豬O型口蹄疫不同廠家疫苗的免疫效果評估

張四化倪楊帆萬 云李 東程莉莉程 敏阮 征*

1.湖北省武漢市動物疫病預防控制中心，武漢 430016；2.湖北省武漢農業檢測中心，武漢 430016；3.湖北省武漢市黃陂區動物疫病預防控制中心，武漢 430300

豬O型口蹄疫不同廠家疫苗的免疫效果評估

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1.湖北省武漢市動物疫病預防控制中心，武漢 430016；2.湖北省武漢農業檢測中心，武漢 430016；3.湖北省武漢市黃陂區動物疫病預防控制中心，武漢 430300

從湖北省強制免疫疫苗品種中選取3個不同廠家的O型口蹄疫疫苗，在同一個豬場選取條件相同的3個未免疫仔豬群體，分別進行2次疫苗免疫，在二次免疫后28 d、58 d進行采血監測，評估不同廠家口蹄疫疫苗的免疫效果。監測結果顯示，免疫合成肽疫苗豬群的抗體合格率明顯優于另外2種疫苗，且群體免疫抗體合格率在長時間能保持在一個較高的水平。疫苗的抗體效價是否與疫苗的保護力呈線性關系還有待進一步研究。

豬；O型口蹄疫疫苗；免疫效果；評估

口蹄疫是當今世界上最為嚴重的家畜傳染病，危害牛、豬、羊等偶蹄類動物，以傳播迅速，感染率高而著稱，國際獸疫局將其列為A類傳染病之首。而豬O型口蹄疫（FMD）是由O型口蹄疫病毒（FMDV）引起的豬的一種急性、熱性、高度接觸性傳染病。除感染豬外，還可感染牛、羊等偶蹄動物。該病傳播迅速，發病率高，是世界動物衛生組織（OIE）規定必須報告的傳染病之一，中國政府規定為一類動物疫病。該病不但引起幼畜死亡，生產性能下降，而且嚴重影響家畜及畜產品流通和貿易活動。

在口蹄疫防控方面，疫苗免疫接種仍是多數國家防控口蹄疫的關鍵措施之一，我國采取的是強制免疫政策。目前市面上的O型口蹄疫種類有很多，疫苗所使用到的毒株也不盡相同，用戶在疫苗的選擇上存在一定的困惑。本試驗旨在按照武漢市2014年各疫苗企業供應的豬O型口蹄疫疫苗品種，針對不同生產廠家的疫苗進行免疫效果監測工作，評估不同廠家豬O型口蹄疫疫苗免疫效果之間的差異，為后續疫苗的選擇和使用提供有力的試驗依據?，F將結果報道如下。

1 試驗情況

1.1 豬場情況

本試驗選擇以武漢市黃陂區棟梁豬場為試驗點。該場目前存欄量為1 700頭，母豬存欄140頭，年出欄量約2 100頭，品種以長大為主。該場地處偏遠，遠離公路，飼養主防控意識較強，免疫檔案清晰，近幾年無重大動物疫病發生，適合作為本試驗要求。本試驗從棟梁豬場中隨機挑選90只35日齡的仔豬，隨機分為3組，每組30只。

1.2 試驗疫苗

D公司豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/GX/09-7株+O/XJ/10-11株），生產批號2014017；E公司蘭州生物藥廠豬口蹄疫O型合成肽（多肽2570+7309），生產批號201312002；F公司豬O型口蹄疫滅活疫苗（0/MYA98/BY/2010株），生產批號H140430J。

1.3 主要試劑

口蹄疫O型抗體液相阻斷ELISA檢測試劑盒，批號2014092301，有效期至20150323，抗原批號2014091601，使用濃度1∶14，購自蘭州獸醫研究所。豬口蹄疫病毒VP1結構蛋白抗體酶聯吸附試驗診斷試劑盒，批號201307004，有效期至20150409，購自上海優耐特生物醫藥有限公司。

表1 不同廠家豬O型口蹄疫疫苗免疫效果監測結果

1.4 試驗方法

1）疫苗免疫及分組。隨機挑選90只35日齡的仔豬，分為3組（A、B、C組），每組30只，分欄飼養。A組于35日齡注射D公司豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/GX/09-7株+O/XJ/10-11株），2 mL/頭；28日后二免，2 mL/頭。B組于35日齡注射E公司豬口蹄疫O型合成肽（多肽2570+7309）疫苗，1 mL/頭；28日后二免，2 mL/頭。C組于35日齡注射F公司豬O型口蹄疫滅活疫苗（0/MYA98/BY/2010株），2 mL/頭；28日后二免，2 mL/頭。

2）監測時間。分別于二免后28 d、58 d對3組進行血清采集，開展免疫效果抗體監測工作。

3）結果判定。O型口蹄疫：液相阻斷ELISA的抗體效價≥26判定為合格；豬口蹄疫病毒VP1結構蛋白抗體ELISA檢測樣品應≥0.23×陽性對照孔平均OD值。

2 不同廠家豬O型口蹄疫疫苗免疫抗體檢測情況

2.1 母源抗體水平

對3組仔豬進行O型口蹄疫抗體水平檢測，抗體合格率為0，說明母源抗體不會對本試驗產生影響（表1）。

2.2 疫苗免疫結果

免疫效果見表1。由表1可以看出，分別注射了3種疫苗的免疫組抗體水平在二免后28 d的效果均為最好。E公司的豬口蹄疫O型合成肽（多肽2570+7309）疫苗的抗體合格率最高，無論在二免后28 d還是二免后58 d一直能保持在100%的合格率；F公司的豬O型口蹄疫滅活疫苗（0/MYA98/BY/2010株）在二免28 d后的合格率為100%，在二免58 d后合格率降至了69%；D公司的豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/GX/09-7株+O/XJ/10-11株）的免疫合格率相對前2種疫苗較低，無論在二免后28 d還是58 d均達不到100%合格率，二免后58 d的合格率甚至低于國家部頒標準。

根據3種疫苗的免疫抗體合格率的變化來看，二免后28 d的免疫抗體效果是最好的。本次試驗結果，從免疫抗體水平來看，E公司合成肽疫苗無論從免疫效力還是免疫持續期等方面均明顯優于另外2種，F公司疫苗次之；而D公司疫苗在二免后28 d免疫合格率無法達到100%，在二免58 d后合格率大幅下降，效果不如另2種疫苗。

3 免疫效果評估分析

口蹄疫的防控工作是我國重大動物疫病防控的重要內容，受各級政府、業務部門的高度重視，我國實行重大動物疫病強制免疫政策，疫苗接種仍是目前預防口蹄疫的有效手段，如何選擇和使用安全有效的疫苗是成功防控口蹄疫的重要條件。

本次所選擇的3種豬O型口蹄疫疫苗是從武漢市2014年各疫苗企業供應的豬O型口蹄疫疫苗品種中選取的使用率較高的疫苗。從試驗結果來看，合成肽疫苗的抗體合格率明顯優于另外2種疫苗。合成肽疫苗的制作工藝不同于另外2種疫苗，該疫苗是針對病毒最重要的抗原位點設計，其具備幾個較明顯的優勢。首先，其制作的工藝決定了該疫苗沒有明顯的免疫副反應。該疫苗也被驗證對斷奶仔豬和妊娠母豬都具有良好的安全性。并且該疫苗特異性強，能誘發有效的免疫應答，其有效抗原非常穩定，免疫持續期長，抗體合格率在長時間能保持在一個較高的水平。同時，相比滅活疫苗，合成肽疫苗在生產過程中抗原能夠準確定量，注射1 mL可以保證動物體產生堅強的保護力，接種劑量相比滅活苗接種劑量更小。

雖然豬O型口蹄疫合成肽疫苗克服了滅活疫苗的一些缺陷，具有滅活疫苗不可比擬的優點。但是在實際生產中，許多飼養主并沒有優先選擇合成肽疫苗。分析原因認為，也同樣是因為合成肽疫苗的制作工藝，會存在一些不足，比如缺乏天然蛋白質的三維結構，分子質量小，無法獲得足夠的免疫原性，很難如蛋白質抗原那樣誘導機體的多種免疫反應，且肽疫苗的半衰期短，同時缺乏足夠多的B細胞抗原表位的刺激，B細胞和T細胞抗原表位很難發揮協同作用。其免疫抗體水平雖然很高，但是在面對病毒時，其保護率并不是與其免疫抗體水平成線性上升關系?？赡芷淇贵w合格率均為100%，但是其保護率卻不高。合成肽疫苗與滅活苗的保護率水平的比較還需要做進一步的試驗來探討。

4 結 論

本試驗比較了3種不同的豬O型口蹄疫疫苗，從抗體合格率來看，E公司豬口蹄疫O型合成肽（多肽2570+7309）疫苗免疫效果最好，F公司豬O型口蹄疫滅活疫苗（0/MYA98/BY/2010株）疫苗次之，D公司豬口蹄疫O型滅活疫苗（O/GX/09-7株+O/XJ/10-11株）第三。但是疫苗的使用受到各方面因素的影響，對于疫苗的抗體效價是否與疫苗的保護力呈線性關系還有待研究。如何選擇好的豬O型口蹄疫疫苗，還需要做進一步保護力試驗來驗證。

5 建 議

本試驗數據在一定程度上反映了不同疫苗廠家豬O型口蹄疫疫苗的不同免疫效果，但是由于疫苗在使用過程中受到多方面的影響，本試驗數據還不足以確認選擇使用哪種疫苗會達到最好的保護力。建議設計更有針對性、更加細致的試驗來探索如何選擇疫苗，如擴大試驗規模、檢測疫苗抗原濃度、增加抗體檢測密度及在有條件的單位進行保護力試驗以確認疫苗的優劣。

2015-08-14

*通訊作者

張四化，男，1981年生，碩士，獸醫師。