周麗紅,周麗,周莉微
長春生物制品研究所有限責任公司
中藥黃芪抗病毒作用
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中藥黃芪能抑制水泡性口炎病毒(VSV)和單純皰疹I型病毒(HSV-1)。實驗證明不同濃度的黃芪對不同的病毒作用結果不同,VSV病毒的抑制效價高于HSV-1病毒的抑制效價,黃芪的濃度越高,對病毒的抑制效果越好。
中藥黃芪;病毒(VSV,HSV-1);w ish細胞;微量細胞病變法
黃芪可使冠狀血管,腎臟血管擴張,有強心利尿和降血壓作用,能改善皮膚血液循環及營養狀態,使死細胞恢復活力,可用于治療慢性潰瘍,有興奮中樞神經作用,能保護肝臟,防止肝糖原減少,對消除尿蛋白有一定療效。對葡萄球菌,肺炎雙球菌,溶血性鏈球菌志賀氏痢疾桿菌,炭疽桿菌,白喉桿菌等有抗菌作用。本文是研究黃芪對病毒的抑制作用。
黃芪提取液(長春中藥廠提供);水皰性口炎病毒(VSV)(北京病毒所提供);單純皰疹I型病毒(HSV-1)(北京病毒所提供);人羊膜細胞(WISH細胞)(長春生物制品所細胞因子室提供);MEM完全培養液(10%牛血清)(長春生物制品所細胞因子室提供);MEM攻毒培養液(3%牛血清)(長春生物制品所細胞因子室提供);PBS(長春生物制品所細胞因子室提供);消化液(長春生物制品所細胞因子室提供)
2.1 將黃芪液用M E M攻毒培養液分別稀釋為100%80% 40%20%四個濃度的樣品,做倍比稀釋,備用。
2.2 細胞制備
將wish細胞用完全培養液配制成濃度為每1 m l含2.5 X 105-3.5 X 105個細胞的細胞懸液,接種于9 6孔細胞培養板中,每孔加100ul,于37℃5%二氧化碳條件下培養2 4小時形成單層細胞。
2.3 攻毒
48小時,把所有液體倒掉,除細胞對照組每孔加100ul攻毒液,其他各孔加100ul病毒(100CCID50),放35℃5%二氧化碳培養箱,待病毒對照組病變為+++-++++時,細胞對照組為陰性,判定其結果,計算效價。
從表一可見,黃芪的濃度越高抑制病毒(VSV)效價越高,濃度為100%的黃芪對VSV病毒試驗的平均效價為64 IU∕m l,濃度為80%的黃芪對VSV病毒試驗的平均效價為44IU∕ml,濃度40%的黃芪對VSV病毒試驗的平均效價為36IU∕m l,濃度為20%的黃芪對VSV病毒試驗的平均效價為16IU∕ml,濃度越高抑制效價越高,2次實驗結果基本無區別,試驗重復性很好,結果可靠。
從表二可見,濃度為100%的黃芪對(HSV-1)病毒的抑制效價為36 IU∕m l,濃度為80%的黃芪對病毒的抑制效價為30IU∕m l,濃度40%的黃芪對(HSV-1)病毒試驗的平均效價為16IU∕ml,濃度為20%的黃芪對(HSV-1)病毒試驗的平均效價為6IU∕ml,結果明顯。實驗證明黃芪對HSV-1型病毒抑制作用明顯,說明黃芪對病毒有抑制作用。
綜上所訴,黃芪有明顯的抗病毒(VSV,HSV-1)作用。實驗證明不同濃度的黃芪對不同的病毒結果不同,VSV病毒的抑制效價高于HSV-1病毒的抑制效價,可能和病毒的毒力有關,黃芪的濃度越高,對病毒的抑制效果越好。本實驗證明中藥黃芪對V S V病毒及HSV-1病毒具有抑制作用,試驗為預防和治療疾病提供依據。

表二不同濃度黃芪對H S V-1病毒的抑制作用