無菌原料藥生產管理中無菌工藝驗證的必要性及方法研究

吳桐+高峰+李昊

摘 要：闡述了無菌原料藥生產管理中無菌工藝驗證的必要性，并在此基礎上，對無菌原料藥生產中無菌工藝驗證的方法進行了論述，以期為無菌原料藥生產質量的提升提供參考和借鑒。

關鍵詞：無菌原料藥；無菌工藝；微生物；生物技術

中圖分類號：TQ460 文獻標識碼：A DOI：10.15913/j.cnki.kjycx.2015.19.104

1 無菌工藝驗證的必要性

最新版的《GPM實施指南》對無菌的定義為：不存在活的生物和微生物，FDA將百萬分之一微生物污染率作為滅菌產品無菌的相對標準，這一標準在世界各國得到了廣泛運用。所謂“無菌藥品”，即法定藥品標準中列有無菌檢查項目的原料藥，制造此類藥品需要對可能發生的微生物潛在污染進行嚴格控制，而無菌工藝就是一種盡最大可能減少或消除潛在污染源的生產工藝。為了確保無菌原料藥生產過程中采用無菌工藝的可行性，需要通過相應的方法進行工藝驗證。這一過程被稱為“無菌工藝驗證”，即借助已經形成文件的各類證據，證明生產無菌原料的相關條件和設施，比如人員、材料、設備、方法和環境等符合《GPM實施指南》中的規定要求。原料藥是各類制劑中的有效成分，是生產制劑時不可或缺的重要組成部分，一般為通過植物提取、生物技術制備或是化學合成的具有藥用價值的粉末、結晶等物質。雖然病人無法直接服用原料藥，但作為藥品的主要成分，其是否符合無菌標準直接關系著藥品的質量。因此，在無菌原料藥的生產中，必須驗證無菌工藝。

2 無菌工藝驗證

2.1 無菌原料藥生產的工藝流程

常規的無菌原料藥的生產工藝流程如圖1所示。

2.2 無菌工藝驗證的有效方法

2.2.1 驗證準備

在驗證原料藥的無菌工藝前，需要做好相應的準確工作，具體包括確認生產設施和生產工藝、清洗設備和滅菌等。其中，生產設施應易于消毒和清潔，從而可有效減少污染源，保證無菌生產的順利實施，這是無菌工藝驗證成功與否的關鍵要素。通常情況下，一旦產品暴露在空氣中，則易導致無菌工藝驗證失敗。因此，驗證前需要對產品進行百級層流罩防護，并盡可能避免工作人員接觸生產設備和物料。此外，在正式驗證前，必須對接觸模擬介質的設備表面進行清洗滅菌處理，還要防止滅菌后再次污染。如果生產的藥品具有較強的抗菌性，則該項工作更加重要。如果滅菌不徹底，則極有可能引起模擬介質污染，進而導致驗證失敗。

2.2.2 無菌工藝的驗證方法

無菌工藝的驗證方法分為以下2步：①優選模擬介質和滅菌處理。在無菌工藝的驗證過程中，模擬介質的選擇至關重要。模擬介質應具備的特征包括不存在抑菌作用、有較好的溶解度且不影響培養基的質量、不會對設備造成腐蝕且對人體無害、對環境無污染等。目前，常用的模擬介質主要有PEG4000、乳糖和甘露醇等。選好介質后，應對其進行滅菌處理，因為模擬介質的無菌性會對工藝驗證結果造成較大的影響。如果無法確保介質的無菌性，或是在驗證前介質受到污染，則會對驗證結果的可信性造成影響。因此，在使用模擬介質前，必須進行滅菌處理，可選用的方法為γ射線滅菌。②培養基的選擇和滅菌。通常情況下，可根據微生物選擇培養基。由于在無菌工藝驗證過程中并不清楚系統內微生物的種類，所以，選擇多種培養基進行無菌測試的難度較大。因此，可按照實際的生產工藝和環境選擇適用于絕大多數微生物的培養基。實踐證明，在眾多培養基中，大豆酪蛋白消化物的效果較好，這是因為絕大部分無菌原料藥的生產都需要與空氣接觸，感染厭氧菌的概率相對較小，被感染的微生物以需氧菌或真菌為主，因此，可將大豆酪蛋白消化物作為首選培養基。培養基滅菌也可采用γ射線滅菌，同時，要在滅菌處理之后進行生長促進試驗。以大豆酪蛋白消化物培養基為例，試驗后培養基內應出現較為明顯的所接種微生物生長的現象。

2.2.3 工藝驗證的具體過程

工藝驗證的具體過程分為以下3步：①應對操作規程加以確認，并對相關人員進行培訓，從而確保驗證中的每一項操作都有標準可依、操作人員熟練掌握有關操作流程。當操作規程確認完畢且人員培訓完成后，還應對儀器儀表進行校正，如果儀表不準確，則會導致驗證結果出現偏差，因此，必須保證儀表的準確性。儀表校正應由具備資質的單位進行，且校正過程應符合國家相關標準。②確定工藝條件。無菌原料藥的生產具有設備多、管路長和生產工藝復雜等特點，因此，應按照具體的特點選擇模擬介質，盡可能地減少物料外露，并在開口位置處設置呼吸器或百級層流空氣保護。③合理控制操作時限。無菌原料藥生產中的每一項操作都應在規定的操作時限內完成，這樣能防止經過滅菌的物品再次污染。通常情況下，操作時限越長，污染的概率就越大。因此，在工藝驗證中，要盡可能地將操作時限調整至最長，如果在此時限下驗證結果仍然可靠，則在短于該時限的條件下操作均可行。結果評價應符合相關標準中的要求，制劑的污染水平<0.1%為可接受的標準，但因無菌原料藥生產中的包裝單位相對較大，導致得到的總分裝容器數量較少，進而使抽樣測試結果無法滿足統計學的條件。因此，在驗證過程中，至少連續三批產品全部合格后，才可確定采用的無菌生產工藝符合無菌要求。

3 結束語

綜上所述，由于原料藥是藥品的重要組成部分，因此，必須在無菌原料藥的生產管理中重視無菌工藝的驗證工作，這樣可確保生產出來的原料藥達到無菌標準中的要求，從而保證藥品質量。

參考文獻

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[2]張全鈞.無菌原料藥生產質量與實施GMP的研究[J].中國藥學雜志，2012（12）：102-104.

Study on the Necessity and Method of Validation of Aseptic Process

for Production Management in the Production Management of Sterile APIs

Wu Tong， Gao Feng， Li Hao

Abstract： This paper expounds the necessity of the Validation of aseptic process for production management in the production management of sterile APIs， and discusses the method to verify the Validation of aseptic process for production management in the production of sterile APIs， in order to provide reference and reference for the improvement of the quality of sterile APIs.

Key words： aseptic raw material medicine； aseptic process； microorganism； biological technology

〔編輯：張思楠〕