水產品中孔雀石綠殘留檢測技術分析

蔣翠紅

摘 要 由于孔雀石綠與隱性孔雀石綠具有巨大的危害性，因此，我國將其納入水產養殖的禁用藥物。但由于我國部分水產養殖業戶仍然在使用孔雀石綠，所以快速、準確檢測水產品中的孔雀石綠殘留對于保障人民健康與安全有著重要的作用。基于此，針對水產品中孔雀石綠殘留檢測技術進行探析。

關鍵詞 水產品；孔雀石綠；殘留檢測

中圖分類號：F592.7 文獻標志碼：B 文章編號：1673-890X（2015）24--02

孔雀石綠是一種能夠對人體產生傷害，甚至致癌的物質。其具有高毒性、高殘留以及致癌性等特征。當生物體感染這種物質后，會迅速吸收并且在體內形成危害更大的隱性孔雀石綠，因此，對水產品中的孔雀石綠檢測工作十分重要。

1 孔雀石綠的性質

孔雀石綠（Malachite green，MG），是一種有金屬光澤的深綠色結晶狀固體，易溶于水、甲醇、乙醇中，水溶液為藍綠色，其化學結構見圖1。

圖1 孔雀石綠的結構式

孔雀石綠在環境中存放會產生隱性孔雀石綠。這種化合物質具有高強度的毒性，且殘留水平較高，毒性遠遠高過母體的化合物。經過毒理學實驗證明，隱性孔雀石綠致使各項生化指標的改變明顯高于孔雀石綠。孔雀石綠與隱性孔雀石綠的毒性均與其三苯甲烷類結構有密切聯系。孔雀石綠的代謝產物衍生物以及其他初級、次級代謝產物均具有和致癌芳香胺類似的結構。科學已經證明，這種化合物的分子進入到人體后會經過細胞膜，達到細胞核中的DNA，破壞DNA引發細胞癌變[1]。

2 孔雀石綠的毒性危害

孔雀石綠在使用的時候一般都是使用一定濃度的藥浴或養殖塘潑灑的方法，池塘中潑灑孔雀石綠不僅會對水體造成污染，還會殺死水體中的浮游生物，嚴重影響魚類的健康生長。孔雀石綠與隱性孔雀石綠都會導致魚類的消化道、魚鰓、皮膚輕度炎癥，阻礙腸道酶、胰蛋白酶的作用[2]。孔雀石綠與隱性在孔雀石綠在水體中會分解出大量的鋅元素，使水生動物中毒。同時，會導致魚類血清中鈣元素與蛋白質的含量，嚴重影響魚類的生長。人體獲取孔雀石綠的途徑主要是使用含有孔雀石綠的魚類、蝦類等水產品，在其低濃度的水平下孔雀石綠對有孕生物十分敏感，會導致胎兒畸形。隨著人們大量攝入水產品，水產品中殘留的孔雀石綠會隨著食物鏈進入人體體內，在體內積存，以危害人類健康[3]。

3 水產品中孔雀石綠殘留檢測技術

3.1 高效液相色譜法

3.1.1 高效液相色譜-紫外可見光檢測法

在初期檢測孔雀石綠均為使用PbO2填充的衍生柱來對孔雀石綠以及隱性孔雀石綠進行檢測。所檢測的基本原理為隱性孔雀石綠與孔雀石綠的保留時間不同，隱性孔雀石綠從分析柱脫離后再經過衍生柱，在PbO2的作用下氧化為孔雀石綠，這一通過紫外線檢測器能夠同時對孔雀石綠與隱性孔雀石綠進行檢測。但由于當前PbO2氧化柱填充技術還不夠成熟，質量有待提升，在使用時間變長的情況下會導致氧化效率失準[4]。SC/T3021-2004中高效液相色譜-紫外檢測器、柱后氧化法的提取效率教導，最低檢出限2 μg/kg，檢測需要較多的時間，并且需要使用大量試劑。因此，正相色譜分離、紫外檢測器測定的HPLC法已經逐漸被反相色譜分離與熒光檢測器測定的HPLC法所取代。

3.1.2 高效液相色譜-熒光檢測法

熒光檢測器的反相HPLC法已成了檢測孔雀石綠主要的監測方法。反相HPLC能夠短時間內準確的對孔雀石綠進行檢測，在該實驗中首先將孔雀石綠還原為隱性孔雀石綠，由于隱性孔雀石綠可以發出熒光，因此可以利用這一性質來進行測定。這種檢測方法的靈敏度較高，但無法確定孔雀石綠與隱性孔雀石綠的含量，而是以隱性孔雀石綠的總含量來替代孔雀石綠與隱性的殘留量。相關檢測孔雀石綠與隱性孔雀石綠的報道，在孔雀石綠與隱性孔雀石綠對應的最大吸收波長為620 mm與260 mm處對其兩者的含量進行了檢測，不需要氧化柱輔助[5]。孔雀石綠與隱性孔雀石綠的回收率達到84%～88%以及88%～94%，檢出限為1 μg/kg以及2μg/kg.

3.1.3 超高液相色譜-串聯質譜法

在對水產品中的孔雀石綠檢測愈加嚴格的情況下，超高液相色譜應運而生。超高液相色譜能夠彌補傳統高效液相色譜的缺陷，更短的時間、更高的質量來完成高效液相色譜的監測工作，給用戶節省寶貴的時間。

3.2 免疫學檢測法

酶聯免疫法（ELISA），該方法的基本原理是將酶

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分子與抗體或抗抗體分子實現共價結合，結合產物不會導致抗體的免疫學特征改變，也不會導致酶生物活性發生變化。ELISA不僅僅特異，而且十分敏感。ELISA檢測采用的是間接競爭法，使用酶聯免疫試劑盒來檢測水產品中的孔雀石綠的特點為檢測速度快，一般2～3 h就能夠完成檢測。具有較高的靈敏度，魚蝦中檢測靈敏度高達0.01 μg/kg。這種方式十分適合大量樣品篩選。雖然ELISA發的抗原與抗體結合有較強的選擇性，但是由于水產品的種類十分多樣，因此，使用ELISA檢測出的陽性樣品還要使用其他方法來進行再次確定，并且檢測出總量。因此，當前還酶聯免疫試劑盒檢測孔雀石綠還缺乏相應的數據標準，并且使用ELISA檢測出來的結果還不具有法律效應。

4 結語

快速、準確檢測水產品中的孔雀石綠殘留對于保障人民健康與安全有著重要的作用。然而由于孔雀石綠與隱性孔雀石綠的活性十分強烈，前期處理過程十分復雜，有待進行簡化并且提升回收率。同時，孔雀石綠與隱性孔雀石綠最大的吸收波長分別位于可見光范圍內以及紫外范圍內，因此，這給其兩者同時的檢測帶來了一定的難度。當前，最為合適的檢測方式為高效液相色譜法或液質聯用法。

參考文獻

[1]魏建華，許慨，蔡穎.出口水產品中孔雀石綠殘留風險評價數學模型的建立[J].中國國境衛生檢疫雜志，2012（2）：126-130.

[2]羅曉琴，付軍權，崔廷婷.水產品中孔雀石綠·結晶紫及其代謝物殘留快速檢測試紙條的研制[J].安徽農業科學，2013（11）：5040-5043.

[3]梅光明，郭遠明，陳雪昌.超高效液相色譜-串聯質譜法測定水產品中孔雀石綠和隱色孔雀石綠殘留量[J].理化檢驗：化學分冊，2013（8）：914-917.

[4]史東杰，孫向軍，梁擁軍.水產品中孔雀石綠殘留檢測的ELISA與HPLC法的比較[J].現代漁業信息，2009（4）：11-14，20.

[5]劉名揚，肖珊珊，于兵.水產品中孔雀石綠和結晶紫殘留檢測技術的研究進展[J].食品安全質量檢測學報，2015（1）：35-40.

（責任編輯：趙中正）