核轉錄因子—κB p65及干擾素—γ在急性創傷性腦損傷患者中表達關系的臨床研究

目前尚不十分清楚創傷性腦損傷的分子機制，但已有多項實驗證實，在局限性和全腦性缺血動物模型中，神經細胞的凋亡與腦組織的NF-κB表達的上調有直接關系，提示NF-κB的激活在神經細胞凋亡的發生中確實起著重要的作用[1-2]。本研究的目的是以輕、中、重各型腦損傷患者為研究對象，檢測腦損傷患者血清中NF-κB p65的變化，進一步分析創傷性腦損傷后繼發性神經細胞損傷的規律，為探討新的神經保護性治療措施提供理論依據。

1資料與方法

1.1一般資料 選擇單純腦損傷患者40例，年齡18～65歲，平均（37.8±7.4）歲，其中女性28例，男性12例。所有患者入院時均確診腦挫裂傷，并依據GCS評分將入選患者分為輕型組（GCS評分≥12分）、中型組（8分

1.2研究方法

1.2.1標本的采集 最終入選的40例腦損傷和8例四肢骨折的患者分別于傷后24h抽取外周靜脈血樣3ml；健康成人組8人一次性抽取靜脈血5m1，將其分為4等份。分離血清并在-70℃下保存待測。

1.2.2主要試劑和儀器 人核轉錄因子-κB p65（NF-κB p65）和干擾素-γELISA（IFN-γ）試劑盒（RD Systems公司，美國）、多功能酶標儀 （Spectra MaxM2）（BioTek 公司，美國）等。

1.3統計學分析 采用SPSS 18.0統計軟件，計量資料用（x±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析（ANOVA），兩兩比較采用LSD-t檢驗，相關分析采用直線相關分析，以P<0.05為差異具有統計學意義。

2結果

2.1各組腦損傷患者、四肢骨折患者及健康成年人血清中NF-κB p65及IFN-γ含量水平結果的比較，發現創傷性腦損傷患者和四肢骨折患者血清中NF-κB p65較健康成人組均升高，差異具有統計學意義（P<0.05），而前二者NF-κB p65含量比較差異無統計學意義（P>0.05）；創傷性腦損傷患者血清中IFN-γ依病情越重升高越顯著（P<0.05），健康成人組和四肢骨折組患者血清中IFN-γ含量水平較腦損傷組比較均明顯降低，差異有統計學意義（P<0.05）。

2.2重型顱腦損傷患者血清中IFN-γ與NF-κB p65含量水平的相關性 通過相關分析發現重型顱腦損傷患者血清中IFN-γ與NF-κB p65呈正線性相關，以NF-κB p65含量水平為自變量（independent variable），用X表示；IFN-γ含量水平為應變量（dependent variable），用Y表示。回歸方程=-0.432+0.271x， r=0.947（P<0.001）。

3討論

創傷性腦損傷后神經細胞功能的缺失機制尚未明確，目前主要認為繼發性腦損傷是指在原發性腦損傷的基礎上發生的一系列病理變化，它們均可導致神經細胞不同程度的破壞，且近年來越來越多的文獻報道創傷性腦損傷后程序性細胞凋亡與慢性神經細胞功能缺失有關[3]，并經過各種創傷性腦損傷動物模型予以證實。

既往研究報道，核轉錄因子（nuclear transcription factor kappaB，NF-κB）能與其他細胞基因增強子或啟動子序列發生特異性結合而促進其轉錄和表達，與免疫反應、炎癥反應以及細胞的分化、增殖和凋亡等緊密相關[4]。其中小膠質細胞被缺血激活后，釋放IFN-γ等細胞毒性物質。IFN-γ還可通過利用JAK/STAT信號轉導途徑誘導細胞的分化、增殖或凋亡[5-6]，進一步加重創傷腦組織的損害。本研究也進一步說明了創傷性腦損傷后NF-κB p65參與神經功能損傷的一個重要因素。本研究進一步通過腦損傷患者外周血清中NF-κB p65與所選的8例四肢骨折患者和8位健康成人組血清含量進行比較發現，四肢骨折患者外周血中NF-κB p65升高，且與健康成人組相比有統計學意義（P<0.05），我們認為通過檢測外周血中NF-κB p65不可作為腦損傷后判斷神經組織損傷的特異性指標。

本研究結果還發現傷情越重即GCS評分越低，IFN-γ升高越顯著；與此同時，本研究還發現腦損傷患者血清中IFN-γ所檢測的含量水平變化與四肢骨折患者相比較無統計學意義，由此推測IFN-γ是創傷性腦損傷后作為神經功能缺失的一個特異性而靈敏的指標，通過進一步探討我們發現重型腦損傷組患者血清中IFN-γ與NF-κB p65的含量水平顯著降低且二者含量水平成顯著正相關，說明NF-κB p65可誘發促炎介質（IFN-γ）的含量水平。

綜上所述，創傷性腦損傷后神經組織的繼發性損傷的病理生理改變及其復雜，既往開展的實驗及臨床研究所得出的結論尚不能完全適用于臨床。通過檢測外周血清指標尚處于探索階段，本研究直接在臨床工作中選擇創傷性腦損傷患者，范圍較廣，但得出的結論還有待于在臨床工作中不斷完善。

參考文獻：

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[2]Lu J， Moochhala S， Kaur C， et al. Changes in apoptosis-related protein （NF-κB and IFN-γ） expression with DNA fragmentation in the central nervous system in rats after closed head injury[J]. Neurosci Lett， 2013，141（11）：21-22.

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編輯/馮焱