田亞然,薛璟祺,趙家昱,彭 堅(jiān),谷 茂,李永紅*
(1深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院應(yīng)用化學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院,廣東深圳518055;2中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所,北京100081;3河北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,河北保定071001;4四川農(nóng)業(yè)大學(xué)風(fēng)景園林學(xué)院,成都611130)
葉子花脫落酸生物合成關(guān)鍵酶基因NCED的克隆及調(diào)節(jié)開(kāi)花功能初探
田亞然1,3,薛璟祺2,趙家昱1,4,彭 堅(jiān)1,谷 茂1,李永紅1*
(1深圳職業(yè)技術(shù)學(xué)院應(yīng)用化學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院,廣東深圳518055;2中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所,北京100081;3河北農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院,河北保定071001;4四川農(nóng)業(yè)大學(xué)風(fēng)景園林學(xué)院,成都611130)
以葉子花品種‘大紅寶巾’(Bougainvillea glabra‘Mrs Butt’)的2年生扦插苗為試驗(yàn)材料,克隆到了一個(gè)9-順式-環(huán)氧類(lèi)胡蘿卜素雙氧合酶(NCED)同源基因,并分析了內(nèi)源脫落酸(ABA)含量及NCED活性等變化與該基因表達(dá)之間的內(nèi)在聯(lián)系,探討ABA對(duì)促進(jìn)葉子花開(kāi)花的作用機(jī)理。結(jié)果表明:(1)外源50mg·L-1ABA處理促進(jìn)了葉子花開(kāi)花,而與10μmol·L-1的去甲二氫愈創(chuàng)木酸(NDGA,ABA合成抑制劑)共處理可抑制這種效果。(2)外源ABA處理可誘導(dǎo)葉子花葉片中內(nèi)源ABA含量和NCED含量與活性上升,這種誘導(dǎo)可被NDGA抑制。(3)克隆得到的NCED基因全長(zhǎng)為2 380bp,其推定的編碼蛋白包含618個(gè)氨基酸殘基,與草莓中的FvNCED1同源性最高,命名為BgNCED1。(4)Real-time PCR結(jié)果顯示,外源ABA處理顯著誘導(dǎo)BgNCED1基因的表達(dá),而10μmol·L-1的NDGA可顯著抑制BgNCED1基因的誘導(dǎo)效果,這種表達(dá)模式與內(nèi)源ABA含量及NCED活性等的變化趨勢(shì)較為一致。研究認(rèn)為,外源ABA可能通過(guò)誘導(dǎo)BgNCED1的表達(dá),增強(qiáng)內(nèi)源ABA的生物合成,進(jìn)而促進(jìn)葉子花從營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)到生殖生長(zhǎng)的轉(zhuǎn)變,使其提前開(kāi)花。……