E-鈣黏附素在腦膜瘤中的表達(dá)及與腦膜瘤病理學(xué)分級的關(guān)系研究

肖 蘭 胡惠萍（通訊作者）

湖北孝感市中心醫(yī)院病理科 孝感 432000

腦膜瘤為常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤之一，發(fā)病率占顱內(nèi)原發(fā)性腫瘤的13%～26%，生長較為緩慢，臨床癥狀往往輕微，其中僅有少部分表現(xiàn)為惡性特征，具有較強(qiáng)的侵襲性［1］，臨床多數(shù)為良性腫瘤，惡性占總病例數(shù)的2%～10%，雖然為良性腫瘤，即使切除徹底也易出現(xiàn)復(fù)發(fā)，與腫瘤的侵襲力等多種因素密切相關(guān)［2］。腫瘤局部蔓延和轉(zhuǎn)移也是腫瘤細(xì)胞和基質(zhì)成分共同參與的復(fù)雜而有序的過程，腫瘤細(xì)胞黏附異常和細(xì)胞外基質(zhì)降解和惡性腫瘤擴(kuò)散有較為重要的聯(lián)系，鈣離子所依賴的黏附分子由結(jié)構(gòu)功能相似的一系列單鏈跨膜糖蛋白組成，E-鈣黏附素廣泛存在胚胎組織和成熟組織上皮細(xì)胞中，為介導(dǎo)細(xì)胞間同質(zhì)黏附的鈣依賴性跨膜蛋白，E-鈣黏附素和腫瘤細(xì)胞的去黏附有密切關(guān)系，因此參與了腫瘤的生長和轉(zhuǎn)移擴(kuò)散［3-4］。本研究入選近年來就診于我院的腦膜瘤患者，檢測患者腦膜瘤組織E-鈣黏附素的表達(dá)情況，同時對E-鈣黏附素與腦膜瘤病理分級等情況的關(guān)系進(jìn)行分析，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 入選2005-01—2014-01于我院就診的腦膜瘤患者48例為研究對象，均為一般資料、影像學(xué)資料和病理資料齊全的手術(shù)患者。男25例，女23例，年齡40～65歲，平均（46.8±7.2）歲，病程2～5a。根據(jù)世界衛(wèi)生組織腦膜瘤病理分級標(biāo)準(zhǔn)評價［5］：Ⅰ級良性39例，Ⅱ級非典型性5例，Ⅲ級惡性4例。

1.2 方法

1.2.1 臨床評價和分組：侵襲性評價標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)手術(shù)過程中觀察到浸潤和病理證實腫瘤侵襲軟腦膜、硬腦膜和顱骨的情況將入選患者進(jìn)行有無侵襲性分組；瘤周圍水腫評價標(biāo)準(zhǔn)，根據(jù)患者術(shù)前腦CT和MRI結(jié)果確定腫瘤部位、大小、形態(tài)以及周圍水腫情況，在現(xiàn)實最大瘤徑和腫瘤最大水腫的影像學(xué)檢查圖像上按照以下標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行分級［6］：未見明顯水腫，腦溝回消失為0級；水腫帶不足2cm為Ⅰ級；水腫帶≥2cm，而僅限于半球為Ⅱ級；水腫帶跨越半球為Ⅲ級。

1.2.2 實驗方法：采集48例手術(shù)切除的腦膜瘤組織標(biāo)本，進(jìn)行石蠟標(biāo)本連續(xù)切片，4μm／片，置于56℃烤箱進(jìn)行2～4 h烘烤后進(jìn)行蘇木素-伊紅（HE）染色，應(yīng)用免疫組織化學(xué)Elivision法進(jìn)行E-鈣黏附素表達(dá)檢測，對照為試劑盒內(nèi)陽性乳腺癌切片，結(jié)果為陽性；以PBS代替一抗作為空白對照，結(jié)果為陰性。免疫組化判定，將切片放置于光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察，E-鈣黏附素主要表達(dá)于腦膜瘤細(xì)胞的細(xì)胞膜和細(xì)胞漿中，細(xì)胞漿中見棕色或棕黃色顆粒，著色強(qiáng)度高于背景非特異染色為陽性表達(dá)。在高倍視野×400取5個視野，每個視野＞50個細(xì)胞，按照陽性細(xì)胞百分比進(jìn)行半定量分析，根據(jù)染色強(qiáng)度進(jìn)行等級計分并綜合評價［7］：“-”為未見陽性細(xì)胞或陽性細(xì)胞＜5%；“＋”為陽性細(xì)胞5%～＜25%；“＋＋”為陽性細(xì)胞25%～＜50%；“＋＋＋”為陽性細(xì)胞≥50%。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件進(jìn)行分析，計量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用t檢驗；計數(shù)資料以率（%）表示，采用卡方檢驗、F檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

根據(jù)病理學(xué)分級探查不同病理分級E-鈣黏附素表達(dá)情況顯示，Ⅰ級陰性表達(dá)率10.3%，Ⅱ級為60.0%，Ⅲ級為100.0%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），E-鈣黏附素表達(dá)隨病理級別升高而顯著降低；根據(jù)瘤周水腫分級探查不同級別水腫E-鈣黏附素表達(dá)情況顯示，0級陰性表達(dá)率6.7%，Ⅰ級為15.8%，Ⅱ級為62.5%，Ⅲ級為100.0%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），E-鈣黏附素表達(dá)隨瘤周水腫程度加深而顯著降低；根據(jù)有無侵襲力將納入標(biāo)本分為有侵襲力和無侵襲力2組，有侵襲力陰性表達(dá)率為53.8%，無侵襲力為14.3%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；根據(jù)復(fù)發(fā)情況將入選標(biāo)本分為又復(fù)發(fā)和無復(fù)發(fā)2組，復(fù)發(fā)組陰性表達(dá)率為66.7%，無復(fù)發(fā)組為15.4%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表1。

表1 E-鈣黏附素免疫組化表達(dá)與腦膜瘤病理分級、侵襲力、瘤周水腫和復(fù)發(fā)情況的關(guān)系

3 討論

腦膜瘤是神經(jīng)系統(tǒng)較為常見的腫瘤，多數(shù)為良性，僅極少數(shù)為惡性腫瘤，其中4.7%～7.2%的患者表現(xiàn)為非典型性腦膜瘤［8］。腦膜瘤的生長特點由病理類型可以反映出來，腫瘤的級別越高，惡性程度也就越大，復(fù)發(fā)率也就越高，有報道稱腦膜瘤Ⅲ級5a復(fù)發(fā)率高達(dá)50%，而生存率僅為47.2%［9-11］。腦膜瘤癥狀和體征主要包括以下兩個部分：（1）因占位、瘤周圍水腫以及腦脊液循環(huán)受阻所導(dǎo)致的顱內(nèi)壓升高的癥狀；（2）腦組織和神經(jīng)受壓所導(dǎo)致的局灶性癥狀體征，鑒于腦膜瘤發(fā)病位置多樣，其臨床表現(xiàn)也體現(xiàn)了相適應(yīng)的復(fù)雜性，手術(shù)切除腫瘤及其附著硬膜是最為常用的治療手段，臨床一般認(rèn)為其預(yù)后與腫瘤分級和切除疾病存在重要相關(guān)性［12］。腫瘤的發(fā)展和擴(kuò)散是細(xì)胞和基質(zhì)共同參與的復(fù)雜過程，腫瘤細(xì)胞黏附其他腫瘤細(xì)胞、宿主細(xì)胞或細(xì)胞外基質(zhì)成分的能力影響轉(zhuǎn)移和浸潤，因此，黏附在腫瘤的侵襲過程中至關(guān)重要，E-鈣黏附素是與其他黏附素具有相似生理結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能，能夠維持器官正常組織形態(tài)，對于胚胎生長發(fā)育發(fā)揮重要作用的鈣依賴性跨膜蛋白，能夠保證細(xì)胞間、細(xì)胞核細(xì)胞質(zhì)間保持穩(wěn)定聯(lián)系的重要物質(zhì)，是細(xì)胞結(jié)構(gòu)和生理功能保持穩(wěn)定性的重要組成部分［13］。研究證實，E-鈣黏附素陽性表達(dá)的腫瘤細(xì)胞黏附功能較陰性顯著增強(qiáng)，其活性減弱能夠引起細(xì)胞間黏附力顯著下降，國內(nèi)研究顯示，腫瘤侵襲較非侵襲在E-鈣黏附素表達(dá)有所下降或缺失，腦膜瘤細(xì)胞間黏附力減弱，腫瘤細(xì)胞易分散向外浸潤性生長，表達(dá)缺失率高達(dá)28.3%，較正常腦膜組織顯著下降，各級腦膜瘤相比較，表達(dá)隨級別升高而逐漸降低，說明E-鈣黏附素在腦膜瘤發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮重要的作用［14-15］。

本研究結(jié)果顯示，根據(jù)病理學(xué)分級分析不同病理分級E-鈣黏附素表達(dá)情況顯示，E-鈣黏附素表達(dá)隨病理級別升高而顯著降低；根據(jù)瘤周水腫分級探查不同級別水腫E-鈣黏附素表達(dá)情況顯示，E-鈣黏附素表達(dá)隨瘤周水腫程度加深而顯著降低；有侵襲力陰性表達(dá)率明顯高于無侵襲力，復(fù)發(fā)組陰性表達(dá)率明顯高于無復(fù)發(fā)組。提示E-鈣黏附素與腦膜瘤病理分級、瘤周水腫、復(fù)發(fā)和侵襲力有密切關(guān)系，檢測E-鈣黏附素在腦膜瘤組織中的表達(dá)有利于研究腦膜瘤生物學(xué)行為，對判斷疾病發(fā)展和預(yù)后有重要意義。本研究樣本含量較小，尚需大樣本高質(zhì)量研究加以驗證。

［1］武忠弼，楊光華.中華外科病理學(xué)［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2002：2 016-2 025.

［2］劉昆，王敏，韓培軍，等.K-67、環(huán)氧化酶-2和E-鈣黏附素在腦膜瘤中的表達(dá)及臨床意義［J］.中國實用醫(yī)刊，2011，38（7）：25-27.

［3］Delektorskaia V，Perevoshchikov AG，Golovkovd A，et al.Immunohistochemical study of E-cadherin，betacatenin and CD-44v6expression in the cells of primary colon cancer and its metastases［J］.Arkh Patol，2005，64（6）：34-38.

［4］Byrne RR，Shariat SF，Brown R，et al.E-cadherin immunostaining of bladder transitional cell carcinoma，carcinoma in situ and lymph node metastases with long-term follow up［J］.J Urol，2001，165（5）：1 473-1 479.

［5］楊學(xué)軍.解讀《世界衛(wèi)生組織中暑神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤分類（2007）》［J］.中國神經(jīng)精神疾病雜志，2007，33（9）：513-517.

［6］Goldman CK，Bharara S，Palmer CA，et al.Brain edema in meningiomas is associated with increased vascular endothelial growth factor expression［J］.Neurosurgery，1997，40（6）：1 269-1 277.

［7］張健，費昶，衡雪源，等.腦膜瘤級別及其臨床特點［J］.中華神經(jīng)外科雜志，2011，27（12）：1 244-1 246.

［8］Jo K，Park HJ，Nam DH，et al.Treatment of atypical meningioma［J］.J Clin Neurosci，2010，17（11）：1 362-1 366.

［9］趙建平.大腦鐮旁腦膜瘤的顯微外科治療［J］.實用醫(yī)學(xué)雜志，2008，24（14）：2 483-2 484.

［10］Morokoff AP，Zauberman J，Black PM.Surgery for convexity meningiomas［J］.Neurosurgery，2008，63（3）：427-434.

［11］Rosenberg LA，Prayson RA，Lee J，et al.Long-term experience with World Health Organization gradeⅢ（malignant）meningiomas at a single institution［J］.Int J Radiat Oncol Biol Phys，2009，74（2）：427-432.

［12］張道寶，劉艷輝，余水，等.惡性腦膜瘤的診斷與治療［J］.中華神經(jīng)外科雜志，2010，26（9）：784-785.

［13］趙靜，趙杰，王樹偉，等.腦膜瘤中E-鈣黏附素的表達(dá)及臨床意義［J］.廣東醫(yī)學(xué)，2010，31（23）：3 115-3 117.

［14］Zhou K，Wang G，Wang Y，et al.The potential involvement of E-cadherin and beta-catenins in meningioma［J］.PLoS One，2010，5（6）：11 231.

［15］王敏，劉昆，周莉，等.環(huán)氧化酶-2和E-鈣黏附素在腦膜瘤中的表達(dá)及臨床意義［J］.中國臨床實用醫(yī)學(xué)，2010，4（11）：3-5.