小檗堿抗真菌活性研究進(jìn)展

摘 要：小檗堿是一異喹啉類生物堿，具有多種生物活性，尤其是抗微生物活性是其臨床用藥的主要方面。近年來小檗堿在抗真菌方面研究較多，文章從小檗堿單藥、多藥聯(lián)用綜述小檗堿的抗真菌作用及與其他抗真菌藥物的相互作用，同時綜述了小檗堿的藥物輸送體系，為小檗堿的進(jìn)一步開發(fā)提供參考。

關(guān)鍵詞：小檗堿；抗真菌；進(jìn)展

真菌作為常見的第四大病原體，40%具有致命性，而且真菌對現(xiàn)存藥物出現(xiàn)了耐藥性并成上升趨勢，這就需要開拓新的途徑進(jìn)行抗真菌藥物的開發(fā)，小檗堿的研究就是抗真菌藥物研究中較為活躍的一例。小檗堿又名黃連素，主要分布于黃連、黃柏等植物的根莖。臨床多用其鹽酸鹽，在臨床多用于治療腸道感染和細(xì)菌性痢疾，現(xiàn)在藥理還發(fā)現(xiàn)小檗堿除具有抗微生物活性外可具有抗腫瘤活性、抗高血糖、抗炎等活性，尤其是抗真菌活性，近年來多有報道，本文針對小檗堿在抗真菌方面的研究進(jìn)行綜述，為新的抗真菌藥物的開發(fā)提供參考。

1 單藥抗真菌活性

小檗堿對多種致病真菌具有一定的活性，包括對植物致病的真菌。小檗堿磷酸鹽對白色念珠菌及新型隱球菌均具有明顯的抑制作用， 其中以對新型隱球菌的抑制作用最為敏感。趙曉秋等[1]以水楊酸為對照研究了小檗堿對常見致病真菌的體外抗真菌活性，與水楊酸相比，該藥的MIC明顯較低，其對深部真菌的MIC范圍為31.25～125mg/L，對皮膚癬菌的MIC范圍為62.5～250mg/L，通過掃描和透射電鏡觀察證實(shí)經(jīng)該藥可使石膏毛癬菌、申克孢子絲菌、疣狀著色霉菌出現(xiàn)菌外形改變及菌細(xì)胞破壞。對于糖尿病合并系統(tǒng)性白念珠菌感染大鼠，小檗堿在大（300mg.kg-1.d-1）、小劑量（150mg.kg-1.d-1）組及聯(lián)合氟康唑組均明顯降低空腹血糖、血清TNF-α，與模型組有明顯差異（P<0.05），大劑量BBR組與FCZ組的抗真菌作用最強(qiáng)。模型組肝臟出現(xiàn)肝細(xì)胞小泡性脂肪變，腎臟出現(xiàn)腎小球體積增大，腎小管上皮細(xì)胞空泡變性，并見炎癥細(xì)胞浸潤及大量菌絲和孢子。大劑量BBR組的肝臟、腎臟略黃染，但形態(tài)學(xué)基本正常，無菌絲與孢子。小劑量BBR與聯(lián)合組的肝腎組織病理學(xué)改變明顯比模型組改善，可見鹽酸小檗堿能降低血糖，血清TNF-α濃度，抗白念珠菌，呈劑量依賴性，對糖尿病合并系統(tǒng)性白念珠菌感染有治療作用。

對于植物致病真菌，鹽酸小檗堿對小麥赤霉菌菌絲生長受到了明顯抑制，電導(dǎo)率增加，細(xì)胞膜通透性降低，細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)、功能的穩(wěn)定性遭到破壞。同時，鹽酸小檗堿還影響小麥赤霉菌菌絲的還原糖吸收利用，但對琥珀酸脫氫酶的比活力影響不大[2]。可見小檗堿在植物病蟲害的方面具有一定的應(yīng)用價值。

2 藥物聯(lián)用抗真菌活性

2.1 小檗堿與其他抗真菌藥物的協(xié)同作用

由于真菌易產(chǎn)生耐藥性，單一使用一種藥物對真菌的控制往往達(dá)不到預(yù)期的結(jié)果，采用多藥聯(lián)合使用可以多個靶點(diǎn)抗真菌，對于真菌的治療具有重要意義。小檗堿本身抗真菌活性較弱，與氟康唑聯(lián)用具有了較強(qiáng)的抗真菌活性。氟康唑單用時對白色念珠菌的MIC為1.9lg/ml，但當(dāng)與1.9lg/ml.濃度小檗堿聯(lián)用時，MIC降至0.48lg/ml。來自于臨床的氟康唑耐藥的白色念珠菌上進(jìn)一步證實(shí)了二者之間的協(xié)同作用。念珠菌屬白色念珠菌，其對唑類藥物產(chǎn)生耐藥性的主要機(jī)制為耐藥基因CDR1過表達(dá)。CDR1通過轉(zhuǎn)錄因子Tac1p結(jié)合到啟動子的順式藥物反應(yīng)元件（DRE）上進(jìn)行性轉(zhuǎn)錄激活。小檗堿和氟康唑聯(lián)合應(yīng)用對氟康唑耐藥的白色念珠菌在體外實(shí)驗(yàn)中具有顯著的協(xié)同作用，在這個過程中小檗堿抑制了CDR1mRNA上調(diào)和Cdr1p運(yùn)輸功能，蛋白-DRE轉(zhuǎn)錄激活復(fù)合物被小檗堿干擾，小檗堿結(jié)合到了CDR1的DRE上，這個結(jié)果說明了小檗堿和氟康唑具有協(xié)同作用的原因。另外16.0μg/mL氟康唑組與鹽酸小檗堿聯(lián)合時對紅色毛癬菌顯著協(xié)同作用，2.0～8.0μg/mL卡泊芬凈組與鹽酸小檗堿聯(lián)合時對紅色毛癬菌也具有協(xié)同作用[3]。

小檗堿與多烯類藥物也具有一定的協(xié)同作用，如小檗堿與兩性霉素B聯(lián)合使用在體外抑制了白色念珠菌的生長，在體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中，播散性念珠病的小鼠在同時給予兩性霉素B和小檗堿時，其平均存活時間達(dá)到了36天，比單一使用兩性霉素B的小鼠存活時間長了22天，并且可以減少兩性霉素B的使用劑量，可見二者具有明顯的協(xié)同作用。

2.2 小檗堿與其他抗真菌藥物的拮抗作用

煙曲霉存在于谷物、污染的食品、土壤和霉腐物中，是引起人和動物曲霉病的重要病原菌。目前臨床上治療煙曲霉感染的藥物有限，大部分藥物具有毒性和耐藥性如伊曲康唑。小檗堿和伊曲康唑的體外實(shí)驗(yàn)對煙曲霉的最低抑菌濃度范圍分別為4-256和0.031-0.250μg/mL。除此之外，對煙曲霉原變種IFM40808，小檗堿和伊曲康唑的MIC50值分別為8和0.125μg/mL。聯(lián)合應(yīng)用小檗堿和伊曲康唑發(fā)現(xiàn)兩藥相互拮抗，可能是因?yàn)樾￠迚A和伊曲康唑一樣通過抑制麥角甾醇途徑抑制煙曲霉的生長，因此臨床不建議兩藥聯(lián)用。另外鹽酸小檗堿和不同濃度特比奈芬、伏立康唑聯(lián)合對紅色毛癬菌，均為拮抗作用。

3 小檗堿輸送體系

在小檗堿藥物輸送體系中研究，制備了裝載小檗堿的多聚（ε-己內(nèi)酯）納米纖維膜（B-NFM），粒徑為190+/-53nm。全血測定B-NFM比紗布創(chuàng)傷輔料（GWD）和非載藥納米纖維（NFM）有更好的吸收能力。止血研究發(fā)現(xiàn)其在促進(jìn)血液凝固方面也比GWD和NFM更有效。B-NFM擁有廣譜的抗微生物活性，與皮膚纖維細(xì)胞有更好的相容性。在治療傷口的真菌感染方面具有潛在的應(yīng)用前景。另外侯東耀等[16]采用乳化-化學(xué)交聯(lián)法制備了負(fù)載小檗堿的殼聚糖微球，該微球球形良好，表面光滑，平均粒徑約15μm，包封率為78.98%，載藥率為4.78%，持續(xù)30d的藥物釋放實(shí)驗(yàn)表明，小檗堿可從微球中緩慢釋放.利用生長速率法測定了微球?qū)?種重要植物病原真菌的抑制作用，5μg/mL微球?qū)Ψ言缫卟【囊志蔬_(dá)65%。可見藥物載體的開發(fā)對于藥效的發(fā)揮具有重要作用。

4 結(jié)束語

小檗堿臨床多用來治療微生物的感染，為一常用的天然成分。近年來小檗堿的研究較為活躍，在多個方面進(jìn)行了活性及機(jī)制的研究如抗癌、降血糖與抗真菌等。由于真菌的耐藥性成為近年來臨床面臨的一大嚴(yán)峻挑戰(zhàn)，迫切需要開發(fā)新的藥物或治療方式以克服真菌的耐藥性，從植物中尋找活性成分，尤其是從抗微生物成分中尋找活性成分研究成為一種選擇。小檗堿在抗真菌方面具有一定特色，且研究報道較少，加強(qiáng)小檗堿抗真菌活性研究對于抗真菌藥物的開發(fā)及該成分的臨床拓展應(yīng)用具有重要意義。

參考文獻(xiàn)

[1]趙曉秋，田家琦，宋軍，等.小檗堿體外抗真菌作用初探[J].中國皮膚性病學(xué)雜志，1992，6（2）：80-83.

[2]阮元，任偉，申進(jìn)文，等.鹽酸小檗堿對植物病原真菌抑制作用及其抑菌的生理指標(biāo)分析[J].河南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2014，48（2）：194-198.

[3]佟盼琢，王冰心，馮琴，等.鹽酸小檗堿聯(lián)合抗真菌藥物對紅色毛癬菌的體外藥敏實(shí)驗(yàn)[J].中國皮膚性病學(xué)雜志，2011，25（5）：351-354.