表面上呈散發(fā)性，實(shí)際上是一種地方流行性。此病多見于母牛，公牛和閹牛少見，高產(chǎn)牛的癥狀較低產(chǎn)牛嚴(yán)重。

2 臨診癥狀

早期癥狀為間斷性腹瀉，以后變?yōu)榻?jīng)常性的頑固性拉稀，糞便稀薄惡臭，帶有黏液和氣泡。病初精神、食欲無(wú)顯著變化，以后食量逐漸減少，消瘦，常喜睡臥，泌乳量減少，最后完全停止。頜下及垂皮出現(xiàn)水腫。體溫多無(wú)明顯變化，一般經(jīng)3～4個(gè)月，最后因心力衰竭而死。綿羊和山羊感染后癥狀同牛基本相似，發(fā)病率1～10%。

3 病理變化

主要病變見于空腸、回腸和結(jié)腸前段。腸壁增厚，形成彎曲堅(jiān)實(shí)的皺褶，黏膜呈黃白色或灰黃色，黏膜上帶有黏液，漿膜下淋巴管和腸系膜淋巴管腫大，常呈索狀。腸系膜淋巴結(jié)腫大、質(zhì)軟，切面濕潤(rùn)，有黃白色壞死灶。

4 實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)

家畜副結(jié)核病檢疫常用的檢驗(yàn)方法有病原學(xué)檢查、皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)和補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)。病原學(xué)檢查主要是取病料鏡檢和從病料中分離培養(yǎng)物，用于疫病的確診。皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)用于無(wú)臨診癥狀的家畜檢疫。

4.1 病原學(xué)檢查

（1）采集病料。收集混有黏液、血液、黏膜的糞便，也可用刮匙從病畜直腸深部（約30cm）刮取少量帶有黏液的糞便，盛于小瓶。或?qū)⑸鲜霾牧现苯又瞥赏科瑪?shù)張，自然干燥，用防水紙包扎送檢。病死畜可選明顯病變腸段，用自來水沖去腸內(nèi)糞便，采取病腸鄰近的腸淋巴結(jié)和回盲瓣，裝入塑料袋中，冰凍送檢。

（2）細(xì)菌鏡檢。取糞樣或直腸刮取物（混有黏液、血液），加4～5倍蒸餾水，充分混勻，用4層紗布過濾，濾液用5000轉(zhuǎn)/min離心30min，取沉淀制成涂片2～4張。也可用糞樣或直腸刮取物直接涂片，火焰固定，用萋-尼氏抗酸染色法染色，顯微鏡觀察。副結(jié)核桿菌呈紅色球桿狀，成叢成團(tuán)，背景成藍(lán)色。

（3）細(xì)菌培養(yǎng)鑒定

A.病料處理。取糞樣1～2g，加入生理鹽水40ml充分混勻，用4層紗布過濾，收集濾液加入等體積的含有10%草酸和0.02%孔雀綠水溶液，混勻，放入37℃水浴中30min，3500～5000轉(zhuǎn)/min離心30min，取沉淀物。或者取病變腸段，剪開，沖洗掉腸內(nèi)容物，于玻璃板上攤開，用載玻片或手術(shù)刀刮取黏膜10～20g放于滅菌的帶有銅紗網(wǎng)的乳缽中研磨，邊研邊添加0.5%胰酶水溶液40ml，制成懸液；用1摩爾/升氫氧化鈉調(diào)pH至9.0，放在燒杯中，室溫下在磁力攪拌器上攪拌1h，再以5000轉(zhuǎn)/min離心30min，取沉淀物。或者取腸淋巴結(jié)10～20g，剔除脂肪后剪碎，按前面的操作方法研磨、離心、取沉淀物。

B.培養(yǎng)。將沉淀物涂片鏡檢，并將每份病料接種3～5管馬鈴薯湯培養(yǎng)基，第二天將露在試管外的棉塞剪去，用蠟封管口，37℃培養(yǎng)。一般經(jīng)1～2個(gè)月出現(xiàn)肉眼可見的、針尖大的灰黃色隆起、不透明、邊緣不太整齊的細(xì)小菌落，鏡檢可見細(xì)小抗酸桿菌。未長(zhǎng)出菌落的培養(yǎng)管，須培養(yǎng)到6個(gè)月，若仍未見菌落生長(zhǎng)，方可棄去。

C.鑒定。分離出的細(xì)菌培養(yǎng)物，分別接種1管加有分枝桿菌素和1管不加分枝桿菌素的Dubos培養(yǎng)基上，37℃溫箱中培養(yǎng)20～30d。若是副結(jié)核分枝桿菌，則在加入分枝桿菌素的培養(yǎng)基上長(zhǎng)生，而后一種培養(yǎng)基則無(wú)菌生長(zhǎng)。

4.2 皮內(nèi)變態(tài)反應(yīng)

（1）材料準(zhǔn)備：提純副結(jié)核菌素或禽型提純結(jié)核菌素（購(gòu)自獸醫(yī)生物藥品廠）、游標(biāo)卡尺、注射器等。

（2）檢驗(yàn)方法：在牛頸左側(cè)中部上1/3處剪毛，直徑約10～15cm2，用卡尺測(cè)量皮膚皺褶的厚度并記錄。剪毛處如有硬結(jié)創(chuàng)傷或化膿等情況，應(yīng)另選部位或在頸部對(duì)側(cè)進(jìn)行試驗(yàn)。羊在尾根皺褶部、頸部或肩胛部剪毛，測(cè)量皮膚皺褶厚度并記錄。

用滅菌生理鹽水或注射用水將提純副結(jié)核菌素稀釋為0.5mg/ ml，禽型提純結(jié)核菌素稀釋為25000國(guó)際單位/ml。皮內(nèi)注射劑量為0.1ml。注射部位應(yīng)出現(xiàn)小包，若無(wú)小包，應(yīng)另選部位或在對(duì)側(cè)重新注射。注射后72h觀察反應(yīng)，檢查注射部位有無(wú)熱、腫、痛等炎性反應(yīng)，用卡尺測(cè)量注射部位皮膚皺褶厚度，從該測(cè)量數(shù)據(jù)減去注射前的測(cè)量數(shù)據(jù)，即為皮厚差。

（3）結(jié)果判定：①陽(yáng)性反應(yīng)：局部有炎性反應(yīng)，皮厚差≥4mm。②可疑反應(yīng)：局部炎性反應(yīng)不明顯，皮厚差2.1～3.9mm，判為可疑感染動(dòng)物。于3個(gè)月后，于對(duì)側(cè)頸部相應(yīng)部位再進(jìn)行一次試驗(yàn)，若仍為可疑即判為陽(yáng)性。②陰性反應(yīng)：局部無(wú)炎癥反應(yīng)，皮厚差≤2mm。

（4）注意事項(xiàng)：①進(jìn)口動(dòng)物檢疫時(shí)皮厚差＞2mm應(yīng)判為陽(yáng)性。②羊在尾根皺褶部無(wú)任何反應(yīng)的判為陰性；有反應(yīng)的，不論皮厚差大小和炎性反應(yīng)輕重，均判為陽(yáng)性。

5 防制措施

本病尚無(wú)有效藥物治療，預(yù)防本病重在加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，嚴(yán)格檢疫，可預(yù)防注射副結(jié)核菌苗，使牛群獲得免疫。

[1] 何昭陽(yáng)，陳獎(jiǎng)勵(lì).副結(jié)核病的診斷與防制[J].中國(guó)獸醫(yī)雜志，1991，（3）：52-54.