白介素-4和免疫球蛋白E含量監測在藥物過敏反應診斷中的應用價值

李志勇，吳楊玲，蔡韶濱

(1.廈門大學附屬第一醫院 檢驗科，福建 廈門 361000；2.廈門大學附屬第一醫院 急診部，福建 廈門 361000；3.漳州衛生職業學院 護理系，福建 漳州 363000)

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白介素-4和免疫球蛋白E含量監測在藥物過敏反應診斷中的應用價值

李志勇1Δ，吳楊玲2，蔡韶濱3

(1.廈門大學附屬第一醫院 檢驗科，福建 廈門 361000；2.廈門大學附屬第一醫院 急診部，福建 廈門 361000；3.漳州衛生職業學院 護理系，福建 漳州 363000)

目的 探究白介素-4和免疫球蛋白E含量監測在藥物過敏反應診斷中的應用價值。方法 采用靜脈注射及常規腹腔注射的方式，將0.9%NaCl、馬血清等相應的藥劑進行致敏，并在不同的時間記錄豚鼠血清中的白介素-4和總免疫球蛋白E指標。結果 注射0.9%NaCl與喘可治注射液，白介素-4和總免疫球蛋白E差異無統計學意義，但在其他藥物致敏d8、d14和d21時，白介素-4和總免疫球蛋白E含量顯著升高，均出現過敏反應。結論 白介素-4和免疫球蛋白E含量指標檢測是診斷藥物過敏的一種有效、快速的方式。

白介素-4；免疫球蛋白E；藥物過敏反應

藥物過敏反應是用藥中最常見的不良反應之一[1]，指有特異體質的患者使用某種藥物后產生的不良反應，又稱變態反應，常表現為皮膚潮紅、發癢、心悸、皮疹、呼吸困難，嚴重者可出現休克或死亡[2]。藥物過敏反應的發生與藥物劑量大小無關,而與人的過敏體質相關[3],即某些人因遺傳因素或特異體質，會對一種或幾種藥物產生過敏反應，當其應用可能導致過敏的藥物時，便可能在短時間或1周內出現藥物過敏反應，輕者會出現藥物熱、藥疹，嚴重者可能引起過敏性休克，不及時搶救會有生命危險。對于藥物過敏診斷的方式進行研究，縮短診斷的實踐，提高診斷的準確性等在臨床具有重要的價值。本研究以經過常規過敏反應檢查法證實能引起過敏的中藥注射劑及生化制劑為例，通過建立連續靜脈注射致敏方法，探討檢測血清中白介素-4(interleukin-4，IL-4)和免疫球蛋白E(immunoglobulin E，IgE)抗體檢測在藥物過敏中的意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 藥劑：清開靈注射液[生產廠家：神威藥業(四川)有限公司；國藥準字Z13020935]、0.9%NaCl(生產廠家：昆明市宇斯藥業有限公司， 08070204)、喘可治注射液(生產廠家：廣州萬正藥業有限公司；國藥準字Z20010172)、香丹注射液(生產廠家：廣東雷允上藥業有限公司；國藥準字Z44022080)、腦蛋白水解物注射液[生產廠家：上海華源藥業(寧夏)沙賽制藥有限公司；國藥準字H20003643]、馬血清(生產廠家：廣州蕊特生物科技有限公司；批號：0903189)、 白介素-4和總免疫球蛋白E測定試劑盒(深圳晶美生物科技有限公司)。

1.1.2 動物：豚鼠，購自上海申旺實驗動物養殖場，合格證號：SCXK(滬)2002-0011。Hartery品系，雄雌各占一半，體質量(290.54±40.41)g，在濕度為50%，溫度為24 ℃下進行飼養。本次試驗操作，均遵循《實驗動物保護條例》。

1.2.3 儀器：美國寶特Bio-Tek E1x808酶標儀，8+1檢測通道光學設計，檢測范圍0.0-4.0OD，波長380～900 nm。

1.2 方法

1.2.1 馬血清引起IL-4和總IgE水平升高及過致敏反應的時效性:選取豚鼠40只，按照攻擊天數的不同分成4組：d7、d8、d9、d10攻擊組，每組10只，雌雄各占一半，各組豚鼠均靜脈注射0.5 mL濃度為10 %的馬血清進行致敏，在第0，1，2天進行注射，共3次。注射后將豚鼠全部取出，取1 mL的足背靜脈血,3000 r/min離心15 min，分離血清，并進行白介素-4和總免疫球蛋白E的測定。

另外隨機選取10只豚鼠，不做處理收取靜脈血，對其白介素-4和總免疫球蛋白E水平進行檢測。此10只豚鼠為對照組。

本次研究的血清存放在零下30 ℃的冰柜中，檢測白介素-4和總免疫球蛋白E水平，所有檢測在一月內完成，操作要按照試劑盒說明書嚴格執行。

1.2.2 靜脈注射藥物致敏反應的時效性:準備好0.9%NaCl，喘可治、腦蛋白水解物、清開靈、香丹注射液，取豚鼠50只，隨機分為5組，每組10只，按照給豚鼠所注冊的藥品的名稱對小組進行命名：0.9%NaCl組，喘可治組、腦蛋白水解物組、清開靈組、香丹組。試品原液分別在當天、第2天和第3天進行靜脈注射，用量為0.5 mL，共注射3次。8天后，抽取1 mL足背靜脈血，對白介素-4和總免疫球蛋白E進行測定。

1.2.3 藥物腹腔注射過敏反應的時效性:取60只豚鼠，隨機分為6組，每組10只，在1.2.2的分組的基礎上，增加了馬血清組。馬血清濃度為10%，分別在d0、d2、d4，對各組豚鼠腹腔注射0.5 mL相應的供試液，進行致敏。在d14、d21時，各組均取出5只豚鼠，抽取足背靜脈血1 mL，測定白介素-4和總免疫球蛋白E水平。

2 結果

2.1 馬血清引起IL-4和總IgE水平升高及過致敏反應的時效性: 對照組豚鼠的白介素-4指標為(91.6±10.9)ng/L，總免疫球蛋白E水平為(42.8±6.5)IU/mL。使用馬血清致敏以后，白介素-4和總免疫球蛋白E水平在d7出現升高現象，到了d8時，上升明顯加快。與對照組的數據相比，采用馬血清致敏組豚鼠的白介素-4和總免疫球蛋白E水平顯著升高(P<0.05)。見表1。

表1 馬血清引起IL-4和IgE含量時效性比較Tab.1 Comparison of chronergy of IL-4 and IgE of house serum(±s)

#P<0.05，與對照組比較，compared with control group

2.2 靜脈注射藥物致敏反應的時效性: 豚鼠進行藥劑致敏第8天以后，0.9%NaCl組豚鼠的血清白介素-4和總免疫球蛋白E水平無異常變化，水平正常、喘可治注射液組的水平正常。香丹注射液組、清開靈注射液組、腦蛋白水解物注射液組豚鼠的血清白介素-4和總免疫球蛋白E水平顯著升高(P<0.05)。見表2。

表2 致敏藥物靜脈注射白介素-4和IgE水平比較Tab.2 Comparison of IL-4 and IgE of sensitization drug injection by vein(±s)

#P<0.05，與0.9%NaCl組比較，compared with saline group

2.3 藥物腹腔注射過敏反應的時效性:豚鼠在隔日進行腹腔注射致敏以后，分別在d14、d21時進行2次攻擊。攻擊時所使用的藥液相同。0.9%NaCl組與喘可治注射組血清白介素-4和總免疫球蛋白E指標無異常變化，處于正常水平。而其他各組在攻擊以后均出現了血清白介素-4和總免疫球蛋白E水平顯著升高。見表3。

表3 致敏藥物腹腔注射白介素-4及總免疫球蛋白E水平比較Tab.3 Comparison of IL-4 and IgE of sensitization drug injection by

#P<0.05，與0.9%NaCl組比較，compared with saline group

3 討論

藥物引起的過敏反應以速發型過敏反應最為常見、危害也最大，現有判斷藥物引起過敏反應的方法主要有直接檢測過敏物質、被動皮膚過敏反應實驗、豚鼠回腸條實驗、豚鼠主動過敏反應檢查法[4-7]等，上述動物實驗方法存在檢驗周期偏長、過敏反應觀察指標不夠客觀等缺陷，不利于迅速得出結論。血漿類胰蛋白酶為類過敏反應和Ⅰ型超敏反應共同的生物標志物，為區別2類反應過敏反應的專屬性生物標志物。其檢測方法主要有2種，分別為皮膚試驗和體外特異性IgE含量測定。Ⅰ型超敏反應需IgE介導，當抗原特異性IgE水平升高時，表明機體極有可能發生Ⅰ型超敏反應。當血漿類胰蛋白酶水平升高卻未見特異性IgE產生，機體則可能發生類過敏反應[8-9]。因此診斷類過敏反應應對機體的血漿組胺、類胰蛋白酶和IgE進行綜合評價。

本次試驗以豚鼠為對象，對過敏原進入機體以后所引起的白介素-4和總免疫球蛋白E水平升高情況進行了研究。結果可以看出，注射馬血清后，血清白介素-4和總免疫球蛋白E水平于d7時開始升高(P<0.05),d8開始急劇升高(P<0.05)，與對照組相比，血清白介素-4和總免疫球蛋白E水平指標差異顯著(P<0.05)。提示連續3 d靜脈致敏后，從d8開始出現明顯的過敏反應。靜脈致敏過敏反應檢查需以d8為準。表2、表3的數據顯示，在d8,d14,d21時，喘可治注射液組與0.9%NaCl組的結果相似，無過敏反應。其他3組均出現了過敏反應，血清白介素-4和總免疫球蛋白E水平均升高(P<0.05)。說明在靜脈致敏后，過敏反應出現的時間與攻擊前指標升高的時間平行。表3的結果與表1和表2的結果一致。本研究結果顯示，血清IL-4和總IgE水平比常規檢查藥物過敏的速度更快，規避了常規方法存在的缺陷，符合藥物過敏反應檢查的需求，本次的研究結果與其他相關研究的結果一致。

本次研究的結果表明，在藥物致敏8天、14天以及21天時，白介素-4和總免疫球蛋白E含量顯著升高。說明白介素-4和免疫球蛋白E含量指標檢測是診斷藥物過敏的一種較為快速的方式。

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(編校：譚玲)

Value of interleukin 4 and immunoglobulin E levels monitoring in diagnosis of drug allergy reaction

LI Zhi-yong1Δ, WU Yang-ling2, CAI Shao-bin3

(1.Department of Clinical Laboratory, The First Affiliated Hospital of Xiamen University, Xiamen 361000, China; 2. Department of Emergency, The First Affiliated Hospital of Xiamen University, Xiamen 361000, China; 3. Department of Nursing, Zhangzhou Health Career Academy, Zhangzhou 363000, China)

ObjectiveTo explore interleukin 4 and immunoglobulin E levels indicators monitoring value in diagnosis of drug allergy reaction.MethodsThe way of intravenous injection and conventional intraperitoneal injection was used, with the corresponding drugs such as saline, horse serum sensitized, and in different time interleukin -4 and total immunoglobulin E index were recorded in guinea pig serum.ResultsInjection of saline and Chuankezhi injection, interleukin-4 and total immunoglobulin E protein content, the difference was not statistically significant, but in other drug induced sensitive D8, D14 and D21, interleukin-4 and total immunoglobulin E protein content increased significantly.ConclusionInterleukin 4 and immunoglobulin E levels index detection is the diagnosis of drug allergy is an effective and fast way.

interleukin 4; immunoglobulin E; drug allergy reaction

李志勇，通信作者，男，本科，副主任技師， 研究方向：免疫學及生物化學，E-mail：Xmlzy_213@163.com。

R917

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1005-1678(2015)11-0030-03