不同品種山葡萄果皮中花色苷種類及含量比較

摘要：以4個品種山葡萄（Vitis amurensis Rupr.）為試驗材料，對比不同品種間果皮花色苷含量的差異。結果表明，總花色苷含量左山一最高，為13.782 mg/g，顯著高于其他3個品種，野生山葡萄最低，為9.361 mg/g；單糖苷含量左紅一最高，為4.945 mg/g，野生山葡萄最低，為1.837 mg/g；雙糖苷含量左山一最高，為11.909 mg/g，左紅一最低，為6.703 mg/g。左山一、雙紅、野生山葡萄、左紅一雙糖苷與單糖苷之比分別為6.35∶1、4.48∶1、4.09∶1、1.35∶1。

關鍵詞：山葡萄（Vitis amurensis Rupr.）； 花色苷；含量比較

中圖分類號：S663.1 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2015）13-3171-03

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.13.026

Comparisons on Anthocyanin Types and Contents of Different Varieties of Vitis amurensis

ZHAO Quan

（Jilin Agricultural Science and Technology College， Jilin 132101， Jilin， China）

Abstract： Taking four Vitis amurensis Rupr. fruits as test materials，the differences of anthocyanins content in fruit skins of different varieties of V. amurensis Rupr. were investigated. Results showed that total anthocyanins content of Zuoshanyi was the highest for 13.782 mg/g，significantly higher than that of other three varieties， the content of wild V. amurensis was the lowest for 9.361 mg/g；The monoglucosides of Zuohongyi was the highest for 4.945 mg/g，the content of wild V. amurensis was the minimum for 1.837 mg/g；The diglucosides content of Zuoshanyi was the highest for 11.909 mg/g， the content of Zuohongyi was the lowest for 6.703 mg/g；The ratio of diglucosides and mono glucosides anthocyanidins for Zuoshangyi， Shuanghong， wild V. amurensis and Zuohongyi were 6.35∶1，4.48∶1，4.09∶1，1.35∶1，respectively.

Key words： Vitis amurensis Rupr.； anthocyanin； comparison of content

山葡萄（Vitis amurensis Rupr.）屬葡萄科葡萄屬植物，具有多酚含量高、含糖量低的特點，主要用于釀酒[1-3]。葡萄按起源中心不同，有歐亞種群、美洲種群和東亞種群，中國東北地區的吉林、遼寧已經大面積種植，同時林區野生藏量豐富[4，5]。

花色苷（Anthocyanins）是類黃酮途徑的一個產物，葡萄中的花色苷分布于果皮、果肉、葡萄子中，果皮中含量最高[6]。花色苷是由花色素和糖形成的糖苷，屬于C6-C3-C6骨架結構。在花色素A環3位上結合一個葡萄糖后形成單糖苷，在3位和5位上分別結合一個葡萄糖形成雙糖苷[5]。前人研究表明山葡萄花色素雙葡萄糖苷所占比例大于單葡萄糖苷[7-9]。目前山葡萄花色苷方面的研究主要集中在色素提取、生物合成調控、抗氧化等方面[10-16]，對于品種間總花色苷、單雙糖苷及五類花色苷的比較研究鮮見報道，特別是對野生資源豐富的山葡萄花色苷和山-歐雜交種花色苷研究報道很少。

為此，以野生山葡萄選育品種左山一、山葡萄和歐洲（簡稱山-歐）雜交種左紅一、山葡萄種間雜交種雙紅3個審定品種和吉林市豐滿區松花湖沿岸野生山葡萄為試驗材料，探討不同品種山葡萄間花色苷種類及含量的差異，以期為山葡萄資源的開發和綜合利用提供借鑒，同時對合理利用野生山葡萄資源和歐亞種葡萄資源提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

供試山葡萄品種為野生山葡萄選育品種左山一、山葡萄和歐洲雜交種左紅一、山葡萄種間雜交種雙紅3個審定品種，以及吉林市豐滿區松花湖沿岸野生山葡萄。采樣時間為2014年9月15日，即東北山葡萄釀酒采收時期。

1.2 方法

山葡萄剝皮后將葡萄皮干燥。稱取1.00 g干葡萄皮粉，加入50 mL 1%（V/V）的鹽酸甲醇溶液，于30 ℃避光提取2 h，重復提取3次，合并提取液，40 ℃旋轉蒸發至干，殘留物用甲醇定容至5 mL，-40 ℃保存待測。本研究花色苷定性建立在中國農業大學葡萄酒研究中心葡萄與葡萄酒花色苷HPLC-MS/MS指紋譜庫的基礎上，通過對樣品HPLC-MS/MS圖譜中質譜信息和保留時間與譜庫比對分析，從而確定各樣品中花色苷的種類與結構。標準品為二甲花翠素-3-葡萄糖苷（Malvidin-3-glucoside）。通過標準曲線計算果皮（干重）中花色苷含量。

總花色苷的測定參照王華等[17]的方法，530 nm處測定吸光度；高效液相色譜條件參考趙權[5]的方法。

2 結果與分析

2.1 不同品種山葡萄花色苷的種類

4個品種山葡萄果皮中共檢測出13種花色苷，色譜信息如圖1。其中，單糖苷7種，雙糖苷6種。7種單糖苷分別為花青素-3-葡萄糖苷（峰7）、甲基花青素-3-葡萄糖苷（峰10）、甲基花青素-3-葡萄糖苷-4-丙酮酸（峰13）、花翠素-3-葡萄糖苷（峰4）、甲基花翠素-3-葡萄糖苷（峰9）、二甲花翠素-3-葡萄糖苷（峰11）、甲基花翠素香豆酰化葡萄糖苷-4-丙酮酸（峰12）；6種雙糖苷分別為花青素-3，5-雙葡萄糖苷（峰2）、甲基花青素-3，5-雙葡萄糖苷（峰6）、花葵素-3，5-雙葡萄糖苷（峰5）、花翠素-3，5-雙葡萄糖苷（峰1）、甲基花翠素-3，5-雙葡萄糖苷（峰3）、二甲花翠素-3，5-雙葡萄糖苷（峰8）。

2.2 不同品種山葡萄皮中單糖苷含量比較

由圖2可以看出，4個品種山葡萄單糖苷含量最高的為左紅一，達4.945 mg/g，其次為雙紅，含量為2.174 mg/g，左山一含量為1.873 mg/g，含量最低的為野生山葡萄，含量為1.837 mg/g。方差分析和多重比較結果表明，山-歐雜交種左紅一與雙紅、左山一、野生山葡萄3個品種間含量差異極顯著；雙紅與左山一和野生山葡萄間含量差異顯著；左山一和野生山葡萄間含量差異不顯著。

2.3 不同品種山葡萄皮中雙糖苷含量比較

由圖3可以看出，4個品種山葡萄雙糖苷含量最高的為左山一，達11.909 mg/g，其次為雙紅，含量為9.753 mg/g，野生山葡萄的含量為7.524 mg/g，左紅一的含量最低，為6.703 mg/g。方差分析和多重比較結果表明，左山一雙糖苷含量與雙紅含量差異顯著；與野生山葡萄和左紅一含量差異極顯著；左紅一和野生山葡萄間含量差異不顯著。

2.4 不同品種山葡萄皮中總花色苷含量比較

釀酒葡萄花色苷含量決定著葡萄酒的色澤和風味，對葡萄酒品質具有重要的影響。由圖4可以看出，4個品種山葡萄果皮中總花色苷含量最高的為左山一，為13.782 mg/g，其次為雙紅，為11.927 mg/g，左紅一含量為11.648 mg/g，含量最低的為野生山葡萄，為9.361 mg/g。通過方差分析和多重比較，左山一作為野生選育品種，與野生山葡萄花色苷含量差異極顯著；左山一與種間雜交種雙紅和山-歐雜交種左紅一間含量差異顯著；雙紅和左紅一間含量差異不顯著。

3 小結

試驗結果表明，總花色苷含量最高的為野生選育的品種左山一，高達13.782 mg/g，顯著高于其他3個品種，野生山葡萄的含量最低，為9.361 mg/g；單糖苷含量最高的為左紅一，達4.945 mg/g，野生山葡萄的含量最低，為1.837 mg/g；雙糖苷含量最高的為左山一，達11.909 mg/g，左紅一的含量最低，為6.703 mg/g。通過試驗結果可以看出，野生選育品種左山一、山葡萄和山葡萄種間雜交種雙紅、山葡萄和歐洲雜交種左紅一這3個生產上已經推廣種植的品種，總花色苷含量高于野生山葡萄，其原因可能是人工栽培品種在施肥、除草、病害防治方面技術比較成熟，而野生山葡萄缺少肥水系統管理以及周圍林木及雜草等危害所致。左山一、雙紅、野生山葡萄雙糖苷與單糖苷之比分別為6.35∶1、4.48∶1、4.09∶1，以雙糖苷為主要成分，而山-歐雜交種左紅一雙糖苷與單糖苷之比為1.35∶1。由此可以看出，山葡萄和歐洲葡萄雜交后，花色苷種類和比例發生了變化，單糖苷所占比例增加，基本達到1∶1，這與段長青等[8]的研究結果相一致。通過明確不同品種山葡萄花色苷的種類和含量，可以釀造不同風味和品質的葡萄酒，對提高東北山葡萄酒的品質和市場競爭力可起到積極作用，同時也可為山葡萄育種提供理論依據和借鑒。

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