兔波氏桿菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷

邵立巖

兔波氏桿菌病又稱為支氣管敗血波氏桿菌病，引起兔的一種以慢性鼻炎、支氣管肺炎及咽炎為特征的呼吸道傳染病。

1病原學(xué)診斷

1.1細(xì)菌培養(yǎng)

樣品采集：病兔，將滅菌棉拭子在無菌生理鹽水中浸濕，插入病兔鼻腔內(nèi)，深約10mm，小心轉(zhuǎn)動(dòng)，蘸取鼻汁；死亡兔或撲殺致死兔，取鼻腔、氣管、肺部病變材料用于細(xì)菌分離培養(yǎng)。

細(xì)菌分離：將附著在棉拭上的黏液涂抹在麥康凱培養(yǎng)基或DHL培養(yǎng)基上，37℃培養(yǎng)48h。肺部病變材料進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，還可用血液瓊脂培養(yǎng)基。

結(jié)果判定：在改良麥康凱培養(yǎng)基上，支氣管敗血波氏桿菌菌落直徑約1～2mm，圓整、光滑、隆起、透明，略呈茶紅色，較大菌落中心厚，呈茶黃色。在DHL瓊脂平皿上形成無色半透明，2mm左右菌落。

1.2病原鑒定

生化試驗(yàn)：不發(fā)酵碳水化合物，葡萄糖、荒糖、乳糖、甘露醇、果糖木糖呈堿性反應(yīng)。M.R.試驗(yàn)、靛基質(zhì)試驗(yàn)、硫化氫產(chǎn)生陰性，V-P試驗(yàn)、枸櫞酸鹽利用、尿素酶產(chǎn)生、硝酸鹽還原、運(yùn)動(dòng)力試驗(yàn)陽(yáng)性。

動(dòng)物接種試驗(yàn)：常選用幼兔或豚鼠，鼻內(nèi)接種4h培養(yǎng)物0.1mL，應(yīng)在幾天內(nèi)出現(xiàn)鼻炎和肺膿腫的典型癥狀和病理變化。0.5mL劑量耳靜脈接種家兔，應(yīng)于24～48h內(nèi)死亡。從死亡兔的病變組織及撲殺的活兔的肺臟中均可分離到本菌。

血清平板凝集反應(yīng)：在清潔的玻片上加一滴陽(yáng)性血清（約0.3mL），充分混入一鉑圈被檢菌，輕輕晃動(dòng)玻片，室溫下放置2min。液滴中出現(xiàn)大凝集塊或小的粒狀凝集物，液體透明，判為陽(yáng)性。每次試驗(yàn)應(yīng)設(shè)有陰性血清對(duì)照和緩沖生理鹽水對(duì)照。結(jié)果判定：液滴中出現(xiàn)大凝集塊或小的顆粒狀凝集物，液體透明，判為陽(yáng)性。……