shi淺談在肉芽腫性炎癥中抗酸染色病理技術的運用

賴娜 王敏 余波 董星杏 王世鳳 胡志敏 林文毅

【摘要】抗酸染色是病理特殊染色的一個難點，染色質量的好壞很大程度影響了病理醫生能否做出正確的病理診斷，從而直接影響了臨床治療效果。為探討如何提高抗酸染色陽性率，我們回顧性分析了我院近年來肉芽腫性炎癥抗酸染色切片的結果，對抗酸染色技術進行一些改良，提高了抗酸染色的整體陽性率，提高了病理診斷的準確率。

【關鍵詞】抗酸染色；薄切片；肉芽腫性炎癥

【中圖分類號】R-1 【文獻標識碼】B 【文章編號】1671-8801（2015）04-0207-01

抗酸染色技術是利用一些細菌細胞壁脂質含量高，菌體內有分枝菌酸，被著色后而不易洗脫的原理來檢測該類細菌。抗酸染色陽性桿菌涉及諸多菌種，會導致以肉芽腫形成為主要特征的慢性增生性炎癥，如結核、麻風等，臨床主要用于檢測以結核桿菌，臨床上和流行病學中常用查見抗酸桿菌作為結核病診斷的依據[1]。目前抗酸染色是病理特殊染色的一個難點，染色質量的好壞很大程度影響了病理醫生能否做出正確的病理診斷，從而直接影響了臨床治療效果。為我們在分析抗酸染色的特點后，對抗酸染色進行了一些改進，陽性率得到了明顯提高，現將我們的做法介紹如下：

1.組織取材，常規10%福爾馬林液固定、脫水、透明。

2.切片。切1-2μm的薄片，而常規抗酸染色切片厚度約為4μm。

3.烤片及脫蠟。常規抗酸染色對烤片及脫蠟沒有特殊要求，烤片65℃，30分鐘，兩缸生物環保脫蠟液，各10分鐘。在淋巴結及乳腺組織抗酸染色中，我們烤片時間為65℃，2小時，兩缸生物環保脫蠟溶液脫蠟，各20分鐘，這樣組織切片透明度好，切片不容易脫片。

4.初染 用玻片夾夾持涂片標本，滴加石炭酸復紅2-3滴，在火焰高處徐徐加熱，切勿沸騰，出現蒸汽即暫時離開，若染液蒸發減少，應再加染液復染，加熱3-5分鐘，待標本冷卻后用水沖洗。

5.脫色3%鹽酸酒精脫色30秒-1分鐘；用水沖洗。

6.復染用堿性美蘭溶液復染30秒-1分鐘，水洗，用吸水紙吸干后用鏡下觀察。

討論

抗酸染色是一種組織化學顯示分枝桿菌的一種常用方法，抗酸染色陽性的細菌，就是分枝桿菌屬的細菌，包括結核性分枝桿菌、麻風分枝桿菌及非結核性分枝桿菌，廣泛存在于自然界，如土壤、空氣、動物體表及體液中，是條件致病菌。這類分枝桿菌菌體壁上含有不等量的脂質（蠟膜），不易著色。但是能與石炭酸堿性品紅染液結合成復合物，這種復合物著染后即可抵抗酸的脫色作用。抗酸染色查找分枝桿菌的陽性率普遍偏低，對臨床的治療幫助不大。我們改良后的抗酸染色切片，組織透明度好，紅色的抗酸桿菌與藍色的背景對比明顯，在經過三名高年資醫生仔細閱片，抗酸染色陽性率顯著提高，臨床反饋這些病例在經過抗結核治療后腫塊明顯縮小，為各種肉芽腫性炎癥的治療提供了依據。因此，規范操作抗酸染色技術，掌握技術環節重點，保證檢測結果準確，對于肉芽腫性炎癥，特別是結核病的診斷具有重要臨床意義。

參考文獻

[1]馬玙，朱莉珍，潘毓萱.結核病[M].北京：人民衛生出版社，2009：100-104.

[2]秦云.抗酸桿菌檢測的質量保證[J].哈爾濱醫藥，2011，31（5）：362-363.

[3]張楠，張敏，王紅陽，等.支氣管鏡技術在肺結核病診治中的應用進展[J].河北醫藥，2011，31（7）：1057-1059.

[4]趙雁林，姜廣路.中國結核病防治規劃[M].北京：中國協和醫科大學出版社，2009：50.

[5]陳文文，張維，沈況敏，等.恒溫水浴加熱染色法檢測結核分枝桿菌效果分析[J].中外醫療，2011，16（1）：72.

[6]杜建梅.溫度對結核桿菌抗酸染色檢出率的影響[J].青海醫藥雜志，2011，41（5）：52.