6種病毒抑制劑對西藏青稞上大麥黃矮病的防治效果

劉何春 姚小波 李楊 雷雪萍 王文峰

摘要 ：通過田間小區試驗，開展了6種病毒抑制劑對西藏青稞上大麥黃矮病防治效果的研究。采用帶毒蚜蟲人工接種法，于青稞起身拔節期每株接種10～15頭帶毒麥長管蚜，7 d后滅蚜，滅蚜后3 d噴施病毒抑制劑，在成株期出現黃矮病癥狀后調查病株率、病情指數、防治效果，以及長勢和產量。結果表明，6種病毒抑制劑對青稞上大麥黃矮病有不同程度的防治效果，其中6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS和8%寧南霉素AS防治效果分別為65.38%、52.41%和50.11%;處理后的青稞有不同程度的增產，其中6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS和40%烯·羥·嗎啉胍SP處理增產率分別為78.44%、53.22%、27.42%。綜合本文結果表明，6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS對西藏大麥黃矮病有較好的防治效果和增產率。

關鍵詞 ：大麥黃矮病; 病毒抑制劑; 防效; 長勢; 產量

中圖分類號： S 482.2; S 432.41

文獻標識碼： B

DOI： 10.16688/j.zwbh.2020184

Control efficacy of six plant virus inhibitors on barley yellow dwarf disease in Tibet

LIU Hechun1，2， YAO Xiaobo1，2*， LI Yang1，2， LEI Xueping1，2， WANG Wenfeng2，3

（1. Agriculture Research Institute， Tibet Academy of Agriculture and Animal Husbandry Sciences， Lhasa 850032， China; 2. Lhasa Crop Pest Scientific Observation and Experiment Station of Ministry of Agriculture and Rural Affairs， Lhasa 850032， China; 3. Institute of Agricultural Resources and Environment， Tibet Academy of Agriculture and Animal Husbandry Sciences， Lhasa 850032， China）

Abstract ：Control efficacy of six plant virus inhibitors on barley yellow dwarf disease of highland barley were evaluated in Tibet. The experiments were carried out to inoculate Barley yellow dwarf virus to the highland barley leaves at the stage of standing to jointing with viruliferous aphids （Sitobion miscanthi）. Each plant was inoculated with 10 to 15 viruliferous aphids. Aphids were killed with imidacloprid 10% WP seven days after inoculation， and all plants were sprayed three days later with plant virus inhibitors. Investigation of disease index， growth， and yield showed that six plant virus inhibitors have different degrees of control effect on barley yellow dwarf disease of highland barley. When treated by oligosaccharins·plant activator protein 6% WP， fungous proteoglycan 0.5% AS， and ningnanmycin 8% AS， the control efficacies on barley yellow dwarf disease were 65.38%， 52.41% and 50.11%， respectively. Compared with water treatment， the increase rate of barley yields were 78.44%， 53.22% and 27.42%， respectively， when treated by oligosaccharins·plant activator protein 6% WP， fungous proteoglycan 0.5% AS， and enadenine·oxyenadenine·moroxydine hydrochloride 40% SP. The above results indicate that oligosaccharins·plant activator protein 6% WP and fungous proteoglycan 0.5% AS have good control effect on barley yellow dwarf disease in Tibet.

Key words ：barley yellow dwarf disease; plant virus inhibitor; control efficacy; crop growth; grain yield

大麥黃矮病（barley yellow dwarf disease，BYD）是世界各地最重要且分布最廣泛的麥類作物病毒病害，是包括大麥（青稞）、小麥和燕麥等作物在內的多種禾谷類作物的主要病害之一。作物感染黃矮病毒后，表現出植株矮縮、葉片黃化和有效分蘗減少等癥狀，從而導致減產[1]。

近年來，大麥黃矮病在西藏青稞上時有發生。2011年拉薩達孜縣、墨竹工卡縣的春青稞大麥黃矮病發病面積100余公頃，2016年曲水縣冬青稞‘冬青18發病面積70余公頃，發病田減產30%～50%[23]。大麥黃矮病造成了青稞嚴重減產，甚至絕收，且導致青稞產量與品質不同程度下降，嚴重影響西藏青稞生產的可持續發展[23]。目前西藏自治區主要通過適當調整播期、施用化學農藥防控傳毒介體麥蚜等措施進行病害防治[2]。針對植物病毒還沒有特效藥，該病害的防治是生產上的一大難題。為防治大麥黃矮病，選育抗 BYDV 品種是最經濟有效的方法，但栽培品種中抗病基因缺乏，常規育種周期長，定向性差，易帶入不良性狀;化學防治也是控制大麥黃矮病的主要途徑之一，但主要以殺蟲劑控制蚜蟲為主，而蚜蟲難以準確預報[4]。

病毒抑制劑作用機理主要為抑制病毒侵染、復制和增殖、癥狀表達，也可能誘導寄主產生抗病性和促進植株生長。抑制劑種類包括化學合成的具有抗植物病毒活性的化合物，以及植物源、微生物源、動物源和植物激素類抗病毒物質[56]。

目前進入中國市場的病毒抑制劑有37種以上，用于農業生產的制劑有23個以上[7]，如鹽酸嗎啉胍類、氨基酸衍生物類、磺酸衍生物類、三唑類衍生物類、三嗪類衍生物類和微生物源類等[89]。這些制劑多見于其他植物病毒病的防治報道[914]，對大麥尤其是青稞上黃矮病防治效果的報道目前尚未見。為嘗試用病毒抑制劑防治青稞大麥黃矮病，本研究開展了小區藥效試驗，旨在為青稞上大麥黃矮病的防控篩選優良藥劑。

1 材料與方法

1.1 供試材料

田間小區試驗青稞品種為‘青稞喜拉22;室內盆栽用于無毒蚜蟲擴繁、飼養的青稞品種為‘青稞藏青2000。滅蚜所用藥劑為10%吡蟲啉可濕性粉劑（WP），山東恒利達生物科技有限公司產品。

供試病毒抑制劑：0.5%香菇多糖水劑（AS），青島東生藥業有限公司;8%寧南霉素水劑（AS），德強生物股份有限公司;6%寡糖·鏈蛋白可濕性粉劑（WP），中國農業科學院植物保護研究所廊坊農藥中試廠;40%烯·羥·嗎啉胍可溶粉劑（SP），河北中保綠農作物科技有限公司;0.5%氨基寡糖素水劑（AS），河北奧德植保藥業有限公司;30%毒氟·嗎啉胍可濕性粉劑（WP），廣西田園生化股份有限公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 試驗設置

小區試驗選在農業農村部拉薩作物有害生物科學觀測試驗站網室內。試驗地海拔3 650 m。各小區的肥水、田間管理嚴格一致，小區等行距、隨機區組排列。6種病毒抑制劑分別為6種處理，CK1為健康植株噴施清水對照，CK2為接種飼毒蚜并噴施清水對照，每處理3個小區重復，每個小區面積為9 m2，共24個小區。

1.2.2 帶毒蚜蟲人工接種和病毒抑制劑噴施

采用水培青稞苗飼養麥蚜法獲得大量蟲齡、大小一致的無毒麥長管蚜Sitobion miscanthi（Fabricius）。采集感染大麥黃矮病毒GAV（BYDVGAV）的具有典型癥狀的青稞葉片，剪成1～2 cm小段，放入底部墊有保濕濾紙的培養皿中，投放饑餓24 h的無毒麥長管蚜，蓋嚴，置于15℃培養箱，黑暗離體飼毒24～48 h后轉移到試驗小區內處于起身拔節期的青稞植株上，每株接種10～15頭帶毒麥長管蚜。CK1罩網不接種蚜蟲。接毒7 d后噴施10%吡蟲啉WP（有效成分用量為300 g/hm2）滅蚜。滅蚜3 d后噴施6種病毒抑制劑和清水，每間隔7 d噴施1次，共3次。

1.2.3 調查方法

1.2.3.1 成株期出現典型黃矮癥狀后的病情調查

青稞成株期出現典型黃矮癥狀后，按NY/T3060.62016[15]計算病株率、病情指數和防治效果。

病株率=發病青稞株數/調查青稞總株數×100%;病情指數=Σ（各級病株數×各級代表值）/（調查總株數×最高級代表值）×100;防治效果=（對照病情指數-處理病情指數）/對照病情指數×100%。

1.2.3.2 6種病毒抑制劑處理對青稞長勢和產量的影響調查

長勢參數：收獲期采用5點取樣法，每點20株青稞，每小區共100株青稞，測量株高、穗長和分蘗數。

產量參數：每小區隨機選取1 m2，收獲全部青稞麥穗，統計1 m2穗數、每穗粒數、千粒重及1 m2產量，并根據重復區組的千粒重折算每667 m2產量（折合產量）。折合產量（kg/666.7 m2）=1 m2 實際產量（g）×666.7/1 000;理論產量（kg/666.7 m2）=[1 m2穗數×每穗粒數×千粒重（g）×666.7]/1 000。

1.3 數據統計

采用Excel 2010對數據進行整理，SPSS 20.0 Oneway ANOVA模塊對數據進行單因素方差分析，采用Origin Pro 8.5作圖。統計檢驗前，用KolmogorovSmirnov和Levene統計量分別檢驗所有數據的正態性和方差同質性，滿足方差齊性采用LSD多重比較，不滿足方差齊性采用GamesHowell多重比較法進行分析。

2 結果與分析

2.1 不同病毒抑制劑處理對青稞上大麥黃矮病的防治效果

不同病毒抑制劑處理對青稞上大麥黃矮病的防治效果如表2所示。不同處理之間病株率、病情指數均有極顯著差異（病株率F（6，14）=53.249，P<0.01;病情指數F（6，14）=54.981，P<0.01）。6種病毒抑制劑對青稞上大麥黃矮病的防治效果為27.06%～65.38%。其中6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS和8%寧南霉素AS防治效果突出，分別為65.38%、52.41%和50.11%。

2.2 不同病毒抑制劑處理對青稞長勢的影響

健康植株噴施清水對照（CK1）與接種飼毒蚜并噴施清水對照（CK2）相比較，分蘗數差異極顯著，證實了大麥黃矮病毒危害使青稞有效分蘗減少;6種病毒抑制劑處理與接種飼毒蚜并噴施清水對照（CK2）相比，分蘗數極顯著增加，說明噴施6種病毒抑制劑能夠有效降低大麥黃矮病毒造成的青稞分蘗數減少。

與接種飼毒蚜并噴施清水對照（CK2）相比，健康植株噴施清水對照（CK1）、6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS和30%毒氟·嗎啉胍WP株高差異極顯著，這3種病毒抑制對株高有促進作用。

與接種飼毒蚜并噴施清水對照（CK2）相比，健康植株噴施清水對照（CK1）和6種病毒抑制劑處理的穗長極顯著增加，說明6種病毒抑制劑促進了青稞穗長增長。

綜上，大麥黃矮病毒的侵染造成青稞分蘗數減少、株高降低、穗長變短，但是噴施6種病毒抑制劑能增加分蘗數、增長穗長，噴施6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS、30%毒氟·嗎啉胍WP還能提高株高。

2.3 不同病毒抑制劑處理對青稞產量的影響

與接種飼毒蚜并噴施清水對照（CK2）對比，只有健康植株噴施清水對照（CK1）的穗粒數極其顯著增加。6種病毒抑制劑處理與接種飼毒蚜并噴施清水對照CK2差異不顯著，說明6種病毒抑制劑對提高穗粒數作用不明顯。

6種病毒抑制劑對于穗頭數的影響不大。健康植株噴施清水對照（CK1）和接種飼毒蚜并噴施清水對照（CK2）穗頭數差異不顯著，說明大麥黃矮病毒對穗頭的生成影響不大。

健康植株噴施清水處理組（CK1）的千粒重和6種病毒抑制劑處理及接種飼毒蚜并噴施清水的處理（CK2）差異極顯著，說明噴施6種病毒抑制劑可提高青稞的千粒重。6種病毒抑制劑處理的青稞中，千粒重最高的6%寡糖·鏈蛋白WP顯著高于其他處理，千粒重最低的是30%毒氟·嗎啉胍WP。

6%寡糖鏈蛋白WP和0.5%香菇多糖AS處理，其1 m2實際產量顯著高于接種飼毒蚜并噴施清水的處理（CK2）;另外4種病毒抑制劑處理與CK2差異不顯著;說明6%寡糖鏈蛋白WP和0.5%香菇多糖AS對青稞有增產作用。

綜上，6種藥劑處理對比接種飼毒蚜并噴施清水對照（CK2），穗粒數和穗頭數差異不顯著，千粒重差異極顯著，所噴施的6種病毒抑制劑是通過提高千粒重來增加理論產量的。

不同病毒抑制劑處理對青稞產量的影響如表3所示。接種飼毒蚜并噴施清水對照（CK2）與健康植株噴施清水對照（CK1）相比，減產率高達60.54%，說明大麥黃矮病毒對青稞產量的影響較大。

穗粒數、穗頭數和千粒重為產量三因素，其中千粒重是決定理論產量的關鍵因素。通過對比千粒重、病株率等參數的差異顯著性，6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS兩種病毒抑制劑作為防治大麥黃矮病的藥劑效果較好。

3 結論與討論

通過千粒重、病株率等參數的差異顯著性，建議選用6%寡糖·鏈蛋白WP和0.5%香菇多糖AS這兩種病毒抑制劑作為防治大麥黃矮病的藥劑。

健康對照CK1，在嚴格一致的肥水、田間管理、取樣等條件下，1 m2實際產量及667 m2折合產量接近大田正常產量;而不噴藥感病對照CK2減產率達60.54%，說明大麥黃矮病導致青稞明顯減產。

病毒抑制劑通過提高千粒重（籽粒飽滿度）、增加分蘗數、增長穗長、提高株高等一系列途徑減少黃矮病毒造成的減產，從另一方面講就是提高了產量。

病毒抑制劑對煙草花葉病[910]、小麥黃矮病[5，7，11]、番茄病毒病[12]等其他植物病毒病害[1314]的防治效果已有研究。張瓊芬[9]采用8%寧南霉素AS 1 600倍液、20%鹽酸嗎啉胍SP 600倍液、0.5% 氨基酸寡糖素AS 600倍液、20%嗎胍·乙酸銅WP 700倍液進行煙草花葉病毒病田間藥效試驗，結果表明20%嗎胍·乙酸銅WP 700倍液具有較好的防治效果。閆佳會等[11]曾在田間條件下研究了病毒抑制劑對小麥黃矮病的防治效果，結果表明，不同藥劑處理對小麥黃矮病均有一定的抑制作用，且小麥產量有不同程度的增加，并同樣得出了6%寡糖·鏈蛋白WP防效最高、增產效果最顯著。病毒抑制劑除了對小麥黃矮病和煙草花葉病效果較好外，對其他植物病毒病害也有較明顯的效果[1214]，而6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS相比其他藥劑，效果更為突出，可以作為未來防治大麥黃矮病的藥劑使用。

本研究中效果較好的2種藥劑6%寡糖·鏈蛋白WP和0.5%香菇多糖AS均為生物源制劑。6%寡糖·鏈蛋白WP包括3%氨基寡糖素、3%極細鏈格孢激活蛋白，作用方式為抑制病毒基因表達和病毒復制，同時通過細胞活化作用修復受害植株損傷，促根壯苗，增強作物的抗逆性;激發植物體內基因表達，產生幾丁酶、葡聚糖酶及PR蛋白等物質，誘導植物產生多重防御作用，提升自身抗病能力。0.5%香菇多糖AS起主要作用的成分系食用菌菌體代謝所產生的蛋白多糖，而真菌多糖、云芝多糖等多糖在相關研究中已經證實對小麥黃矮病防治效果突出[1617]。6%寡糖·鏈蛋白WP、0.5%香菇多糖AS、0.5%氨基寡糖素AS，這些成分均為生物源成分農藥，相比30%毒氟·嗎啉胍WP等化學成分農藥，效果略佳。通過本試驗推斷，化學農藥阻斷病毒復制過程，對大麥黃矮病防治起到了一定的作用，但是生物農藥中的生物源成分不僅能阻斷病毒復制傳播過程，還可作為營養物質促根壯苗提升植株自身抵抗力，對大麥黃矮病的防治起到了更好的作用。上述推斷還需要進一步的分子試驗論證。

參考文獻

[1] 馬蘇里D E. 大麥病害概略[M]. 藺瑞明， 馮晶， 陳萬權，等譯. 第2版.北京： 中國農業科學技術出版社， 2014.

[2] 劉仁建. 青稞黃矮病發生規律及防治方法[J]. 西藏農業科技， 2015， 37（2）： 3435.

[3] 央珍， 才旺卓瑪， 參培， 等. 普蘭縣青稞黃矮病及防治[J]. 農民致富之友， 2015（12）： 131.

[4] 張文斌， 安德榮， 任向輝. 中國小麥黃矮病的發生及綜合防控研究進展[J]. 麥類作物學報， 2009， 29（2）： 361364.

[5] 張文斌. 小麥黃矮病防治關鍵技術及其新型病毒抑制劑的研究[D]. 楊凌： 西北農林科技大學， 2009.

[6] 赫爾R. 馬修斯. 植物病毒學[M]. 范在豐， 李懷方， 韓成貴， 等譯. 北京： 科學出版社， 2007： 764.

[7] 張文斌， 任向輝， 安德榮， 等. 幾種藥劑對小麥黃矮病的防治效果[J]. 麥類作物學報， 2009， 29（5）： 930933.

[8] 楊崇實， 王勇， 劉耕春. 防治植物病毒制劑進展及其無害化應用前景[J]. 農藥市場信息， 2008（8）： 46.

[9] 張瓊芬. 幾種病毒抑制劑對煙草花葉病防效試驗[J]. 江西農業學報， 2011， 23（7）： 141142.

[10]謝鑫， 桑維鈞， 張新強， 等. 6 種病毒抑制劑對煙草花葉病毒的抑制作用及其機制初探[J]. 河南農業科學， 2011， 40（5）： 104107.

[11]閆佳會， 姚強， 郭青云. 10種病毒抑制劑對小麥黃矮病的防治效果[J]. 植物保護， 2016， 42（1）： 239242.

[12]王春梅， 潘曉芬. 植物源抗病毒劑20%丁香酚水乳劑防治番茄病毒病田間藥效試驗[J]. 農藥， 2013， 52（6）： 442443.

[13]陳浩， 胡梁斌， 王春梅， 等. 植物源抗病毒劑20%丁香酚AS防治西葫蘆病毒病藥效試驗[J]. 江西農業學報， 2009， 21（12）： 112113.

[14]姚鑫. 5%殼寡糖水劑防治辣椒病毒病藥效試驗報告[J]. 湖北植保， 2016（4）： 67.

[15]中華人民共和國農業部. 大麥品種抗病性鑒定技術規程：第6部分 抗黃矮病：NY/T 3060. 62016 [S]. 北京： 中國農業出版社， 2017： 16.

[16]謝咸升， 安德榮. 不同種類真菌多糖對小麥黃矮病的防治效果[J]. 麥類作物學報， 2014， 34（4）： 557562.

[17]楊海燕. 云芝葡聚糖對小麥黃矮病的防治及植物內生放線菌的篩選[D]. 楊凌： 西北農林科技大學， 2015： 1718.

（責任編輯：楊明麗）