藍耳陰性豬轉(zhuǎn)陽性疫苗免疫試驗

魏恒慧　劉冬梅山東省蒙陰縣畜牧獸醫(yī)局，山東蒙陰276200

藍耳陰性豬轉(zhuǎn)陽性疫苗免疫試驗

魏恒慧劉冬梅
山東省蒙陰縣畜牧獸醫(yī)局，山東蒙陰276200

本研究探索了藍耳陰性種豬分別免疫VR-2332經(jīng)典株和JXA1高致病毒株藍耳疫苗后的抗體水平變化（S/P值）。結(jié)果表明，兩者差異不明顯。同時了解了兩者在統(tǒng)一更換免疫TJM-F92株疫苗后的抗體水平變化。結(jié)果顯示，之前免疫VR-2332毒株的，抗體快速上升；而之前免疫JXA1毒株的，無免疫效果體現(xiàn)。

陰性轉(zhuǎn)陽性；VR-2332株；JXA1株；TJM-F92株

雖然藍耳ELISA抗體檢測的S/P值不能反映疫苗保護力，但對于藍耳疫苗免疫以及疫病檢測仍有一定參考及指導(dǎo)價值。2013年5月筆者所在豬場引入部分藍耳陰性原種后備豬，考慮當(dāng)前國內(nèi)豬場普遍存在藍耳病的大環(huán)境，同時也為了掌握藍耳疫苗免疫后抗體水平變化情況，設(shè)計了藍耳陰性轉(zhuǎn)陽性疫苗免疫試驗，為確定豬場藍耳疫苗的免疫效果，尤其是疫苗毒株的選擇提供參考建議。

1　材料與方法

1.1材料

1）試驗動物。山東泰安某規(guī)模化豬場2013年5月10日從威海賽博迪原種豬場引進12頭藍耳陰性后備豬，平均體重90 kg，其中包括2頭公豬。進豬前提前派人駐場選豬，并于4月5日、4月27日及5月3日分別采血化驗，采用愛德士藍耳抗體檢測試劑盒進行檢測，檢測結(jié)果S/P均為0。

2）疫苗選用。本研究所用疫苗由豬場提供，采用以VR-2332株作為疫苗毒株的某進口疫苗和以JXA1株為疫苗毒株的某國產(chǎn)疫苗，分組進行免疫。

3）檢測試劑與儀器。藍耳病毒抗體檢測試劑盒購自北京愛德士元亨生物科技有限公司，美國IDEXX公司生產(chǎn)。酶標儀采用Thermo MK3。

1.2方法

1）藍耳陰性轉(zhuǎn)陽性試驗。進場后從5月16日開始（當(dāng)天采完血后進行藍耳疫苗免疫試驗），每隔1周采血做抗體檢測，持續(xù)跟蹤藍耳抗體水平變化（表1）。

2）更換不同毒株疫苗試驗。二免過后，隨著抗體呈緩慢下降趨勢，在10月11日時，對2個試驗組均采用以TJM-F92株為疫苗毒株的國產(chǎn)疫苗進行藍耳免疫。每隔1周采血做抗體檢測，持續(xù)跟蹤藍耳抗體水平變化。

3）試驗后備豬臨床觀察。每天觀察試驗后備豬的精神狀態(tài)、食欲、糞便等有無異常。

4）樣品陽性或陰性判斷標準。當(dāng)S/P≤0.4，藍耳抗體陰性（Neg）；S/P＞0.4，抗體陽性（Pos）。

表1　藍耳陰性豬轉(zhuǎn)陽性試驗方案

2　結(jié)果與分析

2.1藍耳陰性轉(zhuǎn)陽性試驗

經(jīng)過抗體檢測、數(shù)據(jù)整理，試驗豬組內(nèi)及組外藍耳抗體水平對比結(jié)果如圖1～3（個別豬某段時間S/P值有缺失），取組內(nèi)豬的S/P平均值來代表當(dāng)時整組的抗體水平。

2個試驗組均在5月16日、6月25日進行藍耳疫苗免疫，從圖1、圖2兩試驗組抗體檢測曲線圖上看，首次免疫后抗體爬升速度較慢，4周后才達到相對統(tǒng)一、穩(wěn)定水平。其次，二次免疫并沒有起到很好的提升抗體水平的作用，S/P值依舊在1.5上下浮動。隨后呈緩慢下降趨勢，在10月10日時臨近陰陽性臨界值。

同時，2個試驗組抗體水平差異不大。雖然圖3中在7月25日-8月22日這段時間免疫B組抗體水平要低于A組，這和B組1663、2064后備豬抗體水平持續(xù)偏低有直接關(guān)系。

2.2更換不同毒株疫苗試驗

通過圖4發(fā)現(xiàn)，之前防疫VR-2332毒株的1周后抗體上升，而之前防疫JXA1毒株疫苗的抗體依然持續(xù)下降，只是在10月31日時出現(xiàn)1次不正常的突升。

圖1　試驗A組各豬只藍耳抗體變化曲線圖

圖2　試驗B組藍耳抗體水平變化曲線圖

圖3　試驗A、B組藍耳抗體水平對比曲線圖

圖4　更換T JM-F 9 2株疫苗后試驗豬藍耳抗體水平曲線圖

2.3試驗豬臨床健康狀況

在整個試驗過程中，包括中間有免疫細小病毒、乙腦、豬瘟等其他疫苗，后備豬的精神狀態(tài)、食欲、糞便等都無異常。而且意外的是，1878、1646、1258、2064、1663在8月初、1663在9月初產(chǎn)仔。按日期推算，這幾頭后備豬在進場時就已配種懷孕（在原場種豬群采用生態(tài)圈飼養(yǎng)，且公母混養(yǎng)）。雖然經(jīng)受長途運輸、定期采血、疫苗免疫等各種應(yīng)激，從產(chǎn)仔及仔豬生長情況來看，還比較正常。

3　結(jié)果與討論

1）在陰性轉(zhuǎn)陽性試驗中，首次免疫后抗體爬升速度很慢，3～4周才有體現(xiàn)。二次免疫沒有體現(xiàn)出抗體提升的效果。當(dāng)然，也可能沒有二次免疫的話，免疫效果更差。

2）在陰性轉(zhuǎn)陽性二次免疫過程中，2個實驗組整體抗體水平差異不大。有一段時間有差異，也是和個別試驗豬“不合群”的抗體表現(xiàn)有直接原因。

3）在兩試驗組同時更換TJM-F92株疫苗進行免疫時，差異非常明顯。理論上JXA1株和TJM-F92株都屬于高致病性藍耳毒株，核苷酸序列同源性很高，但在試驗中并沒有很好的體現(xiàn)，沒有起到免疫記憶效果。而之前免疫VR-2332毒株的，在更換TJM-F92株疫苗免疫后抗體快速上升，確實很意外。

4）就試驗結(jié)果而言，結(jié)合藍耳疫苗免疫安全性的問題（高致病性毒株疫苗安全性差），是否可以考慮采用經(jīng)典毒株VR-2332株代替TJM-F92株的疫苗進行藍耳免疫。至于其他經(jīng)典毒株能否代替TJM-F92株以及VR-2332株能否代替其他高致病性藍耳毒株，本文試驗未涉及，不得而知。

2015-06-05

魏恒慧，女，1978年生，助理獸醫(yī)師。