評估在含帶殼葵花籽粉日糧中添加酶制劑對蛋雞生長性能和表觀營養(yǎng)消化率的影響

摘 要：本研究使用640羽1日齡蛋用雛雞，以帶殼葵花籽粉為蛋白源按0 %、25 %、50 %和75 %的比例替代日糧中豆粕后，再添加和未添加酶制劑以此研究各試驗(yàn)組雞的生長性能和養(yǎng)分利用率。試驗(yàn)的每一個(gè)日糧組各4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20羽雛雞。帶殼葵花籽粉的近似組成經(jīng)測算表明，其干物質(zhì)、粗蛋白、粗油脂、粗纖維、灰分和可溶性碳水化合物的含量分別為925.9 g/kg、204.5 g/kg、336.2 g/kg、215.1 g/kg、52.0 g/kg以及192.2 g/kg。結(jié)果表明，飼喂用75 %帶殼葵花籽粉替代豆粕的日糧組蛋用雛雞試驗(yàn)?zāi)w重最高，為484.4 g/羽；用帶殼葵花籽粉替代日糧中25 %豆粕的試驗(yàn)組雞的末重最小，為472.2 g/羽。每羽蛋用雛雞的日平均增重并未受日糧中帶殼葵花籽粉的含量影響（P>0.05）。在各試驗(yàn)組間，每羽蛋用雛雞的平均日采食量隨著日糧中帶殼葵花籽粉的含量增加而升高（P<0.05）。然而，日糧中添加酶制劑能顯著改善采食量、增重、末重和料肉比（P<0.05）。存活率不受試驗(yàn)的處理水平影響。日糧干物質(zhì)消化率隨日糧中帶殼葵花籽粉含量的增加而顯著降低（P<0.05），同時(shí)粗蛋白消化率逐步下降（P<0.05）。然而，隨著日糧中帶殼葵花籽粉添加水平的增加，灰分的消化率升高（P<0.05）。酶添加組的蛋用雛雞消化率一直顯著高于未添加酶組的蛋用雛雞（P<0.05）。然而，粗油脂的消化率不受是否添加酶的影響。研究結(jié)果表明，飼喂含高水平帶殼葵花籽粉的日糧的蛋用雛雞平均日增重與對照組蛋用雛雞雞相近。本研究所用的帶殼葵花籽粉是粗蛋白、粗油脂和氨基酸的一種優(yōu)質(zhì)來源，具有代替大豆作為飼料原料的潛力。對于蛋用雛雞而言，可通過添加外源性酶來提高USFM的營養(yǎng)價(jià)值。

關(guān)鍵詞：酶制劑；營養(yǎng)利用率；蛋雞；帶殼葵花籽粉（USFM）

中圖分類號：S816.79 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：C 文章編號：1001-0769（2015）08-0045-04

當(dāng)前，由于價(jià)格過高引起的能量飼料危機(jī)已經(jīng)提高了全球?qū)で蠹仪菽芰亢偷鞍踪|(zhì)飼料替代品的意識(shí)。替代品的增加必將迫使飼料中能量和/或蛋白飼料（例如玉米、大豆等）價(jià)格的下降。一些替代品的使用已經(jīng)受到認(rèn)可，其中就包括椰子粕、菜籽餅和很少提及的葵花籽粕。僅葵花籽粕具有與動(dòng)物飼料中最常用蛋白源的豆粕非常接近的化學(xué)組成。然而，Nowland等、Adeniji和Ogunmodede的早期研究最值得關(guān)注，他們報(bào)道葵花籽殼纖維的特性和含量會(huì)限制其所含養(yǎng)分的利用。

營養(yǎng)學(xué)領(lǐng)域取得的研究進(jìn)展使得提高乏人問津的飼料的利用率成為可能，其中的一個(gè)進(jìn)展是酶技術(shù)的利用，酶能改善高纖維型飼料中的日糧非淀粉多糖的負(fù)面效應(yīng)。RovabioTM（RVB）是一種利用相同機(jī)制或發(fā)酵過程生產(chǎn)出的含多種酶的濃縮物（多酶復(fù)合物是不至一種酶的穩(wěn)定組合物，通常參與連續(xù)的催化反應(yīng)）。它包含由繩狀青霉發(fā)酵肉湯產(chǎn)生的木聚糖酶和β-葡萄糖酶。制造商（法國Adisseo有限公司）認(rèn)為，市售混合酶可以將能量代謝效率提高6 %，蛋白質(zhì)利用率提高2 %。Cowieson等對飼喂玉米和豆粕型日糧的肉雞進(jìn)行觀察后發(fā)現(xiàn)，添加木聚糖酶、淀粉酶、蛋白酶和植酸酶后，營養(yǎng)代謝效率提高。大多數(shù)研究是利用專門針對玉米或大豆的酶進(jìn)行的。有關(guān)用剛出殼的蛋用雛雞來評估多酶制劑對帶殼葵花籽粉（Undecorticated Sunflower Seed Meal，USFM）作用的研究非常有限。因此，本研究旨利用幼齡蛋用雛雞評估USFM代替日糧中豆粕（Soybean Meal，SBM）以及添加或不添加市售RovabioTM酶制劑的聯(lián)合效應(yīng)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)施和蛋雞飼養(yǎng)

本試驗(yàn)方案符合聯(lián)邦農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與畜產(chǎn)科學(xué)學(xué)院動(dòng)物護(hù)理和使用審查委員會(huì)的指南。試驗(yàn)期間采用12 h光照/12 h黑暗的光照制度。所有試驗(yàn)雛雞經(jīng)點(diǎn)眼免疫傳染性法氏囊病和新城疫Lasota株疫苗。其他常規(guī)用藥在整個(gè)試驗(yàn)期嚴(yán)格控制。雛雞從孵化場（農(nóng)業(yè)大學(xué)Abeokuta-Leventis Agro Allied Industries有限公司）轉(zhuǎn)運(yùn)到試驗(yàn)基地（聯(lián)邦農(nóng)業(yè)大學(xué)家禽教研養(yǎng)殖場）后安置于平養(yǎng)雞舍中。所有雞舍都配有自動(dòng)飲水裝置和平底料槽，自由采食、飲水，舍內(nèi)鋪有軟木屑墊料。飼養(yǎng)試驗(yàn)采用640羽Yaffa brown?品系1日齡蛋用雛雞，試驗(yàn)為期10周。

1.2 帶殼葵花籽粉（Undecorticated Sunflower Seed Meal，USFM）

測試的飼料原料USFM來自尼日利亞葵花籽和油料籽協(xié)會(huì)。收割后，USFM經(jīng)日曬干燥至恒重，隨后磨碎備用。

1.3 試驗(yàn)設(shè)計(jì)和日糧

酶制劑通過與微量成分一起添加，以確保在飼料中發(fā)揮最大效力。640羽1日齡蛋雞隨機(jī)分入8個(gè)日糧處理組 （表1）。日糧根據(jù)NCR 1994的營養(yǎng)需求配制。試驗(yàn)按2×4因子的完全隨機(jī)法設(shè)計(jì)。對照日糧（不添加USFM）完全由豆粕提供蛋白，以此設(shè)為100 %；其他日糧以USFM代替SBM，代替比例分別為25 %、50 %和75 %（按照用USFM蛋白質(zhì)代替SBM蛋白質(zhì)的方式計(jì)算）。日糧有兩個(gè)組別：添加或不添加外源酶制劑。每個(gè)處理設(shè)置4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20羽。日糧制成糊狀飼喂。

1.4 性狀檢測

試驗(yàn)期間評估雞的體重、采食量、料肉比。試驗(yàn)雞在試驗(yàn)第1天稱重，其后每周稱一次。每天提供新鮮飼料，殘余飼料每7 d稱重一次，以計(jì)算料肉比。死亡雞數(shù)每天記錄，采食量根據(jù)死亡雞數(shù)進(jìn)行校正以調(diào)整料肉比。

1.5 消化率研究

10周的試驗(yàn)期結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)中選取4羽試驗(yàn)雞置于潔凈、經(jīng)消毒的鋼制代謝籠中，籠底為網(wǎng)柵底板，并配備集糞盤。在開始收集總排泄物前進(jìn)行3 d的適應(yīng)期。試驗(yàn)雞每天喂給（超過其所需量的）已知重量的飼料，同時(shí)連續(xù)3 d每天均收集總排泄物。每個(gè)重復(fù)每日收集的排泄物進(jìn)行稱重、干燥，累積的樣本經(jīng)混合后根據(jù)公職分析化學(xué)工作者協(xié)會(huì)（Association of Official Analytical Chemists，AOAC） （2000）的方法檢測其近似的組分。

1.6 化學(xué)組成分析

日糧、排泄物樣本和USFM成分按照AOAC的標(biāo)準(zhǔn)方法分析。樣本經(jīng)磨碎后，檢測四個(gè)重復(fù)組樣本的干物質(zhì)含水量（Moisture Content，MD；AOAC，2000；930.15）、粗蛋白（Crude Protein，CP；AOAC，2000；990.03）、粗油脂（Ether Extract，EE；AOAC，2000，954.02）、粗纖維（Crude Fibre，CF；AOAC，2000；978.10）、粗灰分（Crude Ash，CA，AOAC，2000；942.05）和可溶性碳水化合物（Soluble Carbohydrate，SC）。可溶性碳水化物根據(jù)如下公式計(jì)算：SC=100-（CF+EE+CP+CA+含水量）。樣本總能量通過CAL 2K型絕熱壓力罐式量熱計(jì)測得。氨基酸含量用高效液相色譜（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）進(jìn)行分析。USFM樣本中的蛋白質(zhì)在密封罐中用6 M鹽酸在110 ℃下經(jīng)24 h水解，水解產(chǎn)物經(jīng)稀釋過濾后，5 mL濾出液和0.5 mL內(nèi)標(biāo)溶液混合置于50 mL快速適應(yīng)圓底燒瓶中經(jīng)65 ℃真空干燥，殘?jiān)苡?.5 mL乙酸中，轉(zhuǎn)移至20 mL的聚乙烯瓶中，用HPLC分析。經(jīng)酸解后，以鄰苯二甲醛（ortho-phthaldialdehyde，OPA）作柱前衍生物，HPLC采用Dionex ASI-100自動(dòng)進(jìn)樣裝置、Dionex P580泵和Dionex RF-2000檢測器（蓋默靈，德國），流動(dòng)相流速為1 mL/min，150×4.6 mm Spherisorb ODS2色譜柱配Waters保護(hù)柱（Milford，USA）。氨基酸分析由Eurofins食品檢測（沃爾佛漢普登，英國）完成，根據(jù)歐盟指令2000/45/EC分析色氨酸（OJEC，2000），根據(jù)EC/98/64（L 257/16）分析其余氨基酸（OJEC，1998）。

1.7 統(tǒng)計(jì)

獲得的數(shù)據(jù)用于計(jì)算DM、CP、EE、CF、CA和SC的表觀消化率。可溶性碳水化合物的含量根據(jù)公式SC=100-（CF+EE+CP+CA+含水量）計(jì)算。樣本被置于熱烘箱中（105 ℃）干燥16 h，以備測定DM。CP含量通過微量凱氏定氮法步驟測定，并用6.25作為換算系數(shù)乘以N含量計(jì)算CP值。EE值用索氏萃取裝置通過石油醚萃取方法測得。所有試驗(yàn)步驟均符合AOAC（2000）的試驗(yàn)綱要。近似組分的表觀營養(yǎng)物質(zhì)消化率（Apparent Nutrient Digestibility，AND）系數(shù)通過如下公式估測：AND（%）=[（aNC-aNE）/NC]×100，其中aNC=消耗的養(yǎng)分量，aNE=排泄的養(yǎng)分量。營養(yǎng)消耗和排泄量均正確監(jiān)測，以便測定飼料和排泄物中的養(yǎng)分含量，這可通過測算飼喂的和總剩余的飼料量獲得，因此還要測算全程總排泄物量。營養(yǎng)消耗量根據(jù)以下公式估算：aNC=TFC×aNFA，其中TFC=試驗(yàn)期間消耗的總飼料量，aNFA=測得的飼料養(yǎng)分含量。同樣的，排泄的養(yǎng)分量根據(jù)以下公式計(jì)算得到：aNE=TPEx×aNEx，其中TPEx=試驗(yàn)期間產(chǎn)生的總排泄物量，aNEx為測得的排泄物養(yǎng)分含量。

1.8 數(shù)據(jù)分析

獲得的數(shù)據(jù)運(yùn)用SAS生物統(tǒng)計(jì)軟件包（1999）中的一般線性模型（GLM）分析差異顯著性。統(tǒng)計(jì)學(xué)差異顯著性水平的置信區(qū)間為大于或等于95 %。

2 試驗(yàn)結(jié)果

表2列出了USFM的近似氨基酸含量，由此表明USFM的干物質(zhì)、粗蛋白、粗油脂、粗纖維、灰分和可溶性碳水化合物含量分別為925.9 g/kg、204.5 g/kg、336.2 g/kg、215.1 g/kg、52.0 g/kg和192.2 g/kg。本試驗(yàn)所用USFM的氨基酸組成表明，必需氨基酸中精氨酸含量最高，其次是亮氨酸和纈氨酸，分別為10.12 g/kg、8.97 g/kg和7.73 g/kg。色氨酸和蛋氨酸是USFM中含量最低的氨基酸。飼喂USFM的蛋用雛雞在粗蛋白、粗纖維和粗油脂的消化率上顯著下降（P<0.05，表3）。添加酶制劑能提高試驗(yàn)雞對飼料中各直接組分的消化率（P<0.05），但粗油脂除外。用USFM取代75 % SBM的試驗(yàn)組蛋用雛雞在試驗(yàn)?zāi)┑捏w重最大，為484.41 g，取代25 % SBM的日糧組末重最小，為472.20 g。在所有處理組中，飼喂用USFM取代75 %SBM的日糧組蛋用雛雞平均日增重稍高，不過統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異不顯著（P>0.05）。USFM含量越高的組別試驗(yàn)雞的采食量越高（表4）。

3 討論

研究結(jié)果表明，測試的飼料是一種優(yōu)質(zhì)的粗蛋白源，且含有相對較高的粗纖維含量和粗油脂含量（表2）。它的粗纖維含量與Villamide和San Juan的研究結(jié)果一致，他們報(bào)道葵花籽粕的纖維含量介于14 %～30 %之間。本研究結(jié)果表明，雖然葵花籽粉的色氨酸含量很可觀，但是測試飼料的蛋氨酸和色氨酸含量最低。這與眾多研究結(jié)果一致，這些報(bào)道稱油籽餅中含量最低的氨基酸是蛋氨酸、色氨酸和賴氨酸。

USFM型日糧中各種近似組分的消化率降低（表3），提示該日糧無法滿足家禽對必需營養(yǎng)物質(zhì)的需求。帶殼葵花籽粉含有大量的細(xì)胞壁多糖和纖維。這也許與日糧中其他營養(yǎng)物質(zhì)相克，導(dǎo)致本試驗(yàn)中近似組分的消化率下降。然而，處理組灰分的消化率逐級顯著提高，這說明更多的礦物質(zhì)能被家禽利用。沒有家禽在整個(gè)試驗(yàn)期中發(fā)生礦物缺乏癥狀。Slominski和Campbell報(bào)道，在菜籽餅粕型日糧中添加酶制劑，能夠提高雛禽對非淀粉多糖的利用率。與此相似，在本試驗(yàn)中添加酶制劑能顯著提高粗蛋白、粗纖維和灰分的消化率。在粗油脂的消化率方面，USFM和酶制劑之間存在明顯互作效應(yīng)：用USFM替代0和25 %SBM的不添加酶制劑的日糧組雛雞粗油脂消化率最高。所用酶制劑也許會(huì)影響粗油脂的消化率，因?yàn)槲墨I(xiàn)資料只證明酶制劑對NSPs有作用，而非脂肪。此外，查閱制造商說明書中對其活性的介紹，表明該酶制劑含有木聚糖酶、β-葡萄糖酶、纖維酶、果膠酶和蛋白酶，不含脂肪酶，因此不會(huì)影響粗脂肪的吸收率。

采食量隨著日糧中USFM含量的增加而升高。測試飼料的纖維特性也許是造成采食量顯著提高的原因。75 %USFM日糧組的家禽體重非但沒有降低，反而數(shù)值上有所提高，顯然是因?yàn)榧仪荼仨毾母嗟娘暳蟻碓鲩L每1 kg的體重。Burrows等和Jorgensen等報(bào)道，提高日糧纖維含量會(huì)增加糞便的體積和重量，同時(shí)會(huì)降低所有養(yǎng)分的消化率。大量研究表明，飼料含有高水平的日糧纖維會(huì)降低能量的代謝效率，如果這種可能較低的代謝能量將是其中的原因，那么幼齡雛雞應(yīng)消耗更多的飼料以彌補(bǔ)能量的不足。但是本試驗(yàn)配制的飼料是等能、等蛋白的。由于采食量的增加，說明測試飼料不含可疑的苦味復(fù)雜物。然而，飼喂USFM型日糧的家禽料肉比更高，這提示飼料轉(zhuǎn)化率低。所觀察到的趨勢在Fafiolu給肉雞飼喂相同日糧的試驗(yàn)中也能觀察到。然而，日糧中添加酶制劑可顯著改善采食量、增重、末重以及料肉比。死亡率或存活率不受是否酶添加的影響。添加酶制劑能提高家禽對該飼料的利用率。本研究中出現(xiàn)的飼料利用率升高可能是由于USFM型日糧添加了酶制劑所造成的。這可能是由于USFM中的NSPs溶解性和消化率提高所致。大量研究表明，在谷物類飼料中添加酶制劑后營養(yǎng)價(jià)值顯著提高，這些谷物包括小麥、大麥、燕麥和黑麥。本試驗(yàn)使用的酶制劑對測試飼料具有明顯的正向效應(yīng)。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)USFM的含量和酶添加之間存在顯著的互作效應(yīng)，表現(xiàn)在雛雞的采食量和料肉比上。這些互作效應(yīng)也許能夠表明，當(dāng)?shù)坝秒r雞飼喂用USFM替換日糧中75 %豆粕時(shí)添加酶制劑效果更佳，這與Fafiolu在肉雞上的發(fā)現(xiàn)不同。這些結(jié)果表明，酶制劑和日糧高水平的USFM之間具有協(xié)同效應(yīng)，體現(xiàn)在幼齡蛋用雛雞的采食量和料肉比上。這一效應(yīng)也許與所用酶制劑提高了能量的釋放量有關(guān)。

綜上所述，本試驗(yàn)所用的USFM是一種優(yōu)質(zhì)的粗蛋白、粗脂肪和氨基酸的來源，同時(shí)含有可觀的粗纖維，具有成為飼料原料中大豆替代物的潛能。USFM對蛋用雛雞的營養(yǎng)價(jià)值可通過添加外源性復(fù)合酶來提高，使得USFM能夠取代蛋用雛雞飼料中高比例的豆粕。

原題名：Assessment of enzyme supplementation on growth performance and apparent nutrient digestibility in diets containing undecorticated sun-ower seed meal in layer chicks （英文）

原作者：A. O. Fafiolu和O.O.Oduguwa等（尼日利聯(lián)邦農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)與畜產(chǎn)科學(xué)學(xué)院）