MSCs 2種分離培養方法及其培養液中的VEGF、SDF-1α濃度比較*

潘家義，周勝華，黃 峰，白忠樂

(1.貴陽醫學院附屬醫院心內科，貴陽 550004；2.中南大學湘雅二醫院心內科，長沙 410011)

論著·基礎研究

MSCs 2種分離培養方法及其培養液中的VEGF、SDF-1α濃度比較*

潘家義1，周勝華2△，黃 峰2，白忠樂2

(1.貴陽醫學院附屬醫院心內科，貴陽 550004；2.中南大學湘雅二醫院心內科，長沙 410011)

目的 通過2種分離培養方法所得骨髓間充質干細胞(MSCs)的生長特征和微環境中細胞因子的比較，提供一種可以快速、安全、高效地為臨床和實驗提供大量優質MSCs的方法。方法 提取C57BL/c小鼠的骨髓，分別作密度梯度離心法和全骨髓貼壁培養分離法分離培養MSCs，通過流式細胞儀檢測細胞表面CD29+、CD31-、CD34-、CD45-表達水平，并比較各自所得細胞的生長曲線；ELISA檢測培養液中的血管內皮生長因子(VEGF)、SDF-1α濃度并比較二者的差異。結果 與密度梯度離心法比較，全骨髓貼壁分離法所得原代細胞有較快的生長速度，較短的生長周期；培養液中VEGF和SDF-1α濃度也稍高于密度梯度離心法。結論 全骨髓貼壁培養法可以快速、方便、有效地為臨床和實驗提供大量MSCs，所得細胞的培養環境優于密度梯度離心法，減少了對細胞功能的損害。

密度梯度離心法；全骨髓貼壁分離法；骨髓間充質干細胞

骨髓間充質干細胞(mesenchymal stem cells,MSCs)是具有多向分化潛力的非造血干細胞，由于具有低免疫源性和取材方便等特點，成為缺血心臟病干細胞治療的首選干細胞。目前，提取骨髓MSCs方法包括全骨髓貼壁分離法、密度梯度離心法、流式細胞儀和免疫磁珠分離法。后二者由于提取過程中MSCs功能受到很大影響，費用昂貴，很難方便、快速地為臨床提供大量MSCs，因此，全骨髓貼壁分離法、密度梯度離心法才是比較常用的提取方法。……