牛傳染性角膜—結(jié)膜炎的診斷及防控

張輝

牛傳染性角膜-結(jié)膜炎主要是由莫拉氏菌屬莫拉氏亞屬中的牛莫拉氏菌引起的牛急性或慢性傳染病，是一種以流淚、眼瞼腫脹、角膜混濁、潰瘍等為主要特征的眼病。該病在世界各養(yǎng)牛國(guó)家、地區(qū)都有發(fā)生，引起肉用牛體重減輕、乳牛產(chǎn)奶下降、失明等，給養(yǎng)牛業(yè)帶來(lái)巨大經(jīng)濟(jì)損失。

1病原和流行

該病非某一特定病原感染的結(jié)果，可能是多種病原所致，其中被多數(shù)學(xué)者認(rèn)定為主要病原為牛莫拉氏桿菌。

該病主要發(fā)生于炎熱季節(jié)，如夏、秋季。一旦發(fā)病，則迅速傳播，多呈地域性流行。育成牛群發(fā)病率可達(dá)70%～90%，水牛的發(fā)病率相對(duì)較低。反芻動(dòng)物均可發(fā)病，不分性別和年齡均易感，犢牛更易感。病牛或帶菌牛是該病的傳染源。自然條件下，該病的傳播途徑和方式，還不十分明確。同種動(dòng)物可以通過直接或密切接觸而傳染。某些飛蟲可機(jī)械性地傳播此病。在復(fù)愈牛的眼和鼻分泌物中，牛莫拉氏菌可存在數(shù)月。據(jù)獸醫(yī)臨床觀察，牛和羊之間一般不能交互感染。

2臨床癥狀

該病潛伏期為3～7天，病程一般為20～30天。病牛發(fā)病初期表現(xiàn)為眼瞼腫脹、羞明流淚，有疼痛表現(xiàn)，隨著病情的發(fā)展，角膜逐漸凸起，角膜周圍血管因充血而擴(kuò)張，結(jié)膜和瞬膜紅腫。嚴(yán)重者可形成角膜瘢痕及角膜翳。病牛基本不表現(xiàn)出全身癥狀，很少有發(fā)熱表現(xiàn)，但眼球化膿時(shí)則伴有精神沉郁、食欲減退、體溫升高和泌乳量減少等癥狀。

3病理學(xué)診斷

病理剖檢變化。一般可見病牛結(jié)膜浮腫、高度充血，病初為單純性結(jié)膜炎。繼而為角膜化膿性炎癥、潰瘍，角膜增生、增厚，變化多樣，有凹陷型、白斑型、白色混濁型等，形成角膜斑痕和角膜翳。

病理組織學(xué)變化。眼結(jié)膜含有多量淋巴細(xì)胞及漿細(xì)胞。上皮性細(xì)胞間可見嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)。角膜變化：可以觀察到凹陷型上皮剝落，固有層細(xì)胞浸潤(rùn)及壞死；白色混濁型，上皮增生，固有層彌漫性玻璃樣變性；白斑型的固有層局限性膠原纖維增生和纖維化；隆起型時(shí)上皮細(xì)胞壞死伴隨細(xì)菌浸潤(rùn)，固有層纖維化及肉芽組織形成；突出型時(shí)虹膜黏連和細(xì)菌浸潤(rùn)，可見化膿灶或肉芽組織形成。

4病原學(xué)診斷

病料采集和處理。當(dāng)牛發(fā)病初期時(shí)，采取病牛眼結(jié)膜囊內(nèi)分泌物或鼻汁，在無(wú)菌條件下，置于無(wú)菌容器內(nèi)保存，備用。

病原分離。取上述被檢材料，接種于pH值7.5的血液瓊脂培養(yǎng)基上，在33～35'℃下培養(yǎng)24小時(shí)后，可長(zhǎng)成圓形透明的灰色菌落，稍有黏稠性。形成透明的β型溶血或不溶血，溶血的菌落具有致病性，不溶血的菌落致病性差或無(wú)。

動(dòng)物試驗(yàn)。用分離培養(yǎng)出的菌落制成懸濁液，皮下或肌肉注入小鼠體內(nèi)，呈現(xiàn)發(fā)病者為陽(yáng)性。

分離物鑒定。用分離培養(yǎng)出的菌落涂片，染色，干燥后置于顯微鏡下觀察，該菌為革蘭氏陰性球桿菌，菌體一般較小，大小不一，多為1～1.5μm×1.2～2.5μm。在染色過程中常不易被酒精脫色，而有保留結(jié)晶紫的趨向。無(wú)芽孢、無(wú)鞭毛、多數(shù)菌株有莢膜，某些菌株有纖毛。

該菌屬于需氧型菌，生長(zhǎng)條件較為苛刻，適宜生長(zhǎng)的pH值為7.0～7.5，適宜生長(zhǎng)溫度為32～35℃。初分離時(shí)需要加血液、血清或腹水，以后可逐漸適應(yīng)普通培養(yǎng)基，對(duì)干燥敏感，相對(duì)濕度低時(shí)不生長(zhǎng)或生長(zhǎng)不良，因此需在培養(yǎng)箱中放置水盤來(lái)提高濕度。初分離于兔血清瓊脂上24小時(shí)僅見針尖大小菌落，48小時(shí)后始見直徑0.5～1.0mm的菌落，菌落圓潤(rùn)、微凸、無(wú)色或微白色，有時(shí)可出現(xiàn)粉紅色或酪黃色。菌落大小不等。溶血或不溶血，多數(shù)菌落具有黏性，某些菌落可見其邊緣不齊，挑取菌落后局部瓊脂被侵蝕出現(xiàn)凹陷，呈現(xiàn)擴(kuò)散-侵蝕（S-C）型生長(zhǎng)。

生化特性：該菌氧化酶試驗(yàn)為陽(yáng)性，接觸酶試驗(yàn)為陽(yáng)性，大多數(shù)菌株不利用無(wú)機(jī)鹽和枸櫞酸鹽，不分解尿素，不產(chǎn)生硫化氫及前基質(zhì)，不發(fā)酵任何糖類，因此表現(xiàn)出生化能力不活潑的特征。明膠、凝固血清液化，硝酸鹽還原能力隨菌種而異。

5血清學(xué)診斷

血清學(xué)方法可用凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)、補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)、間接血凝反應(yīng)以及免疫熒光抗體技術(shù)等按常規(guī)方法操作進(jìn)行檢驗(yàn)。還有不檢查血清而檢查眼分泌液中和抗體試驗(yàn)。

6防控

發(fā)病后須立即隔離、封鎖，及時(shí)治療，消毒廄舍。夏季滅蠅，避免強(qiáng)烈陽(yáng)光刺激。用牛莫拉氏桿菌制備的疫苗，可刺激牛產(chǎn)生一定的免疫力。