鴨疫里氏桿菌病的研究進展

張文通 魏鳳 李峰 沈志強

摘 要：通過RA病原學研究、分子生物學研究、診斷方法研究、防治研究四個方面的闡述，了解目前鴨疫里氏桿菌病的研究進展。

關鍵詞：鴨疫里氏桿菌病；研究進展

中圖分類號：S858.32 文獻標識碼：A 文章編號：1673-1085（2016）02-0043-06

鴨疫里氏桿菌（Riemerella Aanatipestifer，RA）病，曾名鴨疫巴氏桿菌（Pasteurella AanatiPestifer）病，是家鴨、鵝、火雞及其它家禽和野禽的一種急性、接觸性、敗血性傳染病，又稱為新鴨病、鴨敗血癥、鴨疫綜合癥、鴨疫敗血癥和鴨傳染性漿膜炎。鴨疫里氏桿菌感染發病率可達10%～60%，死亡率為30%～90%，是造成養鴨業經濟損失嚴重的傳染病之一[1]。到目前為止，美國、英國、西班牙、澳大利亞、加拿大、德國、新加坡、泰國、韓國等均有本病發生。我國，1982年郭璞玉等[2]首次報道北京郊區鴨場于1980～1981年曾發生過此病，并分離到了病原菌。隨后全國多個省份都相繼報道了此病。

1 RA病原學研究

1.1 分類地位 1932年美國學者Henderickson和Hilbert對病原菌進行分離鑒定，并稱之為鴨疫斐佛氏菌（Pfeifferella anatiestlfer）[3]。1954年Bruner和Fabricant通過比較，建議采用鴨疫莫拉克氏菌（Moraxella anatipestifer）這一名稱[4]。此后，在第七版《伯杰氏細菌鑒定手冊》中根據其形態與染色特性將其列入巴氏桿菌屬，命名鴨疫巴氏桿菌（Pasteurella AanatiPestifer）。1991年Rossau等對原來列入巴氏桿菌屬的鴨疫巴氏桿菌（Rasteorella anatipestifer，RA）與黃桿菌/噬纖維菌群的成員進行了比較研究，發現它們具有較多的相似性[5]。1993年Segers等通過分析RA的rRNA（Segers et al.，1993），進一步證實了以上觀點。但由于RA在蛋白質及脂肪酸組成、培養特性、酶活性等許多方面又明顯不同于黃桿菌/噬纖維菌rRNA同源群中關系較近的其他細菌，因此Segers等提出將RA歸入黃桿菌/噬纖維菌rRNA同源群，并建議單列一屬，稱為里氏桿菌屬，其代表種為鴨疫里氏桿菌，并將該菌所引起的疾病命名為鴨疫里氏桿菌病[6]。

1.2 血清型 目前報道鴨疫里默氏桿菌共有21個血清型[7-8]，不同血清型之間缺乏交叉保護[9]，其中鴨疫里氏桿菌2型是國內外被頻繁分離到的血清型。我國許多地區都有分離到本菌的報道，張大丙等證實國內存在1、2、6、10、11、13和14共7種血清型[10]。

1.3 生物學特性 RA菌體呈桿狀或橢圓形，偶見個別長絲狀，多為單個，少數成雙或鏈狀排列。可形成莢膜，無芽孢，無鞭毛。革蘭氏染色陰性，印度墨汁染色可見莢膜著色，瑞氏染色時大部分細菌呈兩極著色特性[11]。韋強等通過電鏡首次觀察到了血清l、2型的RA的固體培養物經負染或超薄切片后可觀察到約1/3的菌體具有特殊的贅生物形態結構；其內部有類似菌體的結構，有一層類似于菌體的“細胞壁”，但較薄[12]。

本菌在巧克力瓊脂、血液瓊脂和胰酶大豆瓊脂中生長良好。多次繼代培養可在普通培養基上生長，在麥康凱瓊脂上不生長。在胰酶大豆瓊脂中添加0.05%酵母浸出物，5%新生牛血清以及含有5%～10%的CO2環境可促進其生長。血液瓊脂上培養24h，形成邊緣整齊、透明、無色素的光滑型菌落，RA的最適生長溫度是37℃。

本菌不同的血清型，即使同一血清型的不同菌株的生化反應也不盡相同。總的來說，不發酵葡萄糖、蔗糖，也不發酵半乳糖、乳糖、果糖、木糖、甘露醇、山梨醇、甘露糖和棉實糖。極少數菌株發酵麥芽糖和肌醇。硝酸鹽還原、檸檬酸鹽利用、VP、甲基紅試驗、硫化氫產生、尿素分解均為陰性。氧化酶、觸酶試驗為陽性。多不溶血，多液化明膠[11]。

2 RA的分子生物學研究

目前，國內外學者從16SrRNA、外膜蛋白、莢膜、質粒、耐藥性、致病性及相關因子等方面開展了RA的分子生物學研究。Subramandam等對4株RA編碼16srRNA的基因序列的PCR產物進行序列分析，同時與產吲哚黃桿菌、粘黃桿菌等相關細菌進行了同源性分析，結果表明4株RA處于黃桿菌系統發育樹上；對PCR擴增的16SrRNA基因經限制片段長度多態性（RFLP）分析表明：即使是同一血清型的不同RA菌株，16SrRNA基因仍有差異[13]。Rimler等運用DNA指紋技術進行了鴨疫里默氏菌DNA指紋圖譜的研究，用限制性核酸內切酶HinfⅠ對從美國、英國、澳大利亞、加拿大、德國和以色列6個國家分離的89株RA進行了DNA指紋圖譜分析，結果表明不同來源的RA其DNA指紋圖譜存在明顯差異，即使是同一地區同一禽類分離的RA菌株，其DNA指紋圖譜也有所不同[14]。

Chang等對60株RA的質粒進行了分子生物學研究，發現77%的RA菌株至少帶有1個質粒，60%的RA菌株含3.9kb的質粒，12%的RA菌株含6.5kb和16.0kb的質粒，5%的RA含2.0kb、16.0kb、18.0kb的質粒；23%的RA菌株不帶質粒。他們挑選了3.9kb的質粒作DNA序列分析，發現G+C含量為27%，含3966bP和4個開放讀碼區（ORF）即vapDI、VapD2、RepAI、RepA2。RA質粒的RepA讀碼區的上游有一富含AT的區段，并連有4個由2lbp組成的完全重復的區段和1個由20bp組成的不完全重復的區段。對含或不含質粒的RA菌株進行VapD1序列的PCR檢查，表明VapD1序列僅存在于含質粒的RA菌株中[15]。

目前國內外己經對RA的一些免疫原性蛋白進行了研究，蘇敬良等用提純的RA莢膜免疫7日齡北京雛鴨后，可100%抵抗同源菌株攻擊[16]。程安春等對流行于我國的l、2、4和5型RA外膜蛋白多肽的組成及免疫原性進行了研究，試驗結果證實1型RA的44KDa、2型的40KDa、4型的75KDa和5型的39KDa外膜蛋白是主要的免疫原蛋白[17]。Subramaniam等對RA的一種優勢免疫原性OmpA的特性進行了研究，發現OmpA由外膜蛋白樣結構構成的羧基端保守區和一個氨基端可變區組成，這與其他一些革蘭氏陰性菌的OmpA結構相似，所不同的是RA的OmpA具有6個EF一手銬結合域和2個PEST結構域，這些基序的出現表明它們在外膜蛋白毒力方面有重要作用，而且編碼外膜蛋白的基因存在于RA標準株和所有血清型參照株中[18]。

劉穎等用PCR技術擴增26株鴨疫里默氏菌的部分螺旋酶gyrA序列，通過與大腸桿菌（ABA36537）比較氨基酸序列找到了對喹諾酮類抗生素耐藥菌株的基因突變熱點和突變規律[19]。

Weng等報道了一個3.9kb的質粒pCFC1和一個5.6kb質粒pCFC2，分子生物學研究表明，質粒pCFC2很可能與RA的致病性相關[20]。Crasta等首次對RA的CAMP溶血素進行研究，鑒定出CAMP溶血素決定簇所需的最小DNA片段為3566bp，含一個l026bp的ORF。將CAMP基因cam經PCR擴增后克隆到E.coli M15表達CAMP溶血素，SDS-PAGE和Western-blot分析證實了重組菌表達一種37KDa的蛋白，該蛋白具有免疫原性，能協同其它細菌產生溶血作用，可能與致病性有關[21]。

3 RA診斷學研究

3.1 RA的流行病學研究 本病主要感染家鴨，曾有報道鵝、火雞自然暴發鴨疫里默氏桿菌病，從雛雞、珍珠雞、鶴鶉、澳州長尾錐和其它水禽中也曾分離到鴨疫里默氏桿菌。1～8周齡的鴨都易感，但尤以2～3周齡的小鴨最易感。

本病一年四季均可發生，但以冬春季發病最多。可通過污染的飼料、飲水、飛沫、塵土經呼吸道、消化道、刺破的足部皮膚的傷口、蚊子叮咬等多種途徑傳播，庫蚊是RA的重要傳播媒介。本病潛伏期的長短與菌株的毒力、感染途徑以及應激等因素有關。

3.2 臨床診斷及病理變化 病鴨精神沉郁，食欲下降，縮頭垂翅，羽毛蓬松，呼吸困難，閉目，眼鼻分泌物增多，呼吸困難，腿軟，走動困難，多伏地。部分病鴨關節腫大，跛行或頭頸扭斜，并伴有頭部震顫等神經癥狀，扎堆，拉黃色或黃綠色稀糞。2～3d內死亡，死前出現痙攣、搖頭、角弓反張等癥狀。病死鴨剖檢發現：心包變厚，內有大量含纖維素性絮狀滲出液體；心包膜和胃腸粘膜表面有厚薄不均的纖維蛋白粘附；心外膜、心冠肝、脾、胰、肌胃及腸管出血明顯；肝腫大呈暗紅色或土黃色，表面大小不一的壞死灶；鼻腔有多量的粘液，關節面粗糙，附有干酪樣物質，關節變厚，內有大量淡紅色液體；腦膜、腦組織充血、出血。

3.3 診斷方法研究

3.3.1 分離鑒定 適于分離的病料有病鴨的心血、腦、氣囊、肝和病變的滲出物。根據其在普通培養基和麥康凱培養基上不生長，及其培養和生長特性、生化實驗結果等可作出判定。

3.3.2 瓊脂凝膠免疫擴散試驗 瓊脂凝膠免疫擴散試驗（Agargeli～unodiffosion，AGID）簡稱瓊擴試驗，是在瓊脂凝膠中進行的抗原抗體免疫沉淀反應，可用于血清學定型，簡便快捷。

3.3.3 凝集試驗 凝集試驗分為玻片凝集試驗和試管凝集試驗兩種。應用玻片凝集試驗可以實現細菌的快速鑒定，并對分離到的菌株的血清型進行大范圍的粗略篩選，但要準確定型還必須依賴于試管凝集試驗。試管凝集試驗可以更準確的進行血清型鑒定、血清流行病學調查以及抗體效價檢測。當供試菌與參照菌的凝集效價相等或僅差l個滴度時，一般可認為二者屬于相同的血清型；當凝集效價相差3個或3個以上滴度時，一般可認為該二者屬于不同的血清型[22]。

3.3.4 熒光抗體法 郭玉璞等應用直接熒光抗體法檢測急性病例，涂片標本上可見黑暗的背景有帶綠色熒光的菌體，本法特異性強，快而簡便，效果良好[23]。朱琪等建立間接免疫熒光抗體試驗，對發病小鴨的檢測結果表明，鴨腦組織鼻竇及肝臟等細菌檢出率較高[24]。

3.3.5 PCR快速檢測法 胡清海等根據已發表的鴨疫里默菌15型CVLI10/89株編碼42KDa主要外膜蛋白的基因序列，在國內外首次成功地建立了運用一對引物檢測出不同鴨疫里默菌的PCR方法，可以用于該菌的快速診斷和快速鑒別診斷以及流行病學調查[25]。2006年曲豐發等建立了基于鴨疫里氏桿菌16SrRNA PCR檢測方法[26]。2007年楊苗等根據鴨疫里氏桿菌16SrRNA基因保守序列設計特異引物建立了一種檢測鴨疫里氏桿菌的PCR方法[27]。楊建遠等根據GenBank中25株RA的外膜蛋白A（OmpA）基因序列，在其高度保守區設計了一對特異性引物，建立了一種檢測鴨疫里氏桿菌的PCR方法[28]。2010年馮金牛等利用16SrRNA保守序列設計特異引物PCR擴增鑒定鴨疫里氏桿菌，測序結果發現其與GenBank上分布的RA的16SrRNA同源性達到99.99%[29]。

3.3.6 間接免疫酶組織化學法 劉維平等應用鴨源血清1型鴨疫里默菌作為抗原，免疫兔制備兔抗RA的lgG并加以純化，建立了檢測雛鴨感染鴨疫里默菌的間接免疫酶組織化學法（indirect inununo histochemical technique），在對雛鴨人工感染RA病例和疑似病例的各組織器官進行檢測中發現，RA抗原分布于細胞漿、組織間隙和血液[30]。

3.3.7 間接ELISA法 張鶴曉等用裂解的l型RA菌體作為包被抗原，建立間接ELISA方法，檢測鴨血清中抗RA抗體[31]。胡清海等用脂多糖（LPS）作為包被抗原，建立了間接ELISA方法，人工感染RA的鴨在感染72h即可檢出抗體[32]。程安春等用超聲裂解法分別制備2型RA的裂解物包被酶標版，成功的制備了分別針對這四種血清型的ELISA方法[33]。Huang等使用一種被推測為RA表面抗原P45末端片段41KDa的重組蛋白rP45N'作為包被抗原建立的間接ELISA方法能成功的檢測出1、10、15、19四種血清型的RA和ATCC11845菌株免疫鴨的血清[34]。周祖濤用大腸桿菌表達的重組蛋白OmpA建立了RA抗體OmpA-ELISA檢測方法，試驗結果證實能夠應用于臨床RA抗體檢測[35]。

4 RA防治研究

加強飼養管理和環境衛生是最重要的預防措施。做好鴨舍消毒和通風，冬天要做好保暖等措施。在此基礎上還包括藥物防治和疫苗防治。

4.1 藥物防治 鴨RA病藥物防治主要為抗生素和磺胺類藥物，但RA對抗生素的敏感性各地報道不盡相同。劉穎等對全國各地85株RA菌進行藥敏檢測發現，100%對氨節西林、阿莫西林等青霉毒類藥物和頭孢噻肟、頭孢呋辛、頭孢噻吩等頭孢菌素類、西環素等四環素類藥物敏感[36]。鐘登科等[37]通過藥敏試驗證實鴨疫里氏桿菌1型對頭孢曲松、復方新諾明高度敏感。

4.2 疫苗防治 由于不同血清型對異型強毒沒有保護力或保護力很低，所以有必要做好RA血清型的監測工作，有利于生產出針對性強的疫苗。目前國內外RA的疫苗類型有以下幾種：

4.2.1 RA滅活菌苗的研究 張鶴曉等用間接ELISA檢測不同疫苗在免疫鴨后抗體消長規律發現油佐劑的效果最好，甲醛滅活苗二次免疫次之，甲醛滅活苗一次免疫效果最差[31]。黃渝等比較了滅活鋁膠苗、滅活蜂膠苗以及滅活油乳劑苗的免疫效果，結果表明三種不同佐劑菌苗的保護效果逐漸增強，但同時這三種佐劑的副作用也逐漸增加[38]。

4.2.2 RA弱毒活菌苗的研究 Sandhu等選擇1、2、5型的RA自然弱毒株，并經鴨體回傳10代無毒力返強，用這些弱毒株研制了三價活毒苗，經飲水和氣霧免疫1日齡雛鴨，對攻毒和野外感染均有較好的保護效果[39]。Higgins等在研究不同RA疫苗的免疫應答機制時，選用分離的1型RA野毒株，經連續62代的肉湯和血瓊脂培養基傳代，篩選出弱毒株，通過皮下注射、氣霧和飲水途徑免疫雛鴨，應用ELISA技術檢測血清抗體，通過淋巴細胞轉移實驗（LTT）研究其細胞免疫應答，結果該弱毒菌苗不僅產生長時間高水平抗體，而且引發了較強的細胞免疫應答[40]。

4.2.3 亞單位疫苗 林世棠等也對亞單位成分（莢膜和外膜蛋白）進行了提取并測定其免疫原性，結果表明RA亞單位成分免疫保護效果與提取物中的蛋白濃度呈正相關[41]。Pathanasophon用1、19型RA培養基無細胞濾液（Cell-free CultureFiltrate，CCF）免疫雛鴨后能很好地抵抗同型菌株的攻擊，CCF制作的疫苗有免疫原性，可能是濾液中的亞單位成分在發揮作用，因為RA在培養過程中有部分莢膜要分離菌體[42]。蘇敬良采用十六烷基二甲醛澳化按（CTAB）提取出1型RA的莢膜成分，其粗提物與純化物免疫雛鴨后對同型菌株的攻毒保護率分別為90%和70%[43]。呂敏娜等證實，主要成分為蛋白質多糖復合物的可溶性莢膜抗原較全菌滅活苗有著更好的免疫效果[44]。蘇敬良等提取了l型RA的OmpA，通過研究也證明RA外膜蛋白是具有良好免疫保護效果的一種亞單位成分[45]。

4.2.4 改進的液體培養和鴨胚培養工藝苗 鮑國連等用從浙江省發病鴨廠病死鴨中分離鑒定的RA-J、RA-L菌株研制疫苗，采用改進的液體和鴨胚培養工藝進行增菌培養，制備的疫苗有較高的保護率。另外，他們還發現疫苗中加入左旋咪唑作為免疫增強劑，可促進外周免疫活性細胞功能，誘導早期T細胞分化成熟，促進淋巴因子產生，從而增強免疫功能[46]。

參考文獻：

[1] 李春芬，李郁.鴨疫里氏桿菌病研究進展[J].動物醫學進展，2007，28（8）：64-67

[2] 郭玉璞，陳德威，范國雄.北京鴨小鴨傳染性漿膜炎的調查研究[J].畜牧獸醫學報，1982，13：107-114.

[3] Hendrickson J M， et al. A new and serious septicemic disease of young ducks with adescription of the causative organism Riemerella anatiestifer[J]. N. S Comell Vet，1932. 22：239-252

[4] Brunet D W. et al. A Strain of Moraxella anatipestifer（Pfeifferella anatipestifer） isolated from ducks[J].Cornell Vet，1954， 44（4）：461-464.

[5] Rossau R A，Van Landschoot A，Gillis M，Deley J.Taxonomy of Moraxellaceae fam. nov.，a new bacterial family to accommodate the genera Moraxella，Acinetobacter，and Psychrobacter and related organisms[J].Int J Syst Bacteriol. 1991，41：310-319.

[6] Segers P，Mannheim W，Vancanneyt M，Brandt K D，Hinz K H，Rersters K，Vandamme P. Riemerella anatipestifer gen. nov.，comb. Nov.，the causative agent of septicemia anserum exsudativa， and its phylogenetic affiliation within the Flavobacterium- cytophaga rRNA homology group[J]. Int J Syst Bacteriol， 1993，43：768-776.

[7] PathanasoPhon P，Sawada T，Tantieharoenyos T. New serotype of Riemerella anatipestifer Isolated from ducks in Thailand[J]. Avian Pathol，1995，24：195-19.

[8] Sandhu T S，Leister M L. Serotypes of Pasteurella anatipestifer isolates from poultry in different countries[J].Avian Pathol，199l，20：233-299.

[9] Sandhu T S. Immunization of white Pekin duckings against Pasteurella anatipestifer infection[J]. Avian Dis， 1979，23：662-669.

[10] 張大丙，郭玉璞.鴨傳染型漿膜炎的流行病學調查[J].中國獸醫雜志，1999，25：51-53.

[11] 陸承平.獸醫微生物學[M]（第三版）.北京：中國農業出版社，2001，253-254.

[12] 韋強，鮑國連，季權安等.鴨疫里氏桿菌形態特征的電鏡觀察[J].畜牧獸醫學報，2004，35：314-317.

[13] Subramaniam S，Kuhnert P，Frey J. Phylogenetic Position of Riemerella anatipestifer based on 16SrRNA gene sequences[J]. Int J Syst Bacteriol，1997，47：562-565.

[14] Rimler R B，Nordholm G F. DNA Fringerprinting of Riemerella anatipestifer[J].Avian Dis，1998，42：101-105.

[15] Chang C F， Hung P E， Chang Y F. Molecular characterization of a plasmid isolated from Riemerella anatipestifer[J]. Avian Pathol，1998，27：339-345.

[16] 蘇敬良.鴨疫里默氏菌免疫原性研究[J].中國獸醫雜志，1998，23（8）： 3-5.

[17] 程安春，汪銘書，劉兆宇，等. 血清2型鴨疫里默氏桿菌外膜蛋白多肽的組成及免疫原性[J].中國獸醫學報，2004，24：329-331.

[18] Subramaniam S，Huang B，Loh H，Kwang J， Tan H M，Chua K L， Frey J. Characterization of a Predominant Immunogenic Outer Membrane Protein of Riemerella anatipestifer[J].Clin Diagn Lab Immun. 2000，7：168-174.

[19] 劉穎，蘇敬良，劉文華.鴨疫里默氏菌的gyrA基因的檢測與變異位點的分析[J].中國獸醫雜志，2007，43：12-14.

[20] Weng S C， Lin W H， Chang Y F， Chang C F. Identification of a virulence- associated protein homolog gene and ISRal in a Plasmid of Riemerella anatipesifer[J]. FEMS Microbiol Lett，1999.179：11-19

[21] Crasta K C， Chua K L，Subramaniam S，Frey J，Loh H，Tan H M. Identification and characterization of CAMP cohemolysin as a Potential virulence factor of Riemerella anatipestifer[J]. J Bacteriol，20（）2， 84：1932- 1939.

[22] 蔡秀磊，韋強，鮑國連，等.鴨疫里默菌實驗室診斷方法研究進展[J]. 動物醫學進展，2006，27：13-16.

[23] 郭玉璞，甘孟侯，張中直.應用熒光抗體法診斷小鴨傳染性漿膜炎的試驗[J].中國畜禽傳染病，1998，20：183-186.

[24] 朱琪，張加勇，劉曉輝.應用間接免疫熒光抗體試驗檢測鴨疫里氏桿菌[J].黑龍江獸醫雜志，2001，30：31-34.

[25] 胡清海，劉曉文，趙世華，等.應用PCR技術檢測鴨疫里氏桿菌的研究[J].中國預防獸醫學報，2002，24（6）：471-473.

[26] 曲豐發，蔡暢，鄭獻進，等.利用16SrRNA建立特異性PCR快速檢測鴨疫里氏桿菌[J].微生物學報，2006，46（1）：13-17.

[27] 楊苗，程安春，汪銘書，等.基于鴨疫里氏桿菌16SrRNA建立特異性PCR快速檢測方法的建立和應用[J].四川農業大學學報，2007，25（3）：343-346.

[28] 楊建遠，鄧舜洲，何后軍.PCR法快速檢測鴨疫里氏桿菌的研究[J].江西農業大學學報，2005，27（3）：439-442.

[29] 馮金牛，阮二壘，楊麗云，等.鴨疫里氏桿菌的分離與16SrRNA的鑒定[J].動物醫學進展，2010，31（6）：73-76.

[30] 劉維平，程安春.間接免疫織化法檢測鴨疫里默菌感染和抗原定位[J].中國獸醫學報，2005，25：362-365.

[31] 張鶴曉，郭玉璞.間接ELISA檢測鴨疫里氏桿菌抗體的研究[J].中國畜禽傳染病， 1998，20：183-186.

[32] 胡清海，李剛，鄭明球，蔡寶祥.間接ELISA檢測鴨疫里氏桿菌病抗體的研究[J].中國畜禽傳染病，1998，20：252-256.

[33] 程安春，汪銘書，方鵬飛，等.間接酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測血清2型鴨疫里默氏桿菌抗體的研究[J].中國獸醫雜志，2004，40：14-17.

[34] Huang B，Kwang J，Loh H，Frey J，Tan H M， Chua K L.Development of an ELISA using a recombinant 41KDa Partial Protein （P45N'） for the detection of Riemerella anatipestifer infections in ducks[J]. Vet Microbiol，2002a，88：339-349.

[35] 周祖濤.鴨疫里氏桿菌免疫診斷方法及在感染鴨肝臟差異表達基因的研究[D].武漢：華中農業大學，2009.

[36] 劉穎，蘇敬良，劉文華，等.鴨疫里默氏菌的藥物敏感性檢測[J].中國獸醫雜志，2005，41：10-12.

[37] 鐘登科，魏建超，張訓海，等.鴨疫里氏桿菌的分離鑒定及藥敏試驗[J].畜牧與獸醫，2008，40（7）：86-88.

[38] 黃渝，蘇敬良，李文楊，等.1型鴨疫里默氏菌3種不同佐劑滅活苗的比較[J].中國獸醫學報，2002，22：561-563.

[39] Sandhu T S. Immunogenicity and safely of a live Pasteurella anatipestifer vaccine in white pekin duckings laboratory and field trials[J]. Avian pathol，199l，20：423-432.

[40] Higgins D A， Henry R R， Kownev Z V. Duck immune responses to Riem erella anatipestifer vaccines[J].Dev Comp lmmunol，2000，24：153-167.

[41] 林世堂，郁曉嵐，黃瑜.鴨疫巴氏桿菌亞單位成分的提取及免疫原性初步研究[J].福建畜牧獸醫，1994，增刊：4-6.

[42] Pathanasophon P，Sawada T， Pramoolsinsap T.Immunogenicity of Riemerella anatlpestifer brothculture bacterin and cell-free culture filtrate in ducks[J]. Avian Pathol，1996，25：705-719.

[43] 蘇敬良，郭玉璞，呂艷麗.鴨疫里氏桿菌免疫原性的研究：莢膜提取物免疫原性測定[J].中國獸醫雜志，1998，24：3-5.

[44] 呂敏娜，黃承鋒，張玉團，等.鴨傳染性漿膜炎莢膜多糖苗研究初報[J].廣東畜牧獸醫科技，1999，3：16-18.

[45] 蘇敬良，郭玉璞，呂艷麗.鴨疫里氏桿菌外膜蛋白免疫原性研究[J].畜牧獸醫學報，1999，30：444-448.

[46] 鮑國連，終承剛，韋強，等.鴨傳染性漿膜炎疫苗的研究[J].中國預防獸醫學報，1999，21：414-416.

Abstract：By etiology， molecular biology， diagnostic methods， revention research of RA described in four areas， understand the current duck anatipestifer disease research.

Key words：Riemerella anatipestifer； Research