基于山梨醇多次同步化處理的惡性瘧原蟲體外培養同步化方法

姚 瑤 張連惠 席玨敏 郭 莉 李 月 王 恒

(中國醫學科學院基礎醫學研究所病原生物學系,北京 100005)

瘧疾是由瘧原蟲引起的危害最嚴重的寄生蟲病，據據2014年WHO 瘧疾報告報道，全世界仍有99個國家和地區，約33億人受到感染瘧疾的威脅。2013年全球有1億9千萬瘧疾報告病例，58.4萬人死亡(Chan, 2014)。能引起人類患病的瘧原蟲種包括惡性瘧原蟲Plasmodiumfalciparum、間日瘧原蟲P.vivax、三日瘧原蟲P.malariae、卵形瘧原蟲P.ovale、諾氏原蟲P.knowlesi五種( Cox-Singhetal., 2008; Barberetal., 2011; Kanteleetal., 2011)。其中惡性瘧原蟲的毒力最強，致死率也最高(Lutyetal., 2000)，因此針對惡性瘧原蟲致病機制的研究具有重要的意義。

惡性瘧原蟲紅內期是從瘧原蟲裂殖子在肝細胞破裂釋放入外周血循環后侵入紅細胞開始的，由于紅內期是導致患者出現臨床癥狀以致威脅生命的階段，因此受到廣泛的重視和研究(Maieretal., 2013)。惡性瘧原蟲在紅內期發育和增殖的一個周期大約為48 h，包括裂殖子期(Merozoite)、環狀體期(Ring Stage)、早期和晚期滋養體期(Trophozoite Stage)以及成熟裂殖體期(Schizont Stage)(Cox, 2010)。在這些發育過程中，惡性瘧原蟲的生長代謝非常活躍，并且與宿主之間在不同發育階段表現出不同的分子間相互作用(Maieretal., 2013)，全面揭示這些分子機制將有助于人類更有效地預防和控制瘧疾。而完成上述研究工作的前提是獲得瘧原在紅細胞各發展階段較為精準的蟲體材料，即實現對在人紅細胞內生長的瘧原蟲進行有效的同步化(Trageretal., 1976)。能否達到此目標，將明顯影響對惡性瘧原蟲生長周期調節機制以及對其精細組學特點的研究質量。

目前常用的瘧原蟲體外培養同……