鷓鴣菜人工再生苗繁育試驗初報

摘 要 為了優化鷓鴣菜人工育苗方法，為工業化生產鷓鴣菜提供科學依據和技術支持。利用植物細胞具有“全能性”，采用鷓鴣菜體細胞培育出再生苗種。結果在溫度為20～25℃，光照強度為27～36 μmol/（m2·s），光照周期為12 h∶12 h的條件下，20 d左右可培育出種苗。種苗在潮間帶放養即可發育成完整藻體。

關鍵詞 鷓鴣菜；組織培養；人工再生苗

中圖分類號：Q943.1 文獻標志碼：B 文章編號：1673-890X（2015）01-016-02

知網出版網址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/50.1186.S.20150127.1345.007.html 網絡出版時間：2015/1/27 13：45：40

鷓鴣菜（Caloglossa leprieurii）屬于紅葉藻科，是暖溫性海藻，分布于我國浙江、福建以及廣東沿海[1]。其始載于明代1530年間的福建《漳浦縣志》，今《中華海洋本草》有詳細記載，具有悠久的藥用歷史[2]。鷓鴣菜含有海人草酸及海人草素，因其具有驅蟲作用，一直被用來治療蛔蟲病[3]和由蟲積或蟲咬引起的疾病，我國中成藥美舌藻片[4]和復方鷓鴣菜散[5]便是以鷓鴣菜為主要原料制成的。此外，鷓鴣菜的降壓作用機理也有學者探討。隨著對鷓鴣菜的深入研究，它將會成為應用廣泛的海洋植物藥用資源。但是由于環境變化及人為破壞等原因，鷓鴣菜資源量正逐步減少，無法滿足社會需求。我國學者曾進行鷓鴣菜人工栽培研究，雖然已經取得成功，但仍未達到規模化生產水平，目前藥農仍靠自然生長采收鷓鴣菜。

本研究選取鷓鴣菜孢子體組織在一定條件下培育出再生苗，旨在優化鷓鴣菜人工育苗的方法，為工業化繁殖鷓鴣菜提供科學依據和技術支持。

1材料與方法

1.1試驗材料

試驗所用藻種來源于濠江出海口潮間帶，每年3月中旬—4月上旬為最佳采收時期，此時采收的鷓鴣菜絕大多數為鷓鴣菜的孢子體（二倍體）。

試驗用水鹽度為6‰～13‰，pH7.9～8.4，其他理化指標應符合漁業水質標準（GB 11607-1989）和無公害食品之海水養殖用水水質標準（NY 5052-2001）要求，文中稱培育用水。

1.2試驗方法

1.2.1 消毒液的配制

在培育用水中添加青霉素鈉，使其含量為20～60 TU/L，備用。

1.2.2 材料預處理

用培育用水洗去鷓鴣菜上的雜藻和浮泥，在消毒液中浸泡滅菌20～40 min后，用解剖鏡挑選形態完整、細嫩、無四分孢子、無囊果的藻體作為組織塊供體。

1.2.3 培養基的配制

將培育用水用0.22 μm孔徑的無菌微孔濾膜過濾除去顆粒狀異物，添加營養鹽調配成營養液作為培養基。

1.2.4 附苗基處理

選用200～300目的篩絹，根據培養容器裁剪成合適大小，使用前用淡水洗凈并在開水中煮沸30 min后晾干備用。

1.2.5 組織塊的制備與附著

在解剖鏡下將作為供體的鷓鴣菜切割成1～3 mm大小的組織塊，用消毒液漂洗干凈。將切好的鷓鴣菜組織塊移放到準備好的篩絹上，篩絹將作為組織塊的附著基，用噴壺向排列好的組織塊多次、少量噴灑培養液，保持篩絹濕潤3～4 h，使組織塊基本粘連在篩絹上。

2結果與分析

經過20 d的培育，肉眼可見組織塊長出嫩苗。嫩苗呈葉狀，這些帶葉狀嫩苗的組織塊可作為新種苗放養到海區。將鋪滿種苗的篩絹固定在出海口潮間帶巖石上，再生苗可發育成完整植株。結果表明在溫度為20～25℃，光照強度為27～36 μmol/（m2·s），光照周期為12 h∶12 h的條件下，20 d左右可培育出種苗。種苗在潮間帶放養即可發育成完整藻體。放養時可以在篩絹層上再鋪上網簾或棉繩，隨著種苗的繼續發育，網簾和棉繩也將成為附著基，既增加鷓鴣菜的產量又便于采收。

試驗中還發現帶叉點的組織塊更容易培育出再生種苗，且種苗更多、更大、更健壯，這說明叉點處的細胞再生能力更強，更適宜作為組織塊供體。

3小結

鷓鴣菜是一種副作用極低的重要中藥資源，野生資源量不足制約了其新功能的開發利用，也阻礙了相關藥企發展。試驗證實了鷓鴣菜組織在植物激素和一定條件的誘導下，可以培育出再生種苗，而且這些種苗都能發育成完整個體。人工再生苗可以大大提高鷓鴣菜的產量，滿足生產研究的需求，實現資源的可持續利用，使鷓鴣菜實現由傳統種植向現代化生產轉變。本研究除了對鷓鴣菜的快速繁育具有重要的理論意義和應用價值外，還為其他經濟海藻的人工栽培研究提供了參考。

試驗發現帶叉點的組織塊更容易培育出再生種苗且種苗更多、更大、更健壯，說明叉點處的細胞再生能力更強，更適合作為組織塊供體。本研究證實了孢子體適宜作為組織塊供體，但其具有一定的季節性。如何保存好組織供體或使鷓鴣菜的不同世代都適合作為組織供體，確保工業化生產的連續進行，有待于進一步研究。

參考文獻

[1]李偉新，朱仲嘉，劉鳳賢.海藻學概論[M].上海：上海科技出版社，1982：82-83.

[2]管華詩，王曙光.中華海洋本草（第2冊）[M].上海：上海科學技術出版社，2009： 143-146.

[3]中國人民解放軍后勤衛生部，上海醫藥工業研究院.中國藥用海洋生物[M].上海：上海人民出版社，1977：32-44.

[4]國家中醫藥管理局《中華本草》編委會.中華本草（第1冊）[M].上海：上海科技出版社，1999：482.

[5]中華人民共和國衛生部藥典委員會.中華人民共和國衛生部藥品標準中藥成方制劑（第19冊）[S].1989：119.

（助理編輯：易婧；責任編輯：敬廷桃）