百菌清在獼猴桃和土壤中殘留動態

黃成名 程軍勇　鄭莉　張海玲　蘇彩晴　付高峰

摘 要： 建立氣相色譜法測定獼猴桃和土壤中百菌清殘留的方法，方法的檢出限為0005 mg·kg-1，通過對百菌清在獼猴桃和土壤中降解動態研究，表明百菌清在獼猴桃和土壤中的降解半衰期為574 d和776 d，施藥后第35 d，獼猴桃中百菌清未檢出，土壤中百菌清殘留量為0012 mg·kg-1，推薦百菌清在獼猴桃上使用的安全間隔期為35 d。

關鍵詞： 百菌清；獼猴桃；土壤；安全間隔期

中圖分類號：S482.2+6；S663.4 文獻標識碼：A 文章編號：1004-3020（2015）05-0027-03

在農藥、肥料使用上對時間、數量上把握不準，導致獼猴桃品質差，商品價值低[1，2]。百菌清是深圳諾普信農化股份有限公司推出的一種高效低毒廣譜的殺菌劑，可用于防治果樹、蔬菜等多種病害。利用百菌清防治獼猴桃的病害，對于提高獼猴桃產量和品質具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗材料為18 a生‘武植三號和‘魁蜜。試驗樹樹勢基本一致，坐果情況相近。供試藥劑為75%百菌清可濕性粉劑（深圳諾普信農化股份有限公司提供）。儀器設備主要有Agilent6890N氣相色譜儀（美國Agilent 公司，微電子捕獲檢測器（μ-ECD）），配化學工作站和7683B自動進樣器和DB-1701毛細管色譜柱；旋轉蒸發儀（瑞士 BUCHI公司）；渦流混合器、電子天平、精密移液槍、氮吹儀、固相萃取柱（氟羅里硅土柱，Agilent，6 mL/500 mg）；試劑主要有百菌清標準品（純度98%，）色譜純乙腈、色譜純正己烷、色譜純丙酮，淋洗液：正己烷∶丙酮（9∶1，V/V）。

1.2 試驗方法

1.2.1 取樣方法

75%百菌清可濕性粉劑在獼猴桃中的消解動態試驗，試驗小區設施藥區和不施藥區（空白對照）處理，每處理3個小區，每個小區面積不少于60 m2，施藥劑量為推薦劑量的1.5倍（332 g·hm-2），兌水20 L，施藥時間：病害發生初期（現蕾期）噴霧施藥。75%百菌清可濕性粉劑在土壤中的消解動態試驗取未種植的空地（20～30 m2），去除土表附著物，按消解試驗相同濃度以332 g·hm-2劑量均勻噴霧（使土表濕透），噴藥后0（2 h），1，3，7，14，21，28，35，45 d分別采樣。分別按時間采集獼猴桃和土壤樣品。每小區按對角線法隨機采集獼猴桃樣品不少于1 kg（8～10個）；土壤鉆取0～10 cm土層，每小區不少于10個點，采樣量不少于05 kg。寫好標簽和采樣日期，貯存在-20 ℃冰箱中保存。

1.2.2 色譜條件

色譜柱：DB-1701毛細管柱30 m×032 mm×025 μm；色譜柱溫度：160 ℃（保持4 min）15 ℃/min250 ℃（保持15 min）；ECD檢測器溫度：290 ℃；進樣口溫度：240 ℃；載氣高純氮（純度9999%）：20 mL·min-1；尾吹氣（高純氮）：30 mL·min-1；進樣量：10 μL。

1.2.3 樣品處理方法

稱取獼猴桃樣品250 g，土壤樣品100 g準確加入50 mL乙腈溶液，獼猴桃樣品高速均質2 min，土壤樣品超聲30 min，靜置15 min， 準確吸取乙腈層10 mL于圓底燒瓶中，50 ℃水浴旋轉蒸發干，然后加入1 mL淋洗液溶解，待凈化。

用5 mL正己烷預洗，當溶劑液面流至吸附填料表面時，立即加入樣品提取液，用10 mL離心管收集洗脫液，用8 mL正己烷∶丙酮（9∶1，V/V）分兩次淋洗固相萃取柱，合并收集洗脫液，用氮吹儀40 ℃下吹干，用正己烷定容至20 mL，供氣相色譜儀檢測[3]。

1.2.4 標準曲線的制作

將1000 mg·L-1的百菌清標準溶液分別用正己烷分別稀釋配得0005，001，002，010，050，100 mg·L-1系列標準溶液，在1.2.2氣相色譜條件下進行測定，百菌清標準品濃度在0005～10 mg·L-1范圍成線性，線性方程為y=310 8019 x-2 1416，R2= 0992 1，其中y為百菌清相應的峰面積，x為百菌清標準品溶液濃度（mg·L-1）。

1.2.5 最小檢出量

在上述條件下，百菌清的最小檢出量為50×10-12 g。

1.2.6 最低檢測濃度

在上述色譜條件和分析方法百菌清獼猴桃、土壤的最低檢出濃度為0005 mg·kg-1。

1.2.7 相對保留時間

上述色譜條件下，百菌清保留時間約為514 min。

2 結果與分析

2.1 獼猴桃和土壤色譜測定結果

在1.2.2色譜條件下，百菌清標準品（005 mg·L-1）、獼猴桃空白樣品（CK）、獼猴桃樣品（施藥后第5 d）、土壤空白樣品（CK）、土壤樣品（施藥后第5 d）的色譜圖，分別見圖1～圖5。

2.2 百菌清在獼猴桃和土壤中的降解動態

從試驗結果可知，百菌清在獼猴桃和土壤中的殘留量隨著時間的延長而降低，噴施百菌清的當天（施藥后2 h），獼猴桃中百菌清殘留量為3974 mg·kg-1，土壤中百菌清殘留量為0442 mg·kg-1。百菌清在獼猴桃和土壤中的半衰期，即百菌清藥物殘留量變成初始一半所用的時間，獼猴桃中為574 d，土壤中為776 d，噴施百菌清后第35 d，獼猴桃中百菌清殘留量低于檢測限（0002 mg·kg-1），表示已全部消解無殘留。土壤中百菌清殘留量為0012 mg·kg-1，消解率為97.3%，僅有微量的殘留。獼猴桃中百菌清殘留量與消解率相關系數為0984 4，土壤中百菌清殘留量與消解率相關系數為0963 5，均呈較強的正相關關系。

3 結論與討論

（1）對不同的試樣前處理操作進行對比試驗，對各種提取凈化方法，建立了采用氣相色譜法測定獼猴桃和土壤中百菌清的檢測方法，結果表明，該方法提取效率、凈化效果均滿足方法回收率和儀器檢測的要求[4]。

（2）通過對百菌清在獼猴桃和土壤中降解動態研究結果表明，百菌清在獼猴桃中的半衰期為574 d，百菌清在土壤中的半衰期為7.76 d，噴施百菌清后第35 d，獼猴桃中百菌清殘留量低于檢測限0.005（mg·kg-1），表示消解無殘留，為丘陵崗地安全有效噴施殺菌劑提供理論參考。

（3）結合百菌清在獼猴桃中的降解動態檢測結果，為保障獼猴桃食用安全和合理用藥，在正常劑量用藥下，推薦35 d為百菌清在獼猴桃上使用的安全間隔期。

（4）從三峽植物園的試驗來看，獼猴桃果實和土壤百菌清殘留量是較低的，在安全范圍內。下一階段，將擴大百菌清的使用區域，提高檢測水平，降低藥物殘留，確保消費安全仍是亟待解決的重要問題，以提高獼猴桃產品的市場份額。

參 考 文 獻

[1]謝志兵，魯旭東.CPPU對獼猴桃果實生長的影響[J].農業與技術，2003，（3）：6365.

[2] 鐘彩虹，李大衛，龔俊杰，等.湖北省獼猴桃產業發展調查與研究[J].湖北農業科學，2012，（12）：24962501.

[3] 金雁，姚家彪，付海濱，等.氣相色譜法快速測定蔬菜、水果中多種有機磷農藥殘留[J].中國衛生檢驗雜志，2007，（7）：11531154.

[4] 梅文泉，佴注，黎其萬，等.蔬菜中多種有機磷農藥殘留量的氣相色譜測定[J].云南農業大學學報，2005，（1）：107110.

（責任編輯：鄭京津）