乙肝患者HBV感染指標、病毒復制水平與基因分型關系探究

武欣越

【摘要】目的：研究乙肝患者HBV感染指標、病毒復制水平與基因分型的關系。方法：選擇？？例乙型肝炎患者作為研究對象，根據病毒基因分型不同分為B型組和C型組，檢測兩組患者的HBV-DNA載量、ATL和AST含量以及細胞免疫功能。結果：C型組患者的HBV-DNA病毒載量高于B型組，ATL和AST含量高于B型組；外周血中CD4+T細胞含量以及CD4+/CD8+T細胞比值低于B型組。結論：C基因型病毒感染乙肝患者的整體病情比B基因型感染患者嚴重，表現為HBV-DNA載量更高、肝細胞損傷和免疫功能損傷更嚴重。

【關鍵詞】乙型肝炎；基因分型；轉氨酶；T細胞亞群

【中圖分類號】R4 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801（2015）04-0078-02

慢性乙型肝炎是我國最常見的傳染性疾病，由乙型肝炎病毒（HBV）感染造成。近年來有研究認為，HBV-DNA可以分為A-H八種基因型，不同基因型的感染能力不同，感染機體后造成肝細胞損傷的程度也不同[1]。在下列研究中，我們分析了乙肝患者HBV感染指標、病毒復制水平與基因分型的關系。

1、對象與方法

1.1 對象

選擇在我院確診為乙型肝炎的80例患者作為研究對象，所有患者均為首次診斷且未接受抗病毒和免疫治療，設計特異性引物序列并進行PCR擴張，根據結果判斷HBV-DNA的分析，根據分型不同分為B型組和C型組。B型組共45例，包括男性/女性：28/17例，年齡57.79±6.92歲；C型組共35例，包括男性/女性：22/13例，年齡58.11±6.78歲。兩組患者一般資料的比較無差異（P>0.05）。

1.2 方法

1.2.1 檢測樣本采集方法

兩組患者均在清晨空腹狀態下采集外周靜脈血并分為兩份，一份離心后取血清，另一方直接保存為抗凝血。

1.2.2 HBV-DNA載量

采用DNA提取分離試劑盒抽提血清樣本中的乙肝病毒DNA，而后進行PCR擴增，根據擴增曲線計算DNA拷貝數。

1.2.3 轉氨酶含量

采用電化學發光儀檢測血清樣本中丙氨酸氨基轉移酶ALT、天門冬氨酸氨基轉移酶AST的含量。

1.2.4 T細胞亞群

取抗凝血，分別加入CD4、CD8亞群表面標志性物質的單克隆抗體進行孵育，而后在流式細胞儀上檢測并計算不同T細胞亞群所占比例。

1.2.5 統計學方法

采用SPSS19.0軟件對檢測所得數據進行錄入，對兩組間差異進行t檢驗，按照P<0.05判斷組間有差異。

2、結果

2.1 HBV-DNA載量

C型組患者的HBV-DNA拷貝數（4.85±0.56）lgcopies/mL，高于B型組患者的HBV-DNA拷貝數（2.91±0.34）lgcopies/mL，t=7.029、p<0.05。

2.2 轉氨酶含量

C型組患者的ALT（121.23±15.62）U/L、AST（140.94±17.20）U/L，均高于B型組患者的ALT（87.49±10.08）U/L、AST（91.31±11.45）U/L，t值分別為6.884、6.391，p均<0.05。

2.3 T淋巴細胞亞群含量

C型組患者的CD8+T細胞亞群含量（21.45±3.34）%，與B型組患者的CD8+T細胞亞群含量（22.18±3.19）%比較，無顯著差異（P>0.05）。

C型組患者的CD4+T細胞亞群含量（29.24±3.95）%、CD4+/CD8+比例（1.36±0.17），低于B型組患者的CD4+T細胞亞群含量（37.71±4.86）%，CD4+/CD8+比例（1.70±0.21），t值分別為6.019、5.866，p均<0.05。

3、討論

HBV中S基因的全序列與人體全基因組序列保持了高度的一致性，根據S基因序列的差異可以將HBV分為A-H八種不同的基因型，在我國以B型和C型最為常見，北方人群以HBV-C基因型為主，而南方則以HBV-B基因型為主、C基因型也占到一定比例。近年來的研究認識到，不同基因型HBV對機體的感染能力不同，這也是導致乙型肝炎患者病變程度不一致的內在原因[2]。

HBV感染機體后最突出的表現在于病毒DNA自身不斷復制并對正常肝細胞進行攻擊。HBV的自身復制能力越強，體內DNA載量也越高，進而會導致肝細胞損傷加重。因此，檢測HBV-DNA的拷貝數能夠準確反應病毒的感染能力。本研究的分析結果顯示，C型組患者的HBV-DNA病毒載量高于B型組。這就初步提示C基因型HBV在感染肝細胞后的復制能力較強，可能會造成肝細胞更嚴重的損害。

肝細胞內含有豐富的轉氨酶并參與機體內多種物質的代謝，當細胞受到HBV的攻擊后會發生破裂并導致胞漿內的轉氨酶釋放入血。丙氨酸氨基轉移酶ALT、天門冬氨酸氨基轉移酶AST是反應肝細胞損傷程度最常用的兩種轉氨酶。本研究通過分析血清中轉氨酶的含量可知，C型組患者血清ATL和AST含量高于B型組，由此說明C基因型HBV對肝細胞的損傷程度較重，這也與C基因型HBV復制能力較強的結果相吻合。

機體免疫功能是清除HBV的主要機制，其中T細胞所介導的細胞毒效應對于抵抗病毒入侵、清除HBV具有重要作用。CD4+T淋巴細胞是細胞免疫的執行者，能夠分泌多種細胞因子來促進免疫細胞成熟、具有明確的抗病毒作用；CD8+的功能是通過細胞溶解作用來清除病毒，但同時也具有一定的免疫抑制效應。HBV感染會造成免疫功能損傷，本研究分析通過分析免疫功能指標可知，C型組患者外周血中CD4+T細胞含量以及CD4+/CD8+T細胞比值低于B型組，這就說明C基因型HBV感染對機體免疫功能的損傷較大。

綜合以上討論我們總結如下：C基因型病毒感染乙肝患者的整體病情比B基因型感染患者嚴重，表現為HBV-DNA載量更高、肝細胞損傷和免疫功能損傷更嚴重。

參考文獻

[1]林娟娟，張寶華. 慢性乙型肝炎患者感染的病毒基因分型與部分肝功能指標分析[J]. 檢驗醫學與臨床，2014，11（9）：1256-1257.

[2]鐘大妮，李國堅，吳繼周，等. 廣西地區乙肝病毒基因分型與臨床表現及機體免疫功能關系的研究[J]. 中國醫學創新，2013，10（2）：1-3.