羊弓形蟲病血清學調查及分析

格松

（青海省玉樹市隆寶鎮畜牧獸醫工作站青海玉樹815000）

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羊弓形蟲病血清學調查及分析

格松

（青海省玉樹市隆寶鎮畜牧獸醫工作站青海玉樹815000）

弓形蟲病是由剛地弓形蟲引起的呈世界性分布的一種廣泛寄生于人和動物有核細胞中的寄生性原蟲病［1］。弓形蟲為細胞內原蟲，宿主范圍十分廣泛，是一種能感染多種動物的重要人畜共患寄生蟲病，貓科動物為其唯一的終末宿主。感染的貓通過糞便排出弓形蟲卵囊，污染飼料、水源和環境，被認為是弓形蟲的重要傳染源。羊的弓形蟲病除了造成懷孕母羊流產外，多數成年羊為隱性感染，主要表現為懷孕母羊流產、死胎、先天畸形等，嚴重的母羊和羔羊都死于呼吸系統和神經癥狀的癥狀。對免疫力低下或缺陷的患者危害更嚴重，給養羊業造成了巨大的經濟損失［2］。而且弓形蟲是一種食源性原蟲，嚴重威脅人類的健康。

間接血凝技術（IHA）具有特異性強、敏感性高、價格低廉、操作簡單的特點，是流行病學調查和輔助診斷理想方法，現在國內外已有多種弓形蟲免疫診斷試劑盒［3］。為初步掌握青海省玉樹地區羊弓形蟲病的感染水平和流行規律，切實做好該地區弓形蟲病的監測工作，本實驗我們應用間接血凝試驗（IHA），對該地區7個規模化養殖場部分羊只進行了血清學檢測，以期對弓形蟲病在本地區的流行情況提供參考，對畜產品健康發展和人類健康都具有重要意義。

1材料與方法

1.1血清樣品采集與處理

采集青海省玉樹地區7個規模化養羊場不同品種的羊血清共計560份，全部采用頸靜脈抽取適量的血液，做好標記。將采集的血液擺成斜面，于37℃恒溫培養箱靜置1～2 h，置于4℃冰箱中24 h后分離血清，保存待檢。取待檢血清0.5 mL置于試管中，加入1%正常兔血清1.5 mL，56℃滅活30 min，加入未致敏的綿羊紅細胞2 mL，4℃過夜。

1.2主要試劑

弓形蟲間接血凝試驗診斷液，弓形蟲標準陰性和陽性對照血清及稀釋液等均購自于中國農業科學院蘭州獸醫研究所。

1.3間接血凝試驗檢測方法

1）鋪板在96孔V型凝集反應板中加入稀釋液，每孔加入50μL。

2）待檢血清倍比稀釋每4孔一組，分別為一份樣品血清做對倍梯度稀釋：第一孔加被測樣品血清50μL，混勻后吸取50μL加入第二孔，混勻后吸取50μL加入第三孔，混勻后吸取50μL加入第四孔，混勻后吸取50μL棄去。另外每塊板凝集反應板上設陰性血清、陽性血清、空白稀釋液（不加血清）各一組。

3）加入抗原，每孔加衣原體屬抗原致敏綿羊紅細胞25μL，將凝集反應板放在微量振蕩器振蕩 1 min，檢查各反應孔紅細胞混勻與否，不出現紅細胞沉淀視為合格。將96孔V型反應板放于無菌濕盒中靜置在37℃恒溫箱2 h后，進行結果判定。

1.4結果判定

標準陽性血清各稀釋度應完全凝集，標準陰性血清、稀釋液空白對照不出現凝集現象，實驗結果成立。實驗結果成立的條件下，稀釋度≥1∶64且凝集在（++）及以上的樣品判為陽性；稀釋度≤1∶16（++）凝集的樣品判為陰性；介于二者之間判為可疑，可疑的樣品重新檢驗，仍然可疑的判為陰性。

紅細胞全部凝集，在孔形成一層均勻的膜，布滿整個孔底者為“++++”；紅細胞多數凝集，在孔底形成一層薄膜，面積稍小者為“+++”；紅細胞部分凝集，在孔底形成薄層，邊緣松散或呈鋸齒狀者為“++”；紅細胞少量凝集，在孔底有小圓點者為“+”；紅細胞沉于孔底，但周圍不光滑或中心有空斑者為“±”；紅細胞完全沉于孔底，呈光滑的圓點者為“-”。“++”以上的凝集判為陽性凝集。

2結果與分析

弓形蟲間接血凝檢測顯示：從7個規模化羊場采集的560份羊血清，陽性數為92份，感染率為16.43%，且7個規模化養羊場都有感染，但不同羊場衣原體病感染率有所差異，最高的羊場陽性率可達28.75%，最低的感染率為8.75%，該結果表明青海省玉樹地區羊群中普遍存在弓形蟲病。

3討論

弓形蟲病是一種重要的人獸共患寄生蟲病，世界各地普遍存在，幾乎所有的溫血動物都能感染，作為弓形蟲的儲存宿主，以貓的重要性最大。弓形蟲是細胞內寄生原蟲，常表現為隱性感染，沒有明顯的臨床特征，許多養殖單位不夠重視。并且弓形蟲作為一種重要的食源性原蟲，不僅對養羊業造成巨大的的經濟損失，而且對人的身體健康也存在嚴重的危害。因此，應該高度重視弓形蟲病對養羊業的嚴重危害，做好預防和藥物治療工作，盡可能降低其給食品公共衛生安全造成隱患。

我國羊弓形蟲的感染比較嚴重，據國內流行病學調查報道多數高于20%。本實驗通過對青海省玉樹地區560份羊血清進行弓形蟲血清抗體的檢測，平均感染率為16.43%，最高陽性率可達28.75%，可見該地區羊群中普遍存在弓形蟲病的感。但由于整個地區羊群基數較大，本試驗抽檢樣品數有限，且多數屬于規模化羊場，結果具有一定的局限性，還需要進一步進行弓形蟲病流行病學調查。（編輯：趙曉松）

參考文獻：

［1］陸承平.獸醫微生物學［M］.北京：中國農業出版社，2001.378-382.

［2］李曉卉，陸艷，馬少麗.青海改良種綿羊弓形體病的血清學調查［J］.青海畜牧獸醫雜志，2004，34（1）：22.

［3］羅才慶，袁勻，黃劍梅，等.龍巖市部分地區牛、羊弓形蟲病的血清學調查［J］.中國動物保健，2013，15（7）：13-16.

doi：10.3969/j.issn.1008-4754.2016.6.029

作者簡介：格松（1968-），男，藏族，青海玉樹人，中專，獸醫師，研究方向：畜牧獸醫。