苦杏仁苷研究進展

吾熱婭提古麗·克維爾，艾百拉·熱合曼，依米提·熱合曼

（1.新疆大學 生命科學與技術學院，新疆 烏魯木齊830046；2.中國農業大學 食品科學與營養工程學院，北京100083）

1 引言

苦杏仁苷（Amygdalin）是在薔薇科植物種仁中普遍存在的含氰基的糖苷化合物，存在于杏、桃，李子、蘋果、山楂、批把等［1，4，14］植物的種仁中。它又稱作苦杏仁甙，苯乙醇腈－β－葡糖苷酸，維生素B17，苯乙醇腈。雖然苦杏仁苷和苦杏仁甙（Laetrile）之間存在著結構和異構差別，但是相互等同使用。天然的苦杏仁甙是有活性的右旋物，異構化以后形成沒有活性的左旋物［1］（圖1、圖2）。

2 苦杏仁苷在植物中的含量

除了薔薇科外，它在忍冬科、含羞草科和木犀科植物中也存在，在青梅中含量最高，其次為杏子、黑梅、桃子、紅櫻桃和黑櫻桃、紫梅、黃梅和紅梅，油桃的苦杏仁苷含量最小［2］。苦杏仁苷在桃仁中的含量為2.72%～3.13%，在杏仁中含量為3.62%～5.19%，在烏梅中含量為0.23%［3］，在苦杏仁中含量一般2%～3%［4］。苦杏仁苷含量直接影響杏仁的苦味程度，隨著苦杏仁苷含量增加苦味度也增加。苦杏仁的苦杏仁苷的含量比甜杏仁的苦杏仁苷含量大于1000倍以上［5］。

3 苦杏仁苷的藥理作用

50多年以來，苦杏仁苷在歐美洲國家成為非常流行的癌癥藥物［1］。苦杏仁苷在醫藥上主要用于祛痰止咳劑、輔助性抗癌藥［4］。在日本，桃仁是 Oketsu（血瘀綜合癥治療藥物）的主要成分，并用于很多其他傳統藥物的成分；活血通路凍干注射粉（HTLPI）（6g包含25.3 mg苦杏仁苷和35.8mg芍藥苷）是主要由桃仁和芍藥根提取物組成的傳統中藥藥物，主要適用于治療嚴重腦出血中風過程中的血瘀阻塞癥狀［6］。動物實驗和細胞實驗結果表明苦杏仁苷和其降解物有抗動脈粥樣硬化、抗腎間質纖維化、抗肺纖維化、抗高氧誘導肺損傷、免疫抑制、免疫調節、抗腫瘤、抗炎等作用［4］。苦杏仁苷有止咳、鎮痛和抗腫瘤作用［3］。在中醫，苦杏仁苷應用于治療哮喘、支氣管炎、肺氣腫、便秘、麻風病和白斑病等多種疾病［7］。

Chen等人的研究結果顯示苦杏仁苷對人宮頸癌細胞有顯著的抑制作用，苦杏仁苷可激活細胞凋亡蛋白酶3的活性，抑制Bcl－3蛋白的活性，從而激活內源性細胞凋亡機制［8］。體內實驗結果顯示苦杏仁苷通過激活細胞凋亡抑制Hela細胞生長［9］。Guo等人的細胞和動物實驗結果顯示苦杏仁苷可抑制腎臟纖維原細胞（KFB）的增值和轉錄生長因子（TGF－β1）在淋巴細胞中分泌，從而改善腎臟單側輸尿管梗阻而導致的損害，延遲腎小管間質纖維化的發展［10］。Toll樣接受體（TLRs）和TLR信號放大作用在動脈粥樣硬化發展過程中有關鍵作用。苦杏仁苷可降低TLR2和TLR4的mRNA和蛋白質含量，可抑制MyD88依賴信號物質的表達，從而改善 ApoE敲出大鼠動脈粥樣硬化［11］。Mirmiranpour等人的研究結果顯示苦杏仁苷對鏈脲酶素誘導糖尿病大鼠動脈血管形成有顯著抑制作用［12］。

4 代謝

當口服時，苦杏仁苷首先在胃中通過消化酶的酶解分解為野黑櫻苷和葡萄糖。野黑櫻苷在小腸進一步分解為苯乙醇腈。苯乙醇腈在腸道菌群的作用下成為苯甲醛。苦杏仁苷口服時的LD50為880mg/kg［13］。

苦杏仁苷靜脈注射和口服有不同的代謝機制。苦杏仁苷靜脈注射以后在血液里出現高濃度的苦杏仁苷，幾乎不會出現氰化物，硫氰酸鹽的濃度不會發生變化，注射濃度最高為692.4±173.4ng/mL［6］；然而口服以后血液中的苦杏仁苷的濃度很少，氰化物濃度增加，苦杏仁苷幾乎變成野黑櫻苷。20mg/kg的苦杏仁苷口服以后，大鼠血液里出現的苦杏仁苷最高濃度為1 702.52±108.06ng/mL（1.50±0.08h）［7］。

5 苦杏仁苷的毒性

苦杏仁苷本身無毒，但通過酶解有可能（β－葡糖苷酶和α－醇腈酶）產生有毒的氰化物。苦杏仁苷和真菌毒素顯著影響豬卵巢顆粒細胞的類固醇激素水平。苦杏仁苷或含有苦杏仁苷的物質可能影響卵巢的功能［14］。苦杏仁苷對人的毒性在0.5～3.5mg/kg。苦杏仁苷中毒表現為頭疼、嘔吐、惡心、腹絞痛、頭暈、身體變虛弱、意識模糊、抽搐、心跳變慢、呼吸衰竭、昏迷，甚至也有可能死亡［13］。

6 酶解

苦杏仁苷作為最常見的生氰苷類化合物，其酶解過程分三個階段；第一階段。通過苦杏仁苷裂解酶酶解苦杏仁苷為野黑櫻苷和葡萄糖；第二階段：野黑櫻苷裂解酶把野黑櫻苷水解為苯乙醇腈和葡萄糖；最后階段：苯乙醇腈在醇腈酶的作用下水解成苯甲醛和HCN。苦杏仁苷在酸性條件（pH值5.0～5.8）下水解為苯乙醇腈，苯乙醇腈在堿性條件下（pH值10）水解成苯甲醛。苦杏仁苷酶的最適溫度為20～40℃，在過高的溫度下很容易失活。苦杏仁苷酶水解過程按浸軟程度不同需要30min到6h的時間［2］。

苦杏仁苷在體外通過黑曲霉分泌酶降解為野黑櫻苷、苯甲醛、苯乙醇腈和苯乙腈（37℃）［15］。杏仁碾碎以后酶與苦杏仁苷（AD）接觸，并把它降解為葡萄糖、苯甲醛（苦味來源）和氰化氫（有毒）［16］。

7 檢測方法

苦杏仁苷檢測方法有HPLC和H－1－NMR方法，不過在H－1－NMR檢測過程中不需要制備標準樣品和制作標準曲線，操作簡單，快速［3］。在血液和其他生物液體中的苦杏仁苷檢測方法有氣相色譜（GC）、高效液相色譜（HPLC）、高效液相色譜質譜聯用（HPLC－MS）和液相色譜串聯質譜（LC－MS－MS）等方法。苦杏仁苷檢測內標準物質（IS）選擇京尼平苷為其內標物質是最好的選擇［7］。

8 提取方法

除了酶解，苦杏仁苷還在熱水中異構化從而降解。D－苦杏仁苷在沸水中加熱3min就變成苦杏仁苷的差位異構體［2］。由于苦杏仁苷特別容易降解，因此合適的提取方法特別重要。合理的提取方法可防止苦杏仁苷的降解。苦杏仁苷提取可用水、甲醇和乙醇。Kool等人通過4%的檸檬酸水來提取杏仁中的苦杏仁苷，防止其異構化并提高提取率。Wei－Feng等人通過比較酸水提取和甲醇提取方法發現0.1%檸檬酸回流提取是最佳提取方法。Bolarinwa等人通過使用水提方法和乙醇提取方法提取巴達木中的苦杏仁苷發現乙醇提取比水提取更有效，并且最佳提取時間為100min，水最佳提取溫度為100℃，乙醇最佳提取溫度為78.5℃［2］。在杏仁中除去苦杏仁苷過程中β－葡糖苷酶的降解和苦杏仁苷的洗脫是關鍵因素。在乙醇濃度為20%和50%時苦杏仁苷洗脫和水解程度達到最大［17］。

9 展望

苦杏仁苷在薔薇科植物種仁中普遍存在，有止咳、鎮痛和抗腫瘤作用，應用于治療哮喘、支氣管炎、肺氣腫、便秘、麻風病和白斑病等多種疾病。我國薔薇科植物資源豐富，但目前對苦杏仁苷的大量開發利用還未實現。今后研究當中，可以利用豐富的資源優勢進一步研究并優化其提取及純化方法，研究抗腫瘤機制，進行藥品開發，通過適當處理，讓苦杏仁苷參與食品領域。

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