維藥榅桲多糖抗血栓作用及其機制研究

維藥榅桲多糖抗血栓作用及其機制研究

美合日阿依·伊薩克，馬虎，周文婷，艾尼瓦爾·吾買爾

(新疆醫科大學基礎醫學院藥理學教研室，新疆 烏魯木齊830011)

Anti-thrombotic effect of polysaccharide ofCydoniaoblongaMill and its mechamism

ISAK Mihray，MA Hu，ZHOU Wen-ting, UMAR Anwar

(DeptofPharmacology，XinjiangMedicalUniversity，Urumqi830011，China)

榅桲(CydoniaoblongaMill，COM)具有降血壓、調血脂、補血、補腎、止瀉、利尿等功效。還有資料報道榅桲具有抗氧化、抗菌作用。其果實含有糖類、黃酮類、生物堿類、氨基酸及多肽、鞣質、有機酸、揮發油等成分[1]，其中糖類含量最高。目前，在國內外尚未見到榅桲果實多糖結構及藥理活性的相關報道。大量研究證明，植物多糖具有增強免疫功能、抗腫瘤、抗病毒、抗突變、抗衰老、抗凝血、降血糖和環境治理等生物學效應[2-5]。本文就榅桲果實多糖對大鼠動、靜脈血栓形成的影響進行了研究，探討其抗血栓作用及其可能的機制，為進一步篩選抗血栓有效部位提供實驗依據。

1材料

1.1儀器臺式高速離心機(KH-120M，上海安亭科技儀器廠)，酶標儀(Model-680，日本)，放射免疫計數器(GC-2016 γ，中國科大中佳公司)，全自動血凝分析儀(德國)。

1.2藥物與動物榅桲果實多糖(自提)，阿司匹林(Sigma，No2000641) ，銀杏葉片(天津天士力制藥有限公司，批號259)；SPF 級Wistar 大鼠96只，♂，體質量220～260 g，均由新疆醫科大學實驗動物中心提供，許可證號: SCXK( 新)2011-0004。

2方法

2.1分組及給藥大鼠隨機分成6組，即:空白組、阿司匹林組(5 mg·kg-1)、銀杏葉片組(20 mg·kg-1)、榅桲果實多糖低、中、高(50、100、200 mg·kg-1)劑量組，每組8只。灌胃給藥15 d，每天1次，容積為10 mL·kg-1。

2.2實驗方法末次給藥1 h 后腹腔注射3%戊巴比妥鈉(5 mL·kg-1) 麻醉，參照文獻[6-7]的方法改良制作血栓模型，剪下血栓發生部位的血管，取出血栓。腹主動脈取血，枸櫞酸鈉1 ∶9 抗凝，混勻后3 000 r·min-1離心15 min，收集血漿，分裝,凍存于-80℃。

2.3指標測定稱血栓重量，計算血栓抑制率，測定影響凝血、纖溶及血小板功能的指標。

3結果

3.1榅桲果實多糖對血栓重量的影響中、高劑量組均能減輕動、靜脈血栓重量，抑制血栓形成，差異有統計學意義(P<0.05)(Tab 1)。

GroupDose/mg·kg-1ArteryWWT/mgInhibitoryrate/%VenaWWT/mgInhibitoryrate/%Control-9.63±1.55-6.14±0.73-Aspirin54.84±0.87*49.85±4.14*1.48±0.29*75.86±4.52*Ginkgoleaftablets205.21±1.00*46.11±4.60*2.70±1.43*56.12±6.35*Lowdose508.40±0.9310.21±5.324.08±1.4033.42±5.21Middledose1006.51±0.64*32.41±2.75*3.22±2.05**47.55±4.46**Highdose2005.97±1.85*40.64±6.04*2.15±1.54**64.81±5.38**

*P<0.05,**P<0.01vscontrol group

3.2榅桲果實多糖對凝血功能的影響高劑量組對個別指標略有影響，而低、中劑量組均沒有影響，差異無統計學意義(Tab 2)。

GroupDose/mg·kg-1TT/sPT/sAPTT/sFIB/g·L-1AT-Ⅲ/ng·L-1PC/mg·L-1D-D/pg·L-1Control-30.88±3.2816.86±0.8225.20±3.861.95±0.5158.52±1.593.10±0.432833.5±654.17Aspirin540.18±1.29**18.80±2.08**38.41±0.74*1.87±0.1361.58±6.17*3.16±0.082545.7±153.76**Ginkgoleaftablets2039.38±1.06**18.16±1.94*33.88±1.22*1.74±0.1060.01±4.083.09±0.142708.6±262.57*Lowdose5032.01±1.3816.16±1.6127.66±4.191.79±0.1456.05±0.752.94±0.062418.9±123.77**Middledose10033.76±1.2216.27±1.8228.41±5.741.80±0.1357.54±3.863.03±0.142779.4±151.37Highdose20037.30±1.28**16.92±5.1533.71±1.59*1.67±0.2062.63±4.48*3.13±0.142544.4±175.33**

*P<0.05,**P<0.01vscontrol group

3.3榅桲果實多糖對纖溶功能的影響高劑量組能提高PLG含量(P<0.05), t-PA、 PAI-1均略有變化,但差異沒有統計學意義(Tab 3)。

Tab 3Effect of COM polysaccharides on

GroupDose/mg·kg-1PLG/μg·L-1t-PA/ng·L-1PAI-1/ng·L-1Control-839.30±22.6810.49±3.20320.83±90.48Aspirin5932.62±66.83**13.92±1.27*332.50±35.67Ginkgoleaftablets20872.15±70.42*13.44±1.47314.18±34.83*Lowdose50812.01±45.579.66±1.24412.81±73.34Middledose100827.86±135.3112.69±1.37369.60±36.85Highdose200914.38±86.17*13.76±1.13319.56±36.95

*P<0.05,**P<0.01vscontrol group

3.4榅桲果實多糖對血小板功能的影響中、高劑量組均明顯升高6-keto-PGF1α含量(P<0.01)；降低VWF、TXB2含量(P<0.05)，差異有統計學意義(Tab 4)。

Tab 4Effect of COM polysaccharides on

GroupDose/mg·kg-1VWF/ng·L-1P-selectin/ng·L-16-keto-PGF1α/ng·L-1TXB2/ng·L-1Control-1777.7±144.5215.94±0.6020.13±4.67430.48±39.49Aspirin51706.3±50.49*13.90±1.2519.54±1.33107.48±16.75**Ginkgoleaftablets201714.3±50.46*13.34±1.0318.86±1.3288.66±9.33**Lowdose501774.1±61.0214.83±0.9820.73±1.46281.30±36.34Middledose1001684±44.48*14.18±1.3629.50±1.42**112.75±28.87**Highdose2001675±48.75*13.48±0.2239.11±7.05**105.92±23.75**

*P<0.05,**P<0.01vscontrol group

4討論

血小板參與血栓形成過程的許多環節，在血栓形成過程中起核心作用。實驗結果表明，榅桲果實多糖對于凝血、纖溶系統的影響不明顯；而能減輕血栓重量，抑制血栓形成；升高具有抑制血小板聚集作用的PGI2代謝產物6-keto-PGF1α含量，降低體內強效的血小板聚集劑TXA2代謝產物TXB2含量。TXB2和6-keto-PGF1α相互作用，抑制血小板聚集，從而抑制血栓形成。VWF是反映血管內皮細胞損傷的相對特異的血液學指標，是血小板黏附起點，VWF明顯升高，表明內皮功能損傷，內皮損傷為血小板黏附聚集和血栓形成提供結構基礎。本實驗中榅桲果實多糖降低VWF含量而抑制血栓形成。實驗結果提示榅桲果實多糖抗血栓作用主要與抑制血小板黏附和聚集有關。由于僅做了體內實驗，而參與血栓形成的因素很多，這有待于做進一步的研究和探索論證。

參考文獻:

[1]周文婷，鄔利婭·伊明，阿迪力·阿布都熱合曼，等. 榅桲不同藥用部位對腎性高血壓大鼠血壓及血液流變學指標的影響[J]. 中國實驗方劑學雜志，2013，19(22):254-8.

[1]Zhou W T,Abdurahma A,Yiming W,et al. Influence of different parts ofCydoniaoblongaMill．(COM) on blood pressure and hemorheology parameter in renal hypertensive rats[J].ChinJExpTraditMedForm,2013，19(22):254-8.

[2]黃建琴，聶少平，張莘莘，等. 黑靈芝多糖對S-180 荷瘤小鼠的免疫調節作用[J]. 中國藥理學通報，2014，30(5)：739-40.

[2]Huang J Q, Nie S P, Zhang S S，et al. Immunomodulatory activities of polysaccharide from Ganoderma atrum on S-180 tumor-bearing mice[J].ChinPharmacolBull,2014，30(5)：739-40.

[3]孫陽，楊婧，張琪琪，等. 紅花多糖對肝癌細胞增殖阻滯的機制探討[J]. 中國實驗方劑學雜志,2014，20(13):156-9.

[3]Sun Y，Yang J，Zhang Q Q，et al. Mechanism investigation of cell cycle arrest in hepatic cancer cell induced by safflower polysaccharide[J].ChinJExpTraditMedForm, 2014，20(13):156-9.

[4]趙楊，王生，陶麗,等. 海參粘多糖對腫瘤細胞介導的凝血過程的影響[J]. 中國藥理學通報,2012,28(6):797-802.

[4]Zhao Y,Wang S,Tao L,et al.Effects of holothurian glycosaminologlycan on coagulation process medieted by tumor cells[J].ChinPharmacolBull,2012,28(6):797-802.

[5]洪德志，時連根. 桑枝多糖對糖尿病模型小鼠的降血糖作用[J]. 中國藥理學與毒理學雜志，2012,26(6)：806-9.

[5]Hong D Z,Shi L G.Hypoglycemic effect of polysaccharides in Ramulus Morion diabetic model mice[J].ChinJPharmacolToxicol, 2012,26(6)：806-9.

[6]Kurz K D，Main B W，Sandusky G E. Rat model of arterial thrombosis induced by ferric chloride[J].ThrombRes，1990，60(4):269-80.

[7]Reyer L. Failure of aspirin at different doses to modify experimental thrombosis in rat[J].ThrombRes，1980，18(5):669-74.

網絡出版時間：2015-1-9 13:37網絡出版地址：http://www.cnki.net/kcms/doi/10.3969/j.issn.1001-1978.2015.02.030.html

中國圖書分類號：R-332；R284.1；R364.15；R973.2

關鍵詞:榅桲；多糖；抗血栓； 抗凝血；抗血小板；機制

Key words:Cydonia oblonga;polysaccharides;anti-thrombosis;anticoagulant;antiplatelet; mechanism

通訊作者艾尼瓦爾·吾買爾(1962-)，男，博士，教授，博士生導師，研究方向:心血管藥理學，,Tel：0991-4365602，E-mail:anwar.umar@126.com

作者簡介：美合日阿依·伊薩克(1988-)，女，碩士生，研究方向：心血管藥理學，E-mail:mhray88@126.com;

基金項目：國家自然科學基金(地區基金)資助項目(No 81260490)

收稿日期:2014-10-13,修回日期:2014-10-31

文獻標志碼：A

文章編號：1001-1978(2015)02-0295-02

doi:10.3969/j.issn.1001-1978.2015.02.030