免疫組化p16、Ki—67在宮頸上皮內(nèi)瘤變病理診斷中的應(yīng)用價(jià)值

摘要：目的 研究P16、Ki-67對宮頸上皮內(nèi)瘤病變病理診斷中的應(yīng)用價(jià)值，促進(jìn)宮頸疾病患者的康復(fù)作用。方法 從我院接診的宮頸上皮瘤病變患者中隨機(jī)抽取62例，患者患有不同程度的宮頸上皮內(nèi)瘤、宮頸單一增生鱗化、尖銳濕疣等，采用化驗(yàn)的方法測得患者體內(nèi)的P16、Ki-67指標(biāo)變化情況。結(jié)果 分別觀察重度宮頸上皮內(nèi)瘤患者（CINⅢ）、中度宮頸上皮內(nèi)瘤患者（CINⅡ）、輕度宮頸上皮內(nèi)瘤患者（CINⅠ）、宮頸單一增生鱗化患者和尖銳濕疣患者檢查結(jié)果發(fā)現(xiàn)，P16的陽性表達(dá)率依次為100.00%、90.92%、85.18%、0.00%、1.01%，而Ki-67的陽性表達(dá)率依次為100.00%、100.00%、100.00%、30.01%、1.88%。兩種指標(biāo)的陽性表達(dá)率比較差異明顯，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論 P16、Ki-67指標(biāo)與宮頸疾病的發(fā)病率有著密切聯(lián)系，指標(biāo)值越高，患者的宮頸癌的發(fā)生幾率越高，病情越嚴(yán)重。對患者進(jìn)行指標(biāo)化驗(yàn)有助于準(zhǔn)確把握病癥的發(fā)展階段，及時(shí)采取有效措施，有利于改善患者的治療效果。

關(guān)鍵詞：P16；Ki-67；應(yīng)用價(jià)值；診斷作用

宮頸上皮內(nèi)瘤是一種常見的婦科疾病，嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量，甚至還會(huì)威脅患者的生命安全[1]。隨著醫(yī)學(xué)研究的不斷深入，相關(guān)學(xué)者發(fā)現(xiàn)宮頸上皮內(nèi)瘤主要是由HPV感染引起的疾病，是宮頸癌變的前期病癥。隨著患者病情的不斷惡化，通常進(jìn)行一系列變化，即由宮頸非典型增生到原位癌，然后發(fā)展為浸潤癌的過程。臨床癥狀表現(xiàn)為白帶增多并帶有血絲、陰道接觸性出血、宮頸糜爛息肉等[2]，人們的肉眼往往對病情的發(fā)現(xiàn)率較低，需要借助專業(yè)檢測儀器進(jìn)行化驗(yàn)。P16在醫(yī)學(xué)上被稱為腫瘤抑制基因，而Ki-67則作為細(xì)胞生成的重要表示因素。本研究通過對觀察P16和Ki-67指標(biāo)在宮頸上皮瘤患者的病情程度的顯示情況，說明了其在病變的應(yīng)用價(jià)值。現(xiàn)將研究情況報(bào)告如下。

1資料與方法

1.1一般資料 選取我院于2012年接收的62例宮頸病患者作為觀察對象，經(jīng)宮頸活檢和陰道鏡檢查，其中CINⅢ患者10例、CINⅡ患者12例、CINⅠ患者13例、宮頸單一增生鱗化患者12例、尖銳濕疣患者15例。患者年齡年齡20～42歲，平均年齡（35.63±3.2）歲、病程（3±3.4）年。患者的年齡、病齡、各類宮頸疾病患者的人數(shù)等一般資料基本相等，P>0.05，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可以進(jìn)行比較。

1.2方法 在患者接受治療前，采用陰道鏡對62例患者進(jìn)行檢查，并且對每位患者做高危型HPV DNA檢測[3]。

1.2.1免疫組織化學(xué)檢測采用二步法，抗原修復(fù)用時(shí)，使用枸櫞酸鹽緩沖液（PH6.0）配合高壓鍋加熱修復(fù)法。試劑來自DAKO公司，鼠抗人P16及Ki-67單克隆抗體為第一抗，羊抗鼠單克隆抗體為第二抗。試劑的使用和操作方法均按照說明書進(jìn)行，記錄實(shí)驗(yàn)操作結(jié)果。

1.2.2高危型HPV DNA檢測使用的第二代雜交捕獲試驗(yàn)（HC-Ⅱ） 產(chǎn)自美國的Digene公司，從本院的檢驗(yàn)科制定專人負(fù)責(zé)HC-Ⅱ檢測操作和分析工作，通過對宮頸活檢標(biāo)本例行石蠟包埋切片，檢測患者的（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68）等13種種高危型HPV DNA。

1.3療效判定 ①根據(jù)組織中陽性細(xì)胞所占比例，將P16陽性為細(xì)胞核或者細(xì)胞漿的著色程度分以下四個(gè)等級，即>50%為強(qiáng)陽性（+++），>25%且≤50%為陽性（++），≥5%且≤25%為弱陽性（+），而<5%為陰性（-）。根據(jù)細(xì)胞核著色的顯示狀態(tài)（細(xì)胞核著色為陽性）將細(xì)胞核蛋白Ki-67著色程度同樣分為四個(gè)等級分級，即>50%為強(qiáng)陽性（+++），>25%且≤50%的為陽性（++），>5%且<25%的為弱陽性（+），<5%則為陰性。②高危型HPV DNA檢測以診檢測出HPVDNA≥1.0 pg/mL為判斷是否呈陽性的標(biāo)準(zhǔn)。③經(jīng)檢查后，對患者進(jìn)行治療，由陪護(hù)人員關(guān)于患者對治療的滿意度進(jìn)行調(diào)查，從而證明p16、Ki-67在宮頸上皮內(nèi)瘤變病理診斷中的應(yīng)用價(jià)值。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 將所有檢查數(shù)依次據(jù)錄入Excel表格，采用SPSS 公司推出的SPSS 15.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)數(shù)資料用百分比表示，并對兩組數(shù)據(jù)進(jìn)行P值檢測，如果P<0.05，則視為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，反之，則無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1 P16指數(shù)與宮頸病變的關(guān)系 患者宮頸病變程度與P16的陽性表達(dá)強(qiáng)度呈正相關(guān)，P16的陽性表達(dá)強(qiáng)度愈強(qiáng)，宮頸病理嚴(yán)重級別越高，P16表達(dá)陽性越強(qiáng)，CINⅠ患者、CINⅡ患者、CINⅢ患者、宮頸單一增生鱗化患者和尖銳濕疣患者的強(qiáng)陽性的比例差異明顯，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表1。

2.2 Ki-67指數(shù)與宮頸病變的關(guān)系 患者宮頸病變程度與Ki-67的陽性表達(dá)強(qiáng)度同樣呈正相關(guān)，宮頸病理的嚴(yán)重程度隨著P16的陽性表達(dá)增強(qiáng)而加深，選取的五類病癥患者的強(qiáng)陽性的比例差異較大，P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，見表2。

3討論

研究表明，研究中P16在尖銳濕疣的上皮組織中大多呈陰性表達(dá)，而在宮頸上皮瘤和宮頸單一增生鱗化組織中呈強(qiáng)陽性或陽性表達(dá)，且宮頸病變程度隨著表達(dá)的強(qiáng)度的大小而相應(yīng)的加深或減輕[4]。P16與高危型HPV DNA的負(fù)荷量呈正相關(guān)，病毒含量越高，P16值越高，且高危型HPV DNA的也會(huì)隨著CIN等級的升級而不斷升高。Ki-67指標(biāo)值過高，表示CIN病理的嚴(yán)重性，是對患者健康狀態(tài)發(fā)出的預(yù)警信號[5]。Ki-67與與高危型HPV DNA的負(fù)荷量也呈正比例關(guān)系，病毒負(fù)荷量大促使Ki-67表達(dá)過度。由此可見，P16和Ki-67指標(biāo)表達(dá)與CIN病變的發(fā)生過程密切相關(guān)，預(yù)測價(jià)值極高，能夠?yàn)獒t(yī)生對病情的診斷工作提供可靠依據(jù)，可能作為診斷和評定CIN病癥治療效果的衡量指標(biāo)，值得臨床推廣。

參考文獻(xiàn)：

[1]盧舒靜，江雪娟，羅立敏，等.臺(tái)州市路橋區(qū)已婚農(nóng)村婦女宮頸上皮內(nèi)瘤變危險(xiǎn)因素分析[J].中國預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2014，（01）：37-40.

[2]趙子龍，楊勇，任玉峰.P16、Ki-67在宮頸上皮內(nèi)病變的研究[J].現(xiàn)代診斷與治療，2013，（06）：.1374-1375.

[3]程玲瑗.P16和Ki-67聯(lián)合檢測在宮頸上皮內(nèi)瘤、不成熟鱗化及宮頸癌診斷中的作用[J].中國初級衛(wèi)生保健，2013，（11）：52-53.

[4]田琦，孟剛.p16、ki-67在宮頸鱗癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變組織中的表達(dá)及臨床意義[J].中國老年學(xué)雜志，2011，（17）：3378-3379.

[5]張燕，王一，王建華，等.p16、Ki-67在440例宮頸病變中的表達(dá)及其病理診斷價(jià)值[J].診斷病理學(xué)雜志，2013，（03）：171-175.

編輯/張燕