基于不同納米材料的側流免疫層析技術在真菌毒素檢測中的應用

謝艷君等

摘 要 真菌毒素毒性強，具有很強的致癌性和致畸性，對人體的危害巨大。近年來，其快速檢測技術成為研究的熱點，在“批量檢測”的趨勢下，側流免疫層析技術以具有操作簡便，經濟合理，靈敏快速等優點，廣泛應用于食品、飼料、農產品中真菌毒素的檢測。本文對側流免疫層析檢測技術的研究概況及不同納米材料的側流免疫層析技術在真菌毒素檢測中的應用和發展前景進行綜述，以期為側流免疫層析技術在真菌毒素檢測的未來發展及應用提供參考。

關鍵詞 納米材料； 側流免疫層析； 真菌毒素； 綜述

1 引 言

側流免疫層析檢測技術（LFIA）也稱橫向流動免疫檢測技術[1]，是出現于20世紀60年代初期的一種獨特的免疫分析方式，以條狀纖維層析材料為固相，借助毛細管的吸附作用使樣品在層析材料上移動，其中樣品中的待測物與層析材料上一定區域的抗體結合，通過酶促顯色反應或直接使用著色標記物短時間獲得直觀的測試結果。1990年，Beggs等[2]最先將其用于人絨毛膜促性腺激素（HCG）的測定，隨后該技術逐漸在環境監控[3，4]、食品安全[5，6]、臨床診斷[7，8]等領域得到廣泛應用，同時該技術也用于動物用藥[9，10]、農藥殘留[11，12]、霉菌毒素[13]等污染物以及核酸[14，15]、蛋白[16，17]等生物大分子的檢測領域。

真菌毒素（Mycotoxins）是由真菌產生的次級代謝產物[18]，主要包括黃曲霉毒素（Aflatoxins， AFs）、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（Deoxynivalenol， DON）、赭曲霉毒素A（OchratoxinA， OTA）、玉米赤霉烯酮（Zearalenone， ZEN）、伏馬毒素（Fumonisins， FBs）等，對人和動物的毒性主要有致癌、致畸、致突變、肝細胞毒性、中毒性腎損害、免疫抑制和生殖紊亂等。這些真菌毒素會污染農作物，植物及其副產品等，進而給人類和家畜健康帶來威脅。世界各國對農產品、食品和飼料中的真菌毒素的含量做出了嚴格規定。

目前， 最常見的真菌毒素測定方法有儀器分析法和免疫分析法等。常用儀器分析法主要有高效液相色譜法（HPLC）[19～24]和色譜質譜法[25～29]。儀器分析法作為常規真菌毒素檢測方法[30～32]，因其靈敏度高，結果準確可靠而受到檢測機構的青睞，其缺點是：需要對樣品進行較為繁瑣的預處理；需要具有專業實驗技能的人員操作；儀器昂貴精密，且所用儀器的檢測費用和維修費用昂貴，無法滿足批量樣品的快速篩查檢測[33]。隨著特異性抗體技術的發展，免疫相關方法得以迅速發展，逐漸成為毒素檢測的新趨勢[34]。側流層析免疫檢測技術具有簡便、快速、靈敏、經濟等優點，特別適合于大批量樣本的檢測[35]。本文簡要介紹了側流免疫層析檢測技術，并且列舉出其在真菌毒素快速檢測中的應用進展。

2 側流免疫層析檢測技術

側流免疫層析技術是一種將免疫技術和色譜層析技術相結合的快速免疫分析方法，主要用于病原體，激素，藥物和代謝物等的檢測，原理是通過標記抗原或抗體來識別待檢物。側流免疫層析試紙條主要包括樣品墊、結合墊、層析膜、吸收墊、背襯及應用于試紙條上的各種試劑，見圖1。根據待檢測物分子的大小不同分為兩種主要類型：雙抗體夾心法和競爭法。

3 側流免疫層析技術在真菌毒素檢測中的應用

側流免疫層析是一種將免疫技術、色譜層析技術和免疫標記技術相結合的固相膜免疫分析方法，這種層析技術常常是借助外來的標記物獲得可測量的信號來分析結果。因此，有必要尋求一種高靈敏的免疫標記物，建立準確、快速、簡便的真菌毒素檢測方法。

納米粒子一般是指顆粒尺寸在 1～100 nm 范圍內的超微粒子。它具有表面效應、小尺寸效應、量子效應、宏觀量子隧道效應等特性[38]。與正常粒子相比，納米粒子具有大的比表面積，其光、熱、磁敏感特性和表面穩定性較高。同時，納米材料用于生物分析標記物質，可大大改善標記物的性能，顯著提升現有分析方法的靈敏度及特異性，其在抗原抗體的標記上具有很大的應用潛能。

納米材料的引入為免疫層析技術實現高靈敏，高特異，快速檢測奠定了良好的基礎。采用側流免疫層析技術對真菌毒素進行檢測當中應用最為廣泛的標記物是納米粒子。用于毒素檢測的納米粒子標記物按材料可分為熒光納米粒子、金納米粒子以及磁性納米粒子等。其中熒光納米粒子又包括量子點及其量子點微球、熒光微球以及時間分辨熒光微球等；金納米粒子包括常規膠體金及AgAu復合納米粒子等。以下介紹不同的免疫標記物的側流免疫層析技術在真菌毒素檢測當中的應用，見表1。

3.1 熒光標記免疫層析技術

3.1.1 量子點層析技術 量子點（Quantum dots，QDs）又稱無機半導體納米晶體，是一類由ⅡⅥ族（如CdSe， CdTe， CdS， ZnSe等）或ⅢⅤ族（如InP， InAs等）元素組成的納米顆粒。量子點的粒徑一般介于1～10 nm之間，由于電子和空穴被量子限域，連續的能帶結構變成具有分子特性的分立能級結構，受激后可以發射熒光。其中，CdTe是最重要的納米材料之一，常被用作生物標記探針。

量子點作為一類理想的新型熒光探針，與傳統的熒光染料相比，它具有寬的紫外線激發光譜和狹窄對稱的熒光發射光譜；可精確調諧的發射波長；可忽略的光漂白等優越的熒光特性；良好的光化學穩定性；高量子產率，量子點摩爾吸光系數高達106 L/（mol·cm）；熒光壽命長，可接受多次激發等優越的熒光特性，因此，可以很好地應用于熒光標記。在免疫分析中應用是一個值得引起重視的新領域。

由半導體材料構成的納米熒光顆粒量子點，因其具有更穩定、更強的熒光特性，并可以進行多信號的同時檢測，已有研究者將其用于熒光免疫標記檢測AFB1及ZEN。Ren等[42]制備了一種量子點微球免疫層析試紙條，用于快速檢測玉米中AFB1。通過微乳液技術將數以萬計的CdSe/ZnS量子點包裹在聚合物內形成量子點微球（QBs），標記抗AFB1單克隆抗體（mAbs），將抗原和驢抗鼠IgG二抗分別噴涂于硝酸纖維素膜上作為檢測線和控制線。結果表明，該方法檢測AFB1線性范圍為5～60 pg/mL，檢測熒光強度與AFB1含量在該質量濃度范圍內呈良好的線性關系，半抑制濃度（IC50）（13.87±0.16） pg/mL，檢出限為0.42 pg/mL，檢測時間為15 min，與膠體金標記試紙條相比檢出限低兩個數量級； 將試紙條檢測結果與LCMS/MS及ELISA結果相比，表明試紙條的檢測結果快速、準確。endprint

Duan等[63]建立了量子點微球免疫層析法對ZEN的標準溶液和玉米中ZEN進行檢測，檢出限分別達到0.0625 ng/mL和3.6 mg/kg。表明該方法靈敏、快速，適合食物中ZEN的現場快速檢測。

量子點探針用于層析法，既提高了靈敏度、特異性，又可實現快速、定量檢測，在免疫層析中有廣闊的應用前景和發展潛力。相比膠體金探針，量子點應用的報道較少，其研究剛剛起步，在制備、修飾及抗原抗體標記環節技術要求高，偶聯結合物后的穩定性等方面有待進一步提高。

3.1.2 基于時間分辨熒光免疫分析的層析技術

時間分辨免疫層析快速檢測技術（Timeresolved fluorescent immunochromatographic assay， TRFICA）是集時間分辨熒光免疫分析技術和層析技術的優勢，借助高靈敏的標記示蹤物，用于微量物質檢測的一種新興技術。示蹤物由兩種不同鑭系元素離子（分別作為光吸收子和發射子）及陶瓷顆粒（作為主基質）摻雜組成，這種鑭系螯合物也稱為UCP （Upconverting phosphor， UCP）顆粒，優于免疫層析常用標記物膠體金，它具有較高的靈敏性，高穩定性，可通過時間分辨熒光免疫層析分析儀結合標準濃度曲線實現定量分析。

李靜等[54]將時間分辨熒光技術與免疫層析技術結合起來，建立了時間分辨熒光免疫層析試紙條測定油料餅粕中AFB1的新方法。同時，采用時間分辨熒光速測儀實現了AFB1的定量檢測。將待檢測的樣品加入到裝有Eu3+標記特異性單克隆抗體的樣品瓶中，將噴涂有T線和C線的時間分辨熒光免疫層析試紙條按箭頭向下插入到樣品瓶中，試紙條插入有內置標準曲線的速測儀配套卡槽中，輸出數值即為樣品中AFB1的濃度。T線條帶熒光強度與待測物濃度成反比。使用該試紙條對6種油料餅粕做AFB1添加回收實驗，回收率在70%～120%。在實際樣品的檢測中，該試紙條和液相色譜質譜結果相比，相對誤差低于15%。單個樣品檢測時間不足15 min。說明該試紙條能檢測大批量油料餅粕樣品。

張兆威等[5 8]采用Eu3+包覆于硅膠形成的硅膠熒光微粒作為免疫標記物，將AFB1抗體與乳膠銪進行偶聯標記，建立AFB1時間分辨熒光免疫層析快速檢測法。與已有的膠體金免疫層析快速檢測方法相比，該方法的靈敏度提高了1～2個數量級。該試紙條用于花生、稻米、植物油等農產品檢測，檢出限均為0.3 μg/kg。相對誤差小于10%，說明該試紙條可用于農產品中AFB1快速檢測。

Majdinasab等[66]采用TRFICA法研制出快速檢測OTA的試紙條，檢出限為1.0 μg/kg，檢測時間為8 min。該方法經濟、方便、快速，適合OTA的現場快速檢測。

3.1.3 熒光微球免疫層析法 熒光微球免疫層析技術是利用熒光微球表面修飾的羧基可共價結合抗體，通過該標記物發出穩定而強的熒光信號進行定量檢測的新型檢測技術。該標記物發光強度受激發光強度增強而增強，并且受外界影響小，已有用于毒素檢測的研究。Liu等[61]建立了基于熒光微球探針的免疫層析法，該法可用于快速篩查受AFB1污染的醬油樣品。所制試紙條的檢測探針由熒光微球和抗AFB1的抗體交聯組成，該探針的光學特性消除了醬油樣品的顏色干擾，可視檢出限達到2.5 μg/L，低于我國政府制定的限量標準（5 μg/L）。結果表明，熒光微球作為標記物的免疫層析技術在有色樣品的檢測中有較高的研究價值和前景。Wang等[64]采用熒光微球免疫層析法對玉米中FB1進行定量檢測，加標回收率在91.4%～118.2%。檢測結果與HPLCMS/MS檢測結果相一致。

3.2 膠體金免疫層析技術

3.2.1 金免疫層析法 免疫膠體金技術是以膠體金作為示蹤標記物，應用于抗原抗體反應中的一種新型免疫標記技術。隨著納米技術的興起和單克隆技術的發展，免疫膠體金技術成為繼熒光素標記技術、放射性同位素標記技術和酶標記技術后發展起來的又一種固相標記免疫測定技術，已廣泛用于醫學臨床診斷、動植物檢疫、微生物檢測、食品安全監督等領域。

膠體金粒子對蛋白質具有較強吸附能力，可以與免疫球蛋白、毒素、酶、糖蛋白、抗生素、激素、牛血清白蛋白多肽綴合物等非共價結合。同時，膠體金顆粒具高電子密度特性，即金標物在相應配體處大量聚集，肉眼可見紅色或粉色斑點，因而，目前較多用于定性或半定量的快速免疫檢測方法。膠體金免疫層析試紙條以其簡便快速，成本低廉，結果直觀，檢測時間短，特異性強等優點，廣泛用于AFs、OTA[65]、FBs、DON[67～70]等真菌毒素檢測。

Song等[39]建立了一種可同時定量或半定量檢測谷物樣品中AFB1，ZEA，DON和它們的類似物的側流免疫層析方法。該紙條對AFB1，ZEA和DON可視檢出限分別為0.03， 1.6和10 μg/kg，檢出限均低于歐盟最大允許值。對玉米樣品的檢測結果與液相色譜質譜法相符。

Urusov等[41]改進了傳統的免疫層析方法，采用次級金標抗體提高了免疫層析試紙條對AFB1的檢測靈敏度。先將非標記的黃曲霉毒素專一初級抗體與待測樣品混合，將免疫層析試紙條插入混合液中，加入膠體金標記的次級抗體來結合檢測膜上的復合物。該方法的可視檢出限可達到160 pg/mL，使用Canon Lide 90平板掃描儀及Totallab實驗室軟件包處理，檢出限甚至可達到30 pg/mL，而不加次級抗體的免疫層析檢出限為2 ng/mL。實驗表明，這種處理方法避免了膠體金標記抗體與檢測區抗原的非專一性結合，提高了試紙條檢測的靈敏度。

Moon等[44]采用改良的競爭免疫層析法對AFB1進行檢測，檢出限可達到10 μg/mL，10 min內完成檢測。將有限的AFB1多克隆抗體固定在硝酸纖維素膜上作為檢測區，樣品中待測物和膠體金偶聯AFB1BSA競爭結合檢測區抗體，相比樣品中抗原，偶聯抗原結合受抑制。當遷移通過硝酸纖維素膜時，被固定的有限抗體捕捉，而膠體金標記的AFB1BSA在檢測區與抗體結合呈紅色，待檢物濃度與檢測區呈色成反比。該方法與傳統的膠體金免疫層析試紙條檢測法相比，省去了檢測線，筆者認為此法更為簡便，準確，因此有必要在此方法的基礎上，對抗體和毒素最佳濃度以及膠體金和毒素BSA偶聯物之間的最佳結合條件進行最優化設計，建立多種毒素檢測斑點法。endprint

膠體金免疫層析技術已有半定量和定量研究的報道。Anfossi等[56]制備了定量檢測4種主要黃曲霉毒素的試紙條，該試紙條與電腦相連的便攜掃描儀，軟件處理分析實現分析物定量檢測。檢測樣品為玉米，檢出限為1 μg/kg。以水、NaCl溶液、pH 7.4的磷酸鹽緩沖液（PBS）、磷酸/檸檬酸緩沖液（pH 5.0）等不同提取溶液測定回收率。在含水量在76%～94%的水溶液進行提取有較高的回收率，提取效果好。pH呈中性的提取液有較好的免疫層析效果。因而，選擇pH呈中性的PBS溶液作為提取液，可有效提高方法的準確性。

Lee等[71]建立了一種半定量檢測AFB1的斑點側流免疫層析檢測方法，基于智能手機的閱讀系統（Smartphonebased reading system）實現及時、有效、準確的半定量檢測。該系統由智能手機、側流免疫層析檢測閱讀器和能夠獲得圖像信息并且進行數據處理智能機應用程序組成。該方法的檢出限是5 μg/kg，能夠半定量分析樣品中AFB1濃度范圍為5～1000 μg/kg。

Zhang等[59]制備了一種基于肉眼的半定量免疫層析試紙條（NSIstrip），將標記有金標顆粒的抗黃曲霉毒素單克隆抗體1C11 噴涂于結合墊上，硝酸纖維素膜上依然有兩個區，檢測區和控制區，控制區上固定兔抗鼠二抗，不同于傳統的試紙條，檢測區由3條檢測線組成，它們均固定限量的AFB1BSA偶聯物作為捕獲物，該試紙條的肉眼的檢出限是0.06 ng/mL，3條檢測線的分界閾值分別為0.125，0.5和2.0 ng/mL。因而，可根據3條線顯色情況將檢測物濃度劃分為5個濃度區段：0～0.06 ng/mL，0.06～0.125 ng/mL， 0.125～0.5 ng/mL，0.5～2.0 ng/mL，>2.0 ng/mL，改良的試紙條能夠提供更多毒素含量參照，較好地實現分析物的半定量檢測。

賀亞萍等[72]制備試紙條，采用單光譜成像快速定量技術，對食醋中黃曲霉毒素進行定量檢測。該技術為DT211型黃曲霉毒素單光譜成像速測儀以膠體金免疫層析試紙條為一級傳感器，將記錄的檢測線顯色圖像信息轉化為灰度信息，然后通過計算機等現代處理技術對圖像進行處理和分析，將灰度信息和黃曲霉毒素標準濃度關聯，達到毒素的定量檢測。

膠體金免疫層析法檢測真菌毒素已有較多報道，并有商品化的試紙出售。北京中檢維康技術有限公司推出了iCheck毒素定量快檢卡，此外還配有II型iCheck食品安全定量快檢儀，可實現定量檢測。德國拜發公司推出了RIDA QUICK Aflatoxin免疫層析法黃曲霉毒素檢測條，可用于檢測谷物、豆粕、堅果、開心果、椰子粉、葵花籽、無花果、棗椰子及腰果等樣品中的黃曲霉毒素，檢出限4 μg/kg，檢測時間5 min，還可設定4，10和20 μg/kg等3個檢出限，此外還配有讀卡儀，可實現定量檢測。

3.2.2 復合納米粒子（AgAu）標記免疫層析技術

金包銀納米粒子可放大特異性抗原抗體的反應信號，增強膠體金的顯色效果。Liao等[43]制備了快速檢測AFB1的免疫層析試紙條。合成了AgAu復合納米顆粒并用于AFB1抗體的標記，和金納米顆粒標記抗體技術相比，試紙條靈敏度，重復性和穩定性都相應提高。其原理為利用復合納米粒子標記特異性抗體，檢測樣品液中特異性抗原，應用免疫層析技術制備、組裝成試紙條。所制備的試紙條的檢出限為0.1 ng/mL，檢測時間為15 min。該試紙條用于檢測大米、小麥、向日葵、棉花、辣椒和杏仁中AFB1，檢測結果與ELISA檢測結果一致。

3.3 磁珠免疫層析技術

磁珠免疫層析技術，它是將磁性納米材料（Magnetic nanoparticle，MNs）的磁信號與免疫層析技術相結合的技術。磁納米探針通常由磁性元素（如Fe， Ni， Co）和它們的氧化物組成[73]。該探針具有粒徑小、比表面積大，穿透性強、可快速移動及超順磁性、生物相容性、單分散性良好等特性，可在磁場下定位、富集和分離[74]。此免疫標記物具有靈敏、快捷、高效、檢測范圍寬等優點，應用在免疫層析技術中使該技術向定量化、高靈敏度、多元化檢測、層析系統集成化等方向發展。

4 前景與展望

近年來，隨著納米技術及單克隆抗體技術的成熟，為免疫層析技術真菌毒素的檢測應用注入了新的元素，使得檢測靈敏度和特異性不斷提高，檢出限甚至達到pg水平。側流免疫層析法以其簡便，快速，靈敏及經濟等優點而被越來越多地應用于大量樣品的快速檢測，逐漸顯示出其巨大的發展潛力和廣闊的應用前景。但是，該技術在真菌毒素快速分析應用領域仍存在著一些問題，需要深入研究和開發。目前，主要面臨的問題及發展的趨勢簡述如下：

（1）受檢毒素高效多元檢測 真菌毒素污染范圍較廣，多種真菌毒素常常同時存在于同一種食品或飼料中，且存在多種共存效應，對人類健康和家畜構成嚴重威脅。目前，用于單一種類黃曲霉毒素檢測的免疫層析試紙條較多，研究多種毒素同時檢測的試紙條較少，進一步發揮試紙條快速檢測的主要策略有：采用單膜多元受體，可以在同一膜上實現多種毒素的同時檢測[39，48，50]；利用納米材料（如量子點QDs）特有的量子尺寸效應，如不同粒子尺寸的QDs可以在同一波長被激發，發射出不同波長的光譜。如此，可以同時對毒素分子進行分析；將納米材料和層析方式有效結合在一起，無須質控線直接達到多檢測的目的。采用斑點免疫法和多量子標記不同偶聯抗原應用在檢測區上，與傳統膠體金免疫層析同時檢測多種真菌毒素相比，省去了交聯的檢測線，節約了試紙條的空間。實現多種真菌聯合檢測，不僅可有效節約檢測成本，又可實現快速高效檢測，是今后試紙條研究的方向。

（2）適應檢測基質的復雜性 目前，側流層析檢測技術集中于一些基質較簡單的農產品、食品或飼料，諸如花生、玉米、小麥等的真菌毒素檢測。而在基質較復雜的中藥中的應用較少。本課題組前期研究發現，蓮子、生姜等藥食同源的藥材極易受黃曲霉毒素的污染，而且中藥中除AF以外同樣存在著OTA，DON，FB1等多種真菌毒素的共同污染[75，76]。這些受污染的中藥不僅會對人的健康產生威脅，而且會阻礙中藥現代化進展。在含有多樣，復雜成分的中藥中，如何降低性質迥異的復雜成分對超痕量、劇毒的真菌毒素檢測的影響是免疫層析技術在中藥中檢測應用的棘手問題。有研究表明：樣品的提取采取水溶液而非有機溶劑[56]，可明顯改善毒素的回收率，在提取過程中加入適量的CaCl2[77]，試紙條T線顏色梯度變化，不同濃度加標回收率等參數均有明顯改善，前處理效果明顯；采用TrisHCl對樣品進行稀釋可以減少基質效應及有機溶劑甲醇對檢測的影響[46]，對樣品進行多倍稀釋[72]，樣品稀釋液過Al2O3樣品凈化柱[58]可減少基質效應；在提取過程中劇烈震蕩，提取時間較長，加較多的提取液，通過“不安定理論”可以了解到這些提取條件均會增加不安定系數，增強黃曲霉毒素結合到谷物或使用容器上的結合力，為此，在提取中緩和震蕩，縮短提取時間，加入少量提取液及含吐溫的PB液均可提高黃曲霉毒素回收率，降低基質效應[48]，為在更復雜的中藥基質的檢測奠定基礎，因此，尋找一些更為有效的前處理方法，特異性親和力更高的配體，新型標記納米顆粒在側流免疫層析技術應用于更多復雜基質的中藥中有很深遠的意義，將成為今后研究的重點。endprint

（3）尋找抗原替代品， 實現“綠色化”檢測 真菌毒素為小分子化合物，側流免疫層析檢測法需要將其偶聯大分子蛋白（如牛血清白蛋白）作為競爭抗原，此類競爭抗原有毒害、獲取困難、價格昂貴等問題[78]。近來，噬菌體展示技術來產生模擬表位肽取代抗原，既降低了制備成本，又提升了抗體效能，真正實現無毒無害檢測。Lai等[79]將OTA模擬表位肽用于膠體金免疫層析試紙條，該試紙條檢出限為10 ng/mL。為其它毒素無毒檢測開辟了道路。Wang等[80]篩選出噬菌體展示納米抗體Phage25，將其用作黃曲霉毒素的替代抗原，用ELISA方法證明該抗體具有良好的模擬黃曲霉毒素抗原的生物活性，有望用于側流免疫層析中黃曲霉毒素的替代品，實現黃曲霉毒素綠色免疫分析。

（4）基于適配體層析技術的檢測 側流免疫層析法在真菌毒素檢測中應用主要是抗原抗體法即免疫學方法，但這種方法需要制備特異性抗體，而抗體制備成本較高，時間長；抗體本身具有不穩定性；無法分離交叉反應的物質，受免疫源性等的限制，相比抗體，適配體易于合成和修飾，制備時間短，費用低；較穩定，由溫度引起的變性是可逆的；沒有明顯的免疫源性；可以分離結構相似的或交叉反應的物質[8 1]。Shim等[46]建立了基于適配體的簡便、快速檢測黃曲霉毒素的方法。樣品中AFB1和吲哚二羧菁染料分子（cy5）標記的DNA探針競爭結合生物素修飾的適配子，鏈霉親和素和anticy5的抗體分別固定在試紙條的膜上作為檢測線和質控線，隨后將該試紙條插入到含待測物溶液、適配體和DNA探針的混合液中，存在待測物的樣品，待測物首先結合適配體上。而有cy5染料分子標記的探針結合在殘留位點的適配體上，經ChemiDocTM MP System熒光系統檢測熒光強度，該試紙條的檢出限為0.1 ng/mL，檢測時間只需30 min。

（5）實現半定量和定量檢測 不同的納米材料在檢測真菌毒素中有不同的優缺點，磁珠、熒光素標記物的試紙條在進行定性或定量分析中，需要復雜、大型、或單一的儀器設備，難以滿足基層單位對真菌毒素現場快速檢測。目前，膠體金免疫層析試紙條可直接通過肉眼觀察檢測條帶顏色深淺對檢測結果進行判定，在真菌毒素檢測中應用最為廣泛，但較多試紙條只能定性或半定量，而新型微型化、便攜化、自動化定量檢測儀器研究成為免疫層析檢測領域發展的新趨勢。

總之，隨著納米技術、單克隆抗體及其它分子生物學技術的融合，側流免疫層析技術將會在真菌毒素的檢測方面顯示其巨大的優越性，也將在更為廣闊的領域得到發展和應用。

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