降壓草的組織培養技術研究

郭福生，陳淑華，王漫，葉雅玲

（1.白城市到保機械林場，吉林 白城 137000；2.白城市林業科學研究院，吉林 白城 137000）

降壓草為菊科三七草屬多年生宿根常綠草本植物，是從東南亞引進的一種稀有天然藥用植物，高25～35cm。該草對高血壓、動脈硬化、腦溢血后遺癥、腦血栓、腦梗死均有特殊療效。降壓草用法簡便，堅持每天當茶（沸水浸泡）飲用，可降低血脂、血黏度等。由于其社會需求量大，且要求高品質，我們采用了組織培養對其進行繁殖。降壓草的培育成功，填補了我國利用天然稀有植物降血壓、降血脂、防治心血管等多種疾病的空白。

1 試驗材料和方法

1.1 試驗材料

選用白城市林業科學研究院選育的降壓草優株2號新品種為試材。

1.2 試驗方法

1.2.1 取材消毒與接種 在春季采剪生長旺盛的嫩枝，沖洗干凈，切成帶腋芽的莖段，用70%的酒精消毒20～30s，無菌水沖洗2次；0.1%的HgCI2消毒6～8min，無菌水沖洗2次，接種于空白培養基。接種時將莖段兩端接觸消毒液的切口剪掉，外植體長3.0～5.0cm，當嫩鞘長至1.5～2.0cm時，轉至附加不同濃度的培養基中，觀察芽的誘導、增殖與生長的規律。

1.2.2 基本培養基選擇 將莖段分別在MS、1／2MS和B5培養基中附加6－BA1.0mgL－1＋NAA0.1mgL－1的培養基中培養30d，觀察不同培養基對誘導外植體分化的影響，確定適宜培養基類型。

1.2.3 愈傷組織的誘導和初代培養 將經消毒的外植體接種于培養基中，在25±2℃條件下培養15 d左右，莖段邊緣切口處出現淡綠色愈傷組織。經10d左右的誘導培養，形成的愈傷組織轉入分化培養基中進行不定芽分化，分化培養20d，可見愈傷組織出現綠色小突起，繼續培養則分化成不定芽。為了解基本培養基、激素組合對腋芽萌發的影響，采用3因素3水平9個處理試驗，每瓶接種外植體1個，多個處理接種12瓶，重復3次。

表1 初代培養誘導叢生芽9處理

2.3 繼代增殖培養基的選擇

通過初代培養基而獲得的無菌苗，叢生芽的數量是有限的，需要繼代培養增殖來擴大繁殖系數。考慮到細胞分裂素和生長素之間可能存在交互作用，為了更準確詳細地研究叢生芽的增殖問題，分別選取不同含量的細胞分裂素和生長素進行誘導分化，選擇采用3因素3水平試驗，觀察降壓草增殖培養結果。

表2 繼代增殖培養誘導分化9處理

2 結果與分析

2.1 降壓草基本培養基的選擇及培養條件

由表3可知，MS培養基褐變率最低，分化率最高，較適合降壓草的快繁。以MS為基本培養基，除特別說明，均附加蔗糖20gL－1，瓊脂8gL－1，pH5.8。培養基在121℃下滅菌25min，培養溫度25℃，光照強度2 000lx，光照12h。

表3 不同培養基對誘導外植體分化的影響

2.2 降壓草愈傷組織的誘導和初代培養

試驗的9個處理中，處理5：MS＋6－BA0.5 mgL－1＋NAA0.1mgL－1＋IAA0.2mgL－1，誘導的叢生芽較粗壯，分生系數較高，最適宜降壓草的叢生芽誘導；處理1－3培養基基本不分生；處理4：MS＋6－BA0.5mgL－1＋IAA0.1mgL－1誘導的叢生芽細，分生系數低；而處理6－9分生系數最高，但芽苗細弱，不適合進一步培養。

2.3 繼代增殖培養

將上一階段誘導培養的叢生芽切成小塊繼代和增殖，降壓草剛增殖時，嫩莖條增加的倍數比較低，幾次繼代后，倍數加大，壯苗增加。不同的6－BA和NAA對繼代增殖的影響效果是不同的。觀察降壓草增殖培養結果，處理6號MS＋6－BA 0.8mg L－1＋NAA0.5mgL－1＋IBA0.1mgL－1的繼代效果最好。

3 結論

3.1 在初代培養階段，以改良的MS培養基適合降壓草外植體誘導分化。適宜的腋芽誘導培養基為MS＋6－BA0.5mgL－1＋NAA0.1mgL－1。

3.2 在繼代與增殖培養階段，以改良的MS作為基本培養基，適宜的增殖培養基為MS＋6－BA1.0 mgL－1＋NAA0.5mgL－1＋IAA0.1mgL－1。利用細胞分裂素可以促進腋芽的快速形成，從而使嫩莖獲得增殖，這是快繁的一個重要途徑。該途徑速率快，繁殖系數高，遺傳性狀穩定。

[1]陳正華.木本植物組織培養及其應用[M].北京：高等教育出版社，1986：12－15

[2]潭文澄.觀賞植物組織培養技術[M].北京：中國林業出版社，1991：21－23

[3]郭福生，陳淑華，王曼，等.文冠果組織培養技術[J].防護林科技，2015（3）：47－48