64例自身免疫性肝病抗體譜檢測(cè)陽(yáng)性患者實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)及其臨床診斷分析

朱娟娟，潘 愷，劉 娜，邢小平，胡志軍，潘曉龍，唐吉斌

(安徽省銅陵市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，安徽銅陵 244002)

自身免疫性肝病(autoimmune liver disease，AILD)是一組自身免疫介導(dǎo)的肝膽系統(tǒng)損傷性疾病［1］，包括自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis，AIH)、原發(fā)性膽汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis，PBC)、原發(fā)性硬化性膽管炎 (primary sclerosing cholangitis，PSC)以及重疊綜合征。目前的診斷主要通過肝功能異常以及自身抗體的檢出，但由于該類疾病起病隱匿，臨床表現(xiàn)復(fù)雜多變，因此診斷較為困難。臨床上常用自身免疫性肝病抗體譜的檢測(cè)作為篩查，但仍需結(jié)合癥狀及其他檢查來(lái)進(jìn)行確診。本文通過回顧性分析了2012年6月至2013年12月在本院進(jìn)行自身免疫性肝病抗體譜檢測(cè)陽(yáng)性的64例患者的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)指標(biāo)，旨在探討ALD患者肝功能和自身特異性抗體的特征，為臨床診斷提供更可靠的根據(jù)。

1 資料和方法

1.1 一般資料 回顧性分析我院2012年6月至2013年12月自身免疫性肝病抗體譜檢測(cè)陽(yáng)性患者64例，最終確診56例，其中AILD 47例，包括AIH 4例，PBC43例，患者中男11例，女36例，年齡25～78歲，中位為年齡56歲。其余9例為非AILD患者，包括糖尿病4例，病毒性肝炎3例，系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者1例，胃惡性腫瘤1例，男4例，女5例，年齡39～71歲，中位年齡為55歲。另外8例由于缺乏典型臨床表現(xiàn)或追蹤丟失而未能最終確診。AIH診斷依據(jù)2010美國(guó)肝病學(xué)會(huì)(AASLD)推薦的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)［2］，PBC診斷依據(jù)2009年AASLD制定的診斷標(biāo)準(zhǔn)［3］。

1.2 檢測(cè)項(xiàng)目及方法 自身抗體檢測(cè)采用德國(guó)歐蒙公司自身免疫性肝病抗體譜檢測(cè)試劑盒(免疫印跡法)，可檢測(cè)抗線粒體AMA-M2亞型抗體、抗M2-3E(BPO)抗體、抗Sp100抗體、抗早幼粒細(xì)胞性白血病(PML)抗體、抗gp210抗體、抗肝腎微粒體-1(LKM-1)抗體、抗肝特異性胞質(zhì)1型(LC-1)抗體、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)抗體、抗Ro-52抗體，嚴(yán)格按照說(shuō)明書步驟操作。生化指標(biāo)檢測(cè)采用寧波美康試劑，日立7600全自動(dòng)生化儀分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 數(shù)據(jù)均采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)或百分比表示，組間資料比較采用χ2檢驗(yàn)(整體+分割檢驗(yàn));正態(tài)分布的計(jì)量資料以(±s)表示，多組間的比較采用單因素方差分析+LSD兩兩比較，偏態(tài)分布計(jì)量資料以M(范圍)表示，組間資料比較采用秩和檢驗(yàn)(整體 +分割檢驗(yàn))，以 P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 自身免疫性肝病抗體譜檢測(cè)結(jié)果 56例確診患者各抗體陽(yáng)性率結(jié)果見表1。經(jīng)三組整體比較得出:抗(AMA)-M2、抗BPO、抗LKM-1和抗LC-1四種抗體在三組人群中的陽(yáng)性率有顯著性差異，χ2分別為 17.414、9.000、12.795 和26.963，P 值分別為 0.000、0.011、0.002 和 0.000，其余抗體陽(yáng)性率在三組間分布差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)合數(shù)據(jù)兩兩組間比較結(jié)果顯示:AIH組抗LKM-1和抗LC-1抗體的陽(yáng)性率高于 PBC 組(χ2為 13.919 和 22.456，P 值均為0.000)，同時(shí)AIH組抗LC-1抗體的陽(yáng)性率也高于非AILD組(χ2為5.318和 22.456，P 值為0.021)，PBC 組中抗(AMA)-M2、抗BPO抗體陽(yáng)性率高于非AILD組(χ2分別為15.620 和7.108，P 值分別為 0.000 和0.008)，其余兩兩組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

2.2 生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果 56例確診患者生化指標(biāo)見表2，用單因素方差及非參數(shù)檢驗(yàn)分析對(duì)三組的總膽紅素(TBil)、直接膽紅素(DBil)、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶(γ-GT)、堿性磷酸酶(ALP)以及總膽汁酸(TBA)進(jìn)行整體比較，結(jié)果顯示僅ALP數(shù)值在三組中具有顯著性差異(P＜0.05)，其他指標(biāo)在每個(gè)組中雖有不同程度的升高，但并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;結(jié)合數(shù)據(jù)對(duì)三組的ALP值進(jìn)行兩兩比較，結(jié)果顯示PBC組顯著高于AIH組及非AILD組(P 值均為 0.000)。

表1 56例確診患者自身免疫性肝病抗體譜檢測(cè)結(jié)果分析/n(%)

表2 56例確診患者生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果分析

3 討論

AILD與自身免疫反應(yīng)有關(guān)，對(duì)于AILD實(shí)驗(yàn)室輔助診斷中最有價(jià)值的是自身抗體的檢測(cè)［4］。因此本文以自身免疫性肝病抗體譜的檢測(cè)陽(yáng)性結(jié)果作為初篩，將64例患者的最終確診情況進(jìn)行分析。AILD中AIH和PBC是發(fā)病率較高的兩類疾病［5－6］，這兩種疾病臨床表現(xiàn)并不典型，容易與病毒性肝炎等混淆，但它們的治療方法卻是完全不一樣的［7］，AIH臨床癥狀不典型，容易與病毒性肝炎混淆，PBC是一種慢性進(jìn)行性膽汁淤積性肝臟疾病，如診斷不及時(shí)容易發(fā)展為膽汁淤積性肝硬化而無(wú)法有效治療。這兩種疾病好發(fā)于中老年女性，本研究中確診為AILD的女性患者為76.6%，中位年齡為56歲。56例確診患者中PBC檢出比例較高(76.8%)，而AIH患者較少，是否存在流行病學(xué)區(qū)域性分布特點(diǎn)有待探討。9例非AILD患者包括糖尿病4例、病毒性肝炎3例、SLE 1例、胃惡性腫瘤1例，目前認(rèn)為這些疾病的發(fā)病原因與自身免疫功能紊亂有關(guān)，因此在抗體譜上也會(huì)呈現(xiàn)陽(yáng)性結(jié)果。

據(jù)報(bào)道AIH的特異性抗體為抗LKM-1抗體、抗LC-1抗體和抗SLA抗體［8］，它們是分別針對(duì)肝腎微粒體、肝細(xì)胞胞漿的抗體，在本研究中AIH組的陽(yáng)性率分別為50%、50%和25%。其中抗LKM-1和抗LC-1抗體的陽(yáng)性率高于PBC組，抗LC-1抗體的陽(yáng)性率也高于非AILD組，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，對(duì)于AIH診斷的意義較大。有報(bào)道指出抗SLA抗體是所有AIH相關(guān)抗體中最有診斷價(jià)值的抗體，其陽(yáng)性預(yù)測(cè)值幾乎為100%，本研究中該抗體在三組中的陽(yáng)性率并無(wú)顯著差異，可能是與PBC組中存在PBC-AIH重疊綜合征有關(guān)［9］，而且非AILD組中1例抗SLA抗體陽(yáng)性為胃惡性腫瘤患者，其機(jī)制有待于進(jìn)一步探究。在生化方面，這幾例AIH患者與其他組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，可能與本組病例較少有關(guān)，也可能與這些病例處于疾病初始階段有關(guān)。

PBC的特異性抗體為抗AMA抗體、抗Sp100、抗gp210抗體與抗PML抗體。AMA尤其抗AMA-M2抗體亞型對(duì)于診斷PBC意義重大，是最具有靈敏度和特異性的抗體，早在患者無(wú)癥狀期即可出現(xiàn)。抗M2-3E(BPO)是以重組BPO(該蛋白包括AMA-M2的3個(gè)抗原位點(diǎn))為靶抗原的抗體。聯(lián)合檢測(cè)抗M2抗體和重組蛋白BPO抗體其靈敏度較單檢測(cè)抗M2抗體要高。在本研究中，抗(AMA)-M2、抗BPO的陽(yáng)性率分別為79.1%、70%，顯著高于其他兩組，對(duì)PBC的診斷具有較高的價(jià)值。近年來(lái)又有報(bào)道指核點(diǎn)型抗體抗Sp100患者雖然靈敏度較低，但與疾病預(yù)后相關(guān)，應(yīng)重視長(zhǎng)期隨訪［10］，本研究中抗Sp100陽(yáng)性率為16.3%，該群患者預(yù)后情況還有待于進(jìn)一步研究。抗gp210抗體對(duì)PBC患者診斷雖然靈敏度不高但特異性較強(qiáng)，尤其是對(duì)抗線粒體抗體陰性的PBC患者有非常強(qiáng)的診斷價(jià)值［11］，本研究表明抗gp210抗體在PBC組有較高的陽(yáng)性率但在三組間的分布并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，可作為篩選指標(biāo)與其它特異性抗體聯(lián)合應(yīng)用。本研究同樣表明抗Ro-52抗體抗體陽(yáng)性率較高(48.8%)，但其作為非特異性抗體僅能作為篩選指標(biāo)。生化方面可以看出該組患者的ALP、GGT、TBA均有明顯升高，但僅有ALP數(shù)值的差異與其他組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

在非AILD組，免疫性指標(biāo)中陽(yáng)性率最高的是抗Ro-52抗體，該抗體在很多自身免疫性疾病中都有出現(xiàn)，特異性不強(qiáng)，而其他抗體陽(yáng)性率很低或僅呈弱陽(yáng)性，生化反應(yīng)并未表現(xiàn)出特定規(guī)律，因此對(duì)于這類疾病可以通過典型臨床表現(xiàn)和其他實(shí)驗(yàn)室檢查進(jìn)行排除。

總之，在臨床中經(jīng)常利用自身免疫性肝病抗體譜的檢測(cè)對(duì)肝臟疾病患者進(jìn)行篩查，充分認(rèn)識(shí)抗體譜中對(duì)診斷有價(jià)值的抗體意義重大，在此基礎(chǔ)上結(jié)合生化指標(biāo)可以提高對(duì)該類疾病的認(rèn)識(shí)，尤其是對(duì)自身免疫性肝病的診斷有非常重要的價(jià)值。

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