白介素—33、白介素—37在鼻息肉組織中的表達及意義

薛軍芳++++++柴向斌

[摘要] 目的 探討白介素-33（IL-33）、白介素-37（IL-37）在鼻息肉中的表達及其在鼻息肉中發揮的作用。 方法40例鼻息肉患者的鼻息肉組織及18例鼻中隔偏曲患者的正常鼻黏膜組織為本次研究對象，用免疫組織化學方法分別檢測其中IL-33及IL-37的表達情況。 結果 鼻息肉組IL-33陽性率為65.0%，IL-37陽性率為20.0%。正常鼻黏膜組中IL-33陽性率為33.3%，IL-37陽性率為77.8%。 結論 IL-33、IL37與鼻息肉發病密切相關。

[關鍵詞] 鼻息肉；白介素-33；白介素-37；免疫組織化學

[中圖分類號] R765.25 [文獻標識碼] A [文章編號] 1673-9701（2015）12-0009-03

Expression of IL-33，IL-37 in human nasal polyps and clinical significance

XUE Junfang CHAI Xiangbin

Department of Otolaryngology Head and Neck Surgery，First Clinical Medical College of Shanxi Medical University，Taiyuan 030001，China

[Abstract] Objective To investigate the expression of IL-33，IL-37 in nasal polyps tissue，and their relevance to the pathogenesis of human nasal polyps. Methods Immunohistochemistry was used to detect the expression of IL-33，IL-37， in excisional nasal polyps tissue from 40 patients with nasal polyps. In addition，the expression of IL-33，IL-37 was also detected in normal nasal mucosa from 18 patients with the nasal septum deviation. Results In the nasal polyps tissues，IL-33 positive rate was 65.0%，IL-37 positive rate was 20.0%.In the normal nasal mucosa， IL-33 positive rate was 33.3%，IL-37 positive rate was 77.8%. Conclusion IL-33 and IL-37 play an important role in the pathogenesis of nasal polyps.

[Key words] Nasal polyps； IL-33； IL-37； Immunohistochemical

鼻息肉為鼻科常見病，發病率較高，為感染、非感染性炎癥，解剖異常、免疫異常、遺傳因素等多致病因素導致的疾病實體，其發病機制尚不明確。近來研究表明，許多細胞因子在鼻息肉的發生發展中起重要的作用。IL-33、IL-37為新近發現的隸屬于IL-1家族的新型細胞因子，與許多炎癥性疾病及免疫性疾病密切相關。本研究應用免疫組織化學方法檢測鼻息肉組織及正常鼻黏膜組織中IL-33、IL-37的表達情況，探討此兩種細胞因子在鼻息肉發生中的作用。

1 材料與方法

1.1 材料來源

所取標本均來自2013年10月～ 2014年9月我院住院鼻息肉患者手術標本及鼻中隔偏曲患者正常鼻黏膜標本。所有患者取材前1周內均未使用過任何激素類藥物。所有鼻息肉患者術前均已經過鼻竇CT、鼻內窺鏡的確認，術后所有鼻息肉組織均經病理證實。其中男20例，女20例；年齡15～67歲。另取18例鼻中隔偏曲患者手術時的中鼻甲頭端距上緣3～5 mm 處、2 mm×2 mm大小的黏膜組織作為對照組，其中男 12例，女6例，年齡18～49歲，各組患者均無過敏性鼻炎及其他疾病史。鼻息肉組和正常黏膜組性別、年齡比較均無明顯差異（P>0.05），具有可比性。

1.2試劑與檢測方法

兩組標本以10%的福爾馬林固定 24～48 h，常規石蠟包埋。4 μm 厚切片，兔抗人白介素-33抗體（博奧森，北京）工作濃度為 1∶100，兔抗人白介素-37抗體（博奧森，北京）工作濃度為 1∶200。免疫組化染色試劑盒（博奧森，北京）包括：3%H2O2去離子水、封閉用正常山羊血清工作液、生物素二抗工作液、辣根酶標記鏈霉鏈霉卵白素工作液。DAB顯色，蘇木素襯染，封片，顯微鏡觀察。

1.3結果判斷

IL-33主要表達于上皮細胞和血管內皮細胞的胞核[1]，胞漿也有少量表達，IL-37主要表達于炎癥細胞、上皮細胞的胞漿[2]，胞核也有少量表達，以上兩種因子均以胞核及胞漿中出現棕黃色至深棕黃色顆粒為陽性，分析5 個不同視野染色細胞百分數并計算，陽性表達細胞數在0～25%為“+”，26%～50%為“++”，≥51%為“+++”。

1.4統計學處理

所有數據采用 SPSS17.0 統計學軟件處理，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

IL-33主要表達于細胞核中，在細胞漿中也有少量表達，呈棕黃色和深棕黃色（圖 1、2）。18 例正常鼻黏膜組 6例為陽性（+），陽性表達率為 33.3%，其中5 例為弱陽性（+），1 例為中度陽性（++）。40 例鼻息肉組26 例陽性，陽性表達率為65%，其中 9 例為弱陽性（+），9 例為中度陽性（++），8例為強陽性（+++）。兩組差異具有統計學意義（P<0.05）。見表 1。

IL-37主要表達于細胞漿中，呈棕黃色和深棕黃色（圖3、4）。18 例正常鼻黏膜組14例為陽性（+），陽性表達率為 77.8%，其中8例弱陽性（+），5 例為中度陽性（++），1例強陽性（+++）。40 例鼻息肉組8例陽性，陽性表達率為20.0%，其中 5 例弱陽性（+），2 例中度陽性（++），1例強陽性（+++）。兩組差異具有統計學意義（P<0.01）。見表1。

3 討論

鼻息肉作為一種多因素致病的炎癥性疾病，其發病機制一直沒有統一的認識。目前發現多種細胞因子對鼻息肉的發生有一定作用[3]。近些年來的研究顯示，在鼻腔外側壁有一個不穩定的組織微環境，在某些誘導因子的作用下，能產生、分泌許多不同類型的細胞因子。這些細胞因子不僅可以使血管內皮細胞、上皮細胞、腺細胞和基質細胞增殖，而且可以激活某些細胞和細胞外基質，引起嗜酸性粒細胞、肥大細胞等多種炎性細胞釋放大量炎性介質，導致局部病理改變，最終形成息肉。此次研究表明鼻息肉組織較正常鼻腔黏膜組織中的IL-33表達增高，IL-37表達降低，提示這些因素參與了鼻息肉的發病過程。

白介素-33（IL-33）是2005年發現的一個多功能、風濕性關節炎因子，屬于IL-1家族新成員[4]，它的分子量約18kD，含有270個氨基酸[5]。IL-33常表達于屏障組織細胞，如皮膚、腸、肺等，當這些細胞發生損傷時，全長IL-331-270在胞外可經中性粒細胞絲氨酸蛋白酶、組織蛋白酶G和彈性蛋白酶酶切，產生3種活性形式，分別是IL-3395-270、IL-3399-270和IL-33109-270[6]。由于IL-33的特殊結構，它具有核因子和細胞因子兩個功能，能激活肥大細胞、淋巴細胞和嗜酸性粒細胞產生Th2類細胞因子，在炎癥、感染、自身免疫性疾病中發揮著十分重要的作用。經研究發現，IL-33具有核因子和細胞因子的雙重功能[7]，作為細胞因子它可以參與調節Th2免疫反應，作為核因子可以定位于細胞核內起轉錄抑制作用[8]。IL-33作為一種細胞因子，是在細胞發生損傷時分泌，其促進炎癥發生的生物學活性是由細胞壞死引起的[9]。它可以作為一種危險信號從細胞中釋放，激活肥大細胞和嗜酸或嗜堿性粒細胞等多種炎性細胞釋放炎性介質，并促進幼稚T細胞向Th2細胞轉化，趨化Th2細胞達到病灶，發揮促炎作用[10]。IL-33的信號傳導通路與典型的Th2類細胞因子的傳導通路不同，IL-33是通過與細胞胞膜上的IL-1受體相關蛋白ST2及IL-1受體輔助蛋白組成的異二聚體將信號轉導至細胞內，募集下游的信號分子，來調節 IL-4、IL-5、IL-13等Th2型細胞因子的轉錄和隨后的生物學活性[11]，并且具有前炎癥因子的作用[12]。在對哮喘的研究中發現，在急性本實驗中研究發現鼻息肉組織中白介素-33的表達較正常鼻黏膜高，IL-33可能在鼻息肉的發病過程中發揮促進作用。

IL-37是Kumar等[13]在2000年發現的一種白介素-1家族新成員。人類IL-37基因存在于2號染色體上，結構與IL-1家族相似，可分為5個亞型IL-37a-e，分子量是17-24kD[14-17]。它與其他IL-1家族成員不同，它是一種天然的免疫應答抑制物，并且可以抑制促炎癥因子的產生[2]，在炎癥性疾病中發揮抑制作用[18]。已經有研究證實，IL-37可以與IL-18Rα鏈非競爭性的形成復合體，從而抑制了NF-κB 和 MAPK 等途徑，使得IFN-γ的合成下調，對TLR 后信號傳導和 DC 細胞活性產生抑制作用，但對IL-18本身的活性卻無影響[15]，并且成熟的 IL-37 還可以進入細胞核與 Smad3 結合，形成復合體，通過調節基因轉錄來抑制促炎因子的產生[2]。在本實驗中，我們發現鼻息肉組織中IL-37的表達水平較正常鼻黏膜中的低，表明IL-37可能在鼻息肉的發病過程中起抑制作用。

綜上所述，此次試驗應用免疫組織化學技術在細胞學的水平上依次對IL-33及IL-37在鼻息肉及正常鼻黏膜中的表達進行了定性研究。結果顯示，IL-33在鼻息肉組織中的陽性表達明顯高于正常鼻黏膜，IL-37在鼻息肉組織中的陽性表達明顯低于正常鼻黏膜，差異均具有統計學意義（P<0.05）。說明鼻息肉的發病過程可能與IL-33、IL-37密切相關，IL-33可能在鼻息肉的發病中發揮促進作用，而IL-37則可能發揮抑制作用。因此，本實驗為臨床靶向治療鼻息肉提供用藥指導，為預防鼻息肉的復發提供新理論依據。

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（收稿日期：2015-02-27）