青葉綠蘿組培快繁體系的研究

馬艷麗 馮豹

摘 要 以青葉綠蘿頂芽、莖段為材料，通過優化影響不定芽形成的因素。試驗表明，MS+BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L培養基對不定芽的誘導最好，形成的愈傷較少；在1/2MS+ 0.5%活性炭+IBA0.1 mg/L生根培養基上生根最快，根數最多。基于此，為實現綠蘿組培苗工廠化生產提供技術支撐。

關鍵詞 綠蘿；頂芽；莖段；組培快繁

中圖分類號：S682.36 文獻標志碼：B 文章編號：1673-890X（2015）21--02

綠蘿（Epipremnumaureum），屬于天南星科大型常綠藤本植物，生長于熱帶地區，常攀援生長在雨林的巖石和樹干上，其纏繞性強，氣根發達，可以水培種植。近幾年，隨著大氣污染嚴重，青葉綠蘿成為凈化空氣的首選花卉。同時，價格也被大眾所接受，深受市場歡迎。綠蘿多采用扦插繁殖；但是扦插繁殖常受母本及扦插環境限制，阿拉爾地處塔克拉瑪干沙漠南緣，氣候干燥，更不適合扦插繁殖。因此，采用植物組織培養方法可以解決這一難題，以青葉綠蘿頂芽、莖段為外植體，建立青葉綠蘿植物組培養繁體系，提高不定芽增殖量，縮短繁殖時間，提高經濟效益。

1 材料與方法

1.1 外植體的建立

溫室內剪取10～15 cm長青葉綠蘿莖段，去葉片并切成帶一個葉片的莖段。用紗布蘸自來水擦洗表面，再在自來水下沖洗20 min，然后在超凈臺內用75%酒精消毒8 s。將酒精倒掉，用無菌水沖洗4遍。無菌水倒掉后加入1%的次氯酸鈉溶液，使材料被淹沒，放在超聲振蕩器中分別處理8、12、16 min。最后用無菌水沖洗4遍，切成0.5～1.0 cm的莖段，接種到初代培養基上。培養間溫度設置在25 ℃，每天光照16 h。

1.2 不定芽的誘導

將由第一步誘導出的頂芽或腋芽轉至添加了不同激素濃度的誘導培養基上，培養基中激素種類及濃度分別是：BA1.0 mg/L+NAA0.05、BA1.0 mg/L+NAA0.1、BA1.0 mg/L+NAA0.5。所配的培養基均以MS為基礎，添加蔗糖30 g/L，瓊脂7 g/L，pH5.8，121℃高壓滅菌20 min。轉接后分別置于黑暗（報紙遮光）和正常光照兩種不同的光照條件下培養30 d。

1.3 生根培養

當綠蘿試管苗高度達到2～4 cm時，轉至生根培養基中進行誘導生根。生根培養基為1/2MS+0.5%活性炭的基礎培養基，分別添加0.0、0.1、0.5 mg/LIBA。培養條件為先暗培養10 d，后轉至正常光照條件，當根數量達到2根以上、長達3～4 cm時移至溫室煉苗。

1.4 馴化、移栽

溫室馴化7 d，用鑷子取出苗子，將根上培養基洗干凈，800倍多菌靈溶液浸泡5 min，種在基質上，基質成分及比例為草炭：珍珠巖：蛭石比例2∶1∶1，溫度為溫室一般溫度即可，第1周每天上下午各噴水2次，目的事故保證足夠的水分和濕度。同時，避免直射光照射。

2 結果分析

2.1 外植體消毒

消毒12 min效果最好，95%無感染；8 min，細菌和真菌感染率較高；16 min對腋芽傷害較大，成活率較低。

2.2 不同濃度激素對青葉綠蘿不定芽誘導的結果

從表1中可以看出，在誘導培養基中添加1.0 mg/LBA和0.03mg/L的NAA所形成的不定芽效果較好，數量適中、需要的時間短，并且形成的愈傷較少。添加0.01 mg/L的NAA，雖形成不定芽的數量多，但愈傷較多，不定芽較小，不利于試管苗的生根。NAA過高，則更不利于不定芽的形成，形成時間也有多延長。

2.3 光照對青葉綠蘿不定芽形成的影響

實驗發現，將培養間的燈管關閉，組培苗進行7～10 d的暗培養，之后進行正常光照條件培養，同最初在正常光照條件下培養的組培苗所形成的不定芽沒有較大的差異。因此，為了降低成本，可將新繼代增殖的組培苗先暗培養7 d。 （下轉第頁）

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2.4 生根培養基篩選

通過試驗得知，如表2所示，組培苗在1/2MS+IBA0.1 mg/L+0.5%活性炭生根培養基中5 d已有根形成，且根多而壯，效果最好。IBA濃度為0.5 mg/L時形成平均根數也較多，但是生根率及形成根時間較低、較長。

2.5 移栽成活率

經馴化后種植在篩選出適合的基質，草炭∶珍珠巖∶蛭石=2∶1∶1上，青葉綠蘿成活率達到97%以上。

3 結語

在不定芽誘導這個時期，若短時間內獲得大量且質量較好的不定芽，可選組合為BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L。當NAA濃度降低至0.05 mg/L時，不定芽的數量少且不定芽較小。NAA濃度增加至0.5 mg/L時，形成不定芽的時間較長，而且可能會影響不定芽的遺傳穩定性，對保持母本的優良性狀產生影響。

通過本實驗發現，新繼代的綠蘿試管苗在無光照的暗培養狀態培養7 d，與正常光照條件下試管苗增殖情況差異并不明顯。南疆地區成本較大，本著降低成本的目的，可將培養間的燈管關閉，試管苗先暗培養7 d，然后再轉入正常光照，同樣可以達到相同的增殖效果。

雖經過一段時間的馴化，試管苗在移栽后生長仍需要保持較高的濕度，因此濕度一般控制在70%～80%，溫度25℃左右。管理必須到位，每天上下午各噴2次水，這樣成活率可達97%。

（責任編輯：趙中正）