四物湯飲片與配方顆粒湯劑中沒食子酸、5—羥甲基糠醛含量比較

摘要：目的：比較四物湯飲片和配方顆粒湯劑中5-羥甲基糠醛及沒食子酸的含量。方法：使用高效液相色譜法（HPLC）測定四物湯飲片和與配方顆粒湯劑中5-羥甲基糠醛及沒食子酸的含量，采用C18色譜柱，柱溫為30℃，檢測波長為280nm，流動相為甲醇-磷酸，流動速度為1mL/min。結果：四物湯配方顆粒湯劑中5-羥甲基糠醛及沒食子酸的含量分別為1.62mg、26.67mg，四物湯飲片中5-羥甲基糠醛及沒食子酸的含量分別為3.31mg、26.56mg。結論：四物湯飲片和配方顆粒湯劑具有相似的色譜圖，其中兩種劑型中沒食子酸的含量基本一致，但配方顆粒湯劑中5-羥甲基糠醛的含量較飲片湯劑高。

關鍵詞：四物湯；飲片湯劑；和配方顆粒湯劑；5-羥甲基糠醛；沒食子酸

【中圖分類號】R283 【文獻標識碼】A 【文章編號】1672-8602（2015）03-0469-01

中藥湯劑在中醫臨床上應用較廣，不僅是因為該藥制法簡單，價廉易得，起效快速，同時也與該藥配方靈活，辯證施治有關。然而，中藥湯劑也具有一定的缺點，比如攜帶不方便，質量控制較難等。隨著科學技術的發展，中藥配方顆粒應運而生，它是以質量控制規范的藥材為原料，并利用現代技術進行合成的中藥產品，具有用量小、服用方便、便于攜帶、良好質控等優點，目前，臨床應用比例逐漸上升。四物湯是經典的中藥處方，是由川芎、當歸、熟地及白芍組成，具有補血和養血的功效[1]。本文對四物湯飲片和配方顆粒湯劑中5-羥甲基糠醛及沒食子酸的含量進行了測定，以期為配方顆粒湯劑的普及提供理論基礎。

1實驗材料

1.1實驗儀器

高效液相色譜儀，由四元梯度泵，自動進樣器及二極管陣列檢測器組成；超聲清洗機；分析天平。

1.2實驗藥物

5-羥甲基糠醛對照品，沒食子酸對照品，甲醇（色譜純），重蒸餾水（流動相），其他試劑（分析純）。

四物湯飲片和配方顆粒湯劑中的當歸、川芎、熟地及白芍均來自同一批藥材。

2方法與結果

2.1四物湯處方的制備

四物湯的藥物處方為：當歸、川芎各10g，熟地、白芍各15g。

飲片湯劑制備：根據藥物應用比例取上述四味藥材，用250mL水進行煎煮，時間約45min，濾過后將殘渣再用200mL水進行煎煮，時間約30min，濾過后將兩次濾液進行合并，定容至250mL。

配方顆粒制備：根據飲片湯劑與配方顆粒的兌換比例，取上述四種藥材顆粒混合，用200mL、80-100℃的水進行攪拌，使其充分溶解，其后冷卻定容至250mL。

2.2沒食子酸和5-羥甲基糠醛的含量測量

色譜條件：采用C18色譜柱，粒度為5μm，內徑為4.6mm，柱長為250mm，柱溫為30℃；檢測波長為280nm；流動相為甲醇-磷酸（0.01%），比例為10：90，流速為1.0mL/min；進樣量為10μL。

對照液配置：精確稱取11.05g沒食子酸，用甲醇溶解定容至50mL，得出沒食子酸對照液濃度為221.0μg/mL；精確稱取7.80g5-羥甲基糠醛，用甲醇溶解定容至100mL，得出5-羥甲基糠醛對照液濃度為78.0μg/mL。6mL沒食子酸對照液與2mL5-羥甲基糠醛對照液混合，用甲醇定容至10mL，得出混合對照品，其中沒食子酸濃度為132.6μg/mL，5-羥甲基糠醛濃度為15.6μg/mL。

供試液配置：精確吸取10.0mL四物湯，置于25mL量瓶中，用10mL甲醇溶解后進行超聲處理，時間約20min，放冷用甲醇定容，混合均勻后進行濾過，其后續濾液再用微孔濾膜濾過即得。

經線性回歸分析，得出沒食子酸含量在66.3-1326.0ng范圍內線性關系良好；5-羥甲基糠醛含量在7.8-156.0ng范圍內線性關系良好。

精密度試驗：同樣條件下，進樣6次，測量峰面積，其中5-羥甲基糠醛的峰面積RSD值是0.81%，沒食子酸的峰面積RSD值是0.82%，說明儀器精密度良好。

穩定性試驗：取同一供試液，在0h，2h，4h，8h，12h及24h分別進樣，測量峰面積，其中5-羥甲基糠醛的峰面積RSD值是1.68%，沒食子酸的峰面積RSD值是1.18%，說明供試液24小時內穩定性良好。

重復性試驗：取供試液6份分別進樣，在同樣色譜條件下進樣，測量峰面積，其中5-羥甲基糠醛的平均含量是3.73mg，峰面積RSD值是2.99%，沒食子酸的平均含量是28.55mg，峰面積RSD值是2.23%。

樣品測定：結果見表1。

3討論

四物湯是補血調經的良方，由白芍、熟地、川芎及當歸組成，臨床應用范圍較廣。5-羥甲基糠醛及沒食子酸是四物湯的主要藥理成分，其中5-羥甲基糠醛能抗氧化，改善微循環，保護肝臟組織，沒食子酸能抗氧化、抗突變、抗炎[2]。本文采用HPLC法測定四物湯中5-羥甲基糠醛及沒食子酸的含量，經DAD檢測器掃描發現，5-羥甲基糠醛的最大吸收波長在280nm，沒食子酸的最大吸收波長在273nm。

本研究結果顯示，在四物湯飲片湯劑和配方顆粒湯劑中，均能檢測出5-羥甲基糠醛及沒食子酸，其中兩種劑型中沒食子酸的含量相當，可能由于沒食子酸屬于水溶性成分，更易提取。而飲片湯劑中的5-羥甲基糠醛含量明顯高于配方顆粒湯劑，可能由于配方顆粒在制備時未能完全提取。此外，本文對四物湯飲片湯劑進行重復試驗，發現3份飲片湯劑中5-羥甲基糠醛及沒食子酸的含量具有較大差異，可能與煎煮方法、火候判斷、加水量多少有關。但在3份配方顆粒湯劑中5-羥甲基糠醛及沒食子酸的含量無明顯差異，可能與配方顆粒中藥物含量比較穩定有關。

結語

綜上所述，四物湯飲片和配方顆粒湯劑中沒食子酸的含量基本一致，但配方顆粒湯劑中5-羥甲基糠醛的含量較飲片湯劑高，可為四物湯配方顆粒的臨床應用提供依據。

參考文獻

[1] 雷鵬，李媛，李新中，黃義.四物湯飲片與配方顆粒湯劑中沒食子酸、5-羥甲基糠醛含量比較[J].中藥新藥與臨床藥理，2009，20（05）：468-470.

[2] 劉月新.四物湯傳統湯劑中5-羥甲基糠醛的含量測定[J].中國現代藥物應用，2013，7（17）：1-2.

[3] 黃月純，劉翠玲，張瓊丹，魏剛.四物湯中四種成分的含量測定研究[J].現代中藥研究與實踐，2010，04：64-67.