張佳佳王 萍
乙肝核心抗體單項陽性與乙肝DNA定量檢測相關性分析
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目的 探討乙肝核心抗體單項陽性與乙肝DNA定量檢測的相關性。 方法 采用ELISA 法檢測出156例乙肝核心抗體單項陽性的標本,并采用實時熒光定量PCR技術對156例標本進行HBV-DNA檢測。結果 156例乙肝核心抗體(抗-HBC)單項陽性患者標本經HBVDNA檢測,HBV-DNA大于1×103copy/ml為陽性,陽性標本為11例,陽性率為7%。結論 對于ELISA檢測乙肝核心抗體單項陽性的患者,最好同時使用HBV-DNA進行檢測,防止漏檢。
乙肝核心抗體;PCR;HBV-DNA
我國是乙肝的高發地區,攜帶乙肝病毒的人數可達1.2億人,乙型病毒性肝炎(乙肝)是我國危害最為嚴重的傳染病之一[1]。在乙肝病毒感染后,機體會產生一系列的免疫應答。由于個體免疫系統的差異,乙肝核心抗體(HBcAb)的濃度及在乙肝5項指標中的陽性模式分布不同,而乙肝核心抗體在區分人群HBV感染程度、分析和判斷患者病程是重要依據。乙肝五項檢測是檢驗乙肝的常用方法,在乙肝五項檢測中常常發現有乙肝核心抗體(抗-HBC)單項陽性的情況存在。本文通過近年156例乙肝核心抗體單項陽性的患者標本進行乙肝DNA定量檢測來分析兩者之間的相關性。
1.1一般資料
收集2013年7月~2016年4月在我院就診,經ELISA方法確認乙肝核心抗體單項陽性的患者156例,其中男性75例,女性81例,平均年齡為(52.0±3.4)歲,無臨床癥狀,沒有進行任何醫療行為。每位患者行空腹抽血5 ml后,離心分離血清,保存于-20℃冰箱內備用。
1.2儀器與試劑
美國ABI7300PCR擴增儀,HBV-DNA試劑是中山大學達安基因股份有限公司提供。乙肝兩對半試劑是由上海科華生物有限公司提供。
1.3數據分析
統計學分析: 本次實驗數據采用 SPSS 17.0軟件進行統計學分析,計數資料對比采用χ2檢驗,采用百分數表示,以P<0.05為差異有統計學意義。
分別對156例乙肝核心抗體單項陽性的患者進行乙肝病毒含量檢測,HBV-DNA含量大于1×103copy/ml為陽性,其中陽性標本為11例,陽性率為7%。
我國是乙肝的高發地區,約有10%是乙肝病毒攜帶者,其中嚴重的可發展成為重癥肝炎、肝硬化和原發性肝癌。人體感染乙肝病毒后,血清中最早出現的即是乙肝核心抗體(抗-HBC),該抗體是乙肝標志性抗體。過去認為,乙肝核心抗體單項陽性的患者是處于乙肝恢復期,無傳染性。但隨著檢驗技術的發展,尤其是HBV-DNA檢測的使用,此類患者可能被檢測出隱匿性HBV感染。HBV-DNA含量是乙肝最直接、最可靠的指標,可判定體內HBV病毒復制和傳染性[2]。根據有關資料表明,HBV處于恢復期時,HBV-DNA檢測出現低病毒量(即病毒復制量在1×103~9.9×104copy/ml時),提示有傳染的可能。
在乙肝檢測中,導致單項核心抗體陽性的原因主要有以下幾種:(1)HBV早期感染,病毒載量較低。(2)ELISA未能檢出HbsAg等乙肝標志物,其原因可能是HbsAg變異株所導致。(3)丙肝病毒的干擾導致導致HbsAg合成受到影響。(4)感染過大腸桿菌的患者,體內出現大腸桿菌抗體,而大腸桿菌抗體所表達的重組抗原中混雜的菌體蛋白能與人源標本及多克隆乙肝核心抗體酶標記物中此種抗體結合而出現假陽性[3]。(5)試劑盒試劑的原因和操作不當產生的假陽性[4]或有敏感性不高或高滴度導致乙肝表面抗原的等指標的假陰性[5]。也有研究表明是與HBsAg突變有關[6]等。
在本次實驗中,對156例乙肝核心抗體(抗-HBC)單項陽性患者標本經HBV-DNA檢測,發現陽性為11例,陽性率為7%。這說明在乙肝核心抗體單項陽性患者中存在隱匿性HBV感染。這與國內的一些報道相符合[7-9]。
綜上所述,對于LLISA檢測乙肝核心抗體單項陽性的患者,最好同時使用HBV-DNA進行檢測,以防止HBV感染漏檢。
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Correlation Analysis of HBV Core Antibody Single Positive and Quantitative Detection of Hepatitis B DNA
ZHANG Jiajia1WANG Ping21 Clinical Laboratory Department,The First Affiliated Hospital of He'nan Polytechnic University,Jiaozuo He'nan 454100,China,2 Hematology Department
Objective To explore correlation of the anti-HBC single positive with HBV DNA quantitative detection.Methods To use ELISA method to detect the specimens of 156 cases of single positive antibody of second liver core,use real-time fluorescent quantitative PCR technology in 156 cases of specimens for HBV - DNA testing. Results To test the 156 cases of hepatitis b core antibody(anti-HBC)single positive patient specimens by HBV - DNA testing,which HBV-DNA more than 1×103copy/ml was positive,positive specimens for 11 cases,positive rate was 7%. Conclusion To ELISA detection of anti-HBC single positive patients,best use HBV - DNA testing at the same time,to prevent leak.
Anti-HBC,PCR,HBV-DNA
R446.6
A
1674-9316(2016)18-0148-02
10.3969/j.issn.1674-9316.2016.18.097
1 河南理工大學第一附屬醫院檢驗科,河南 焦作 454100;2血液科
張佳佳,E-mail:zjia0221@163.com