骨髓增殖性腫瘤患者JAK2、MPL及CALR基因突變位點分析及臨床觀察

馬麗麗

骨髓增殖性腫瘤患者JAK2、MPL及CALR基因突變位點分析及臨床觀察

馬麗麗

目的 探討骨髓增殖性腫瘤患者JAK2及MPL及CALR基因突變的位點，及患者的臨床特點。方法 選取我院2014年2月～2015年5月收治的骨髓增殖性腫瘤患者100例，通過測序法測定患者CALR基因突變，通過AS-PCR法檢測患者骨髓中JAK2及MPL基因突變。結果 所有患者MPL基因突變陰性；PV患者JAK2基因突變發生率91.9%，CALR基因突變陰性；ET患者JAK2基因突變發生率41.2%，CALR基因突變發生率為32.4%；PMF患者JAK2基因突變發生率為44.8%，CALR基因突變發生率為31.0%。結論 骨髓增殖性腫瘤患者發生CALR基因突變的患者與發生JAK2、MPL基因突變的患者比較，更有可能獲得較好的預后效果。

骨髓增殖性腫瘤；基因突變；位點；臨床分析

骨髓增殖性腫瘤是源于多功能造血干細胞的惡性骨髓增殖性疾病，患者經常發生血管病變事件，纖維組織增生、栓塞出血及髓外造血，發展方向是白血病[1-3]。本文主要通過對骨髓增殖性腫瘤JAK2、MPL及CALR基因突變的研究，了解患者JAK2、MPL及CALR基因突變與患者臨床癥狀及預后效果的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2014年2月～2015年5月確診為骨髓增殖性腫瘤的患者100例，其中真性紅細胞增多癥患者37例，原發性血小板增多癥患者34例，原發性骨髓纖維化患者29例；參與調查的患者中男53例，女47例；患者年齡18～72歲，平均年齡為（44±12）歲。患者按照標準進行診斷和分類。參與調查的所有患者均被告知，并簽署同意協議。

1.2 方法

將100例骨髓增殖性腫瘤患者的初期血常規檢查結果進行匯總。并對參與研究的患者進行隨訪，隨訪時間10個月以上。真性紅細胞增多癥患者通過DNA提取試劑盒提取骨髓細胞基因組DNA，CALR9號外顯子PCR擴增引物。將擴增引物進行提純、分析，分析結果顯示，358以外的片段顯示條帶時，代表CALR突變陽性。應用等位基因特異性-聚合酶鏈反應（AS-PCR）及序列測定方法，檢測患者骨髓及外周血單個核細胞JAK2V617F及MPLW515L/K點突變情況并進行分析。

2 結果

2.1 患者的臨床特征及實驗室檢測結果

對真性紅細胞增多癥患者37例，原發性血小板增多癥患者34例，原發性骨髓纖維化患者29例均采取規范化的治療，并定期對上述患者做隨訪，最后一次隨訪顯示，所有患者無死亡和失訪。檢驗CALR基因突變結果為陽性的患者中有10例患者為原發性血小板增多癥患者，與JAK2患者相比，血小板計數更高。檢驗CALR基因突變結果為陽性的患者中有12例為原發性骨髓纖維化患者，無論是白細胞計數水平，還是血紅蛋白的檢查結果均呈現較低的水平。

2.2 JAK2、MPL及CALR基因突變

真性紅細胞增多癥患者共37例，未見CALR基因突變發生，其中有34例患者的JAK2基因檢測中發現JAK2V617F出現基因突變，突變發生率為91.9%；原發性血小板增多癥患者共34例，其中有14例患者的JAK2基因檢測中發現JAK2V617F出現基因突變，突變發生率為41.2%，CALR基因突變的患者共有11例，發生率為32.4%，原發性血小板增多癥患者中有20例患者JAK2基因突變顯示陰性，其中有9例患者CALR基因發生突變，CALR基因的突變發生率為45.0%；原發性骨髓纖維化患者共29例，其中有13例患者的JAK2基因檢測中發現JAK2V617F出現基因突變，發生率為44.8%，CALR基因突變的患者共有9例，發生率為31.0%，原發性骨髓纖維化患者中有16例患者JAK2基因突變顯示陰性，其中有10例患者CALR基因發生突變，CALR基因的突變發生率為62.5%。參與此項調查的所有患者均未見MPL基因發生突變。

3 討論

對于骨髓增殖性腫瘤的治療，近年來，臨床多采用JAK2基因突變點為靶點進行治療[4]，不僅如此，JAK2基因對于骨髓增殖性腫瘤的診斷和預后等方面也都有很大作用[5-7]，但是，作用機理目前還不明確。

本研究顯示，所有患者MPL基因突變陰性；PV患者JAK2基因突變發生率91.9%，CALR基因突變陰性；ET患者JAK2基因突變發生率41.2%，CALR基因突變發生率為32.4%；PMF患者JAK2基因突變發生率為44.8%，CALR基因突變發生率為31.0%。從研究數據顯示，CALR基因突變與JAK2基因突變相比較，對于原發性骨髓纖維化患者，血小板計數更高，血紅蛋白和白細胞都偏低，出現血栓的概率低，同時也提示患者預后更好，具有較高的患者生存率。

有研究顯示，骨髓增殖性腫瘤患者的JAK2、MPL及CALR基因突變并不會同時出現[8]，本項研究中也未見兩種及以上基因突變共同出現。

[1] 邱荃，王茫桔，朱平. 骨髓增殖性腫瘤分子發病機制及治療研究進展[J]. 白血病·淋巴瘤，2015，24（7）：400-404.

[2] 肖志堅. 骨髓增殖性腫瘤患者的基因突變檢測：已進入臨床時代?[J]. 白血病·淋巴瘤，2015，24（7）：388-391.

[3] 董瑩，朱華鋒，侯莉萍，等. 骨髓增殖性腫瘤120例JAK2 V617F基因突變的臨床分析[J]. 白血病·淋巴瘤，2015，24（7）：433-436.

[4] 董露，申徐良，魏武. CALR基因突變與JAK2/MPL突變陰性的骨髓增殖性腫瘤的關系[J]. 中國實驗血液學雜志，2015，23（5）：1532-1534.

[5] 賈曉陽，王光平. JAK2V617F基因突變在骨髓增殖性腫瘤診斷中的應用[J]. 中國現代醫學雜志，2015，25（26）：46-49.

[6] 高曉冬，張志南，宋燕，等. JAK2V617F基因突變與骨髓增殖性腫瘤類型及疾病轉化的相關性分析[J]. 哈爾濱醫科大學學報，2015，49（3）：236-238.

[7] 林鳳茹，王艷，張敬宇. JAK2 V617F基因突變陽性骨髓增殖性腫瘤治療研究進展[J]. 白血病·淋巴瘤，2015，24（7）：392-393.

[8] 李晨瑩，金潔. 骨髓增殖性腫瘤基因突變的研究進展[J]. 中華血液學雜志，2014，35（12）：1127-1130.

Analysis and Clinical Observation of JAK2, MPL and CALR Gene Mutations in Patients With Bone Marrow Proliferation

MA Lili Department of Hematology, The Hospital of Chifeng City, Chifeng Inner Mongolia 024000, China

Objective To study the patients with tumor in bone marrow hyperplastic JAK2 and MPL and CALR gene mutation sites, and the clinical characteristics of patients. Methods 100 cases of bone marrow cancer patients treated in our hospital from February 2014 to May 2015 were selected. The mutation of CALR gene was determined by sequencing method. Detection of JAK2 and MPL gene mutations in bone marrow of patients by AS-PCR. Results All patients MPL gene mutation negative. PV JAK2 gene mutation rate was 91.9%, CALR gene mutation negative. ET JAK2 gene mutation rate was 41.2%, CALR gene mutation rate was 32.4%. Patients with PMF JAK2 gene mutation rate was 44.8%, CALR gene mutation rate was 31.0%. Conclusion Bone marrow in patients with hyperplastic tumor CALR gene mutations in patients with JAK2, MPL gene mutation of patients were compared, and are more likely to achieve good prognosis

Marrow hyperplastic tumor, Gene mutation, Site, Clinical analysis

R733.3

A

1674-9308（2016）32-0104-02

10.3969/j.issn.1674-9308.2016.32.058

內蒙古赤峰市醫院血液內科，內蒙古 赤峰 024000