分光光度計使用中不容忽視的幾個問題

李　位

(貴州省有色金屬和核工業地質勘查二總隊，貴州　六盤水　553004)

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分光光度計使用中不容忽視的幾個問題

李位

(貴州省有色金屬和核工業地質勘查二總隊，貴州六盤水553004)

在理化分析中最常用到的儀器就是分光光度計，這種儀器的基本原理主要是建立在與光和物質相互作用的基礎上，當某一溶液當中其吸收的輻射的物質分子與光子發生碰撞的時候，也就會產生一種吸收，對于其吸光度值的大小進行測量可以有效的對某種物質存在的量的多少進行反應。本研究基于此，主要分析分光光度計在其使用過程中存在的幾個問題，希望所得的結果能夠為相關領域提供有價值的參考。

分光光度計；理化分析；儀器

在分析測試實驗室里常見的分析儀器中，有一種儀器便是我們提到的分光光度計，而最為常見的分光光度計主要有紫外線光光度計，其主要是用來測定被測物質，在一定波長的照射下而產生的吸光度。這種分析能夠有效的對物質本身作出定量或定性分析，而在日常的使用過程中，存在的一些人在對分光光度計的使用上，或多或少地存在著一些疑惑，而使用也存在著一些不規范的情況，因此，分光光度計在使用過程中以及不容忽視的問題，并針對性地予以一些解決性的措施，對于能夠令其更好地對物質進行定性或定量具有重要的價值和意義。

1　分光光度計在預熱方面的問題分析

使用分光光度計一般都需要進行預熱，通常在使用說明書上會對此進行說明，一般來說要求預熱時間大約為20 min，但是如果分光光度計攜帶微處理器，那么在去開機之后機器將會進入自動檢測階段，也就是我們常說的初始化狀態[1]，這個過程大約需要10 min左右的時間。在對分光光度計進行預熱的時候，一些使用者存在著一定的問題，舉一個最簡單的例子，比如在開機之后止于熱電路系統，也就是說不對其波長進行調節，也沒有打開吸收電池箱蓋進行預熱等，甚至有些人認為其初始化的過程就是預熱的過程，這種失誤是十分嚴重的。

分析對分光光度計進行預熱的目的，其主要是促使其達到最佳的使用狀態，進而有效地保證測量的數據更加穩定和正確。而對分光光度計進行預熱，并非是單純為了電路系統電子元件的穩定，同時也是為了確保其光路系統處于穩定的狀態，因此需要對其進行正確的預熱[2]。

筆者在此對體育老方法予以簡要的敘述，我們以772型分光光度計為例，當開機以后，首先對其測定波長值進行調節，進而選擇靈敏度大，選擇一個吸收池裝上純水，將其置于公路上，對“0%T”和“100%T”進行調節，不必確保必須精準，然后將吸手指按相關上，基礎上進行20 min的預熱，當肉眼觀測到顯示儀器上的讀數不再變化以后便可以進行測定；而對于攜帶有微處理器有自檢功能的分光光度計等預熱，開機后首先是其儀器自檢，當儀器初始化結束之后，需要選擇及測定的窗口射釘器所需要的波長值，選擇吸收池裝上純凈水，至于光路上，調“0000 A”，之后預熱儀器，當觀測到其儀器顯示的讀數不再發生變化，便可以進行測定；如果是紫外可見分光光度計，因為其存在雙光源，所以為了延長器燈的使用壽命，進而在開機即完成自檢工作以后便可以關掉測定時應用不到的光源燈。

2　分光光度計的長波準確度的檢查與校正

當談到分光光度計的常不準確度的檢查和矯正時，常常會涉及到這樣的問題，在日常對分光光度計進行使用的時候，是否必須經常進行儀器波長的準確度檢查，事實并非如此。當我們在日常檢測工作中發現儀器的靈敏度下降，這個時候就應該對其波長準確度進行檢查[3]，所以需要將儀器開機之后，蒸汽波長調整為580 nm，同時將一張白色卡片紙插入在吸收池的通風道，進而對其進行觀察是否能夠看到一個長方形的黃色光斑，有則說明其準確度正常，沒有就需要對其進行波長的矯正[4]。

需要注意的是，如果分光光度計經過長途搬運，或者受到了機器的震動或是對其光源燈泡進行更換，那么之后都必須進行波長的矯正，而檢驗則按照上面所說的點方法進行，涉及到的校正方法有很多，一般主要有鐠釹濾光片校正法、是濾光片校正法、氘燈特征發射線的矯正法，具體的矯正步驟可以對儀器的使用說明書予以參考。

3　分光光度計吸收池使用的問題分析

分析分光光度計吸收池的使用，其所存在的問題比較嚴重，而涉及的方面也比較多，可以按照分光光度計吸收池使用的基本順序進行說明。

3.1關于分光光度計吸收池的潤洗

關于分光光度計吸收池的使用，在吸收池進行裝液之前必須采用待裝溶液對其進行潤洗，一般對其進行2～3遍的潤洗。而在進行潤洗之前是否需要采用純凈水進行潤洗，需要進行具體問題具體分析。如果對于吸收池的待測液是進行初次使用，那么為了更好地對吸收池進行維護和保養，也為了更大程度上減少干玻璃面對于顏色的吸附能力，以方便在使用后對吸收池進行清洗，那么需要先采用純凈水對其潤洗一遍，然后再采用待裝溶液潤洗2～3遍，如果在這之后，利用這個吸收池裝與之前濃度相近[5]，或者比之前的濃度更高的溶液的時候，那么就能夠直接采用待裝溶液潤洗2～3遍。采用標準曲線法進行測量，如果先對其標準溶液的吸光度進行測量，那么當對其樣品溶液進行測量的時候，因為其測定的樣品溶液的濃度比最后一個標準溶液的濃度更低，或者是不可知，那么，建議先采用純凈水進行潤洗，之后采用待裝溶液進行潤洗2～3遍。

3.2關于分光光度計吸收池的裝液、擦拭和放置問題

當對吸收池進行完潤洗后，便可以將待測溶液注入其中，一般高度為其2/3或3/4處，有一些使用者，可能會擔心注入量不夠，進而對其測定的結果產生影響，所以在裝液的時候，通常會出現裝液過滿的情況，而裝液太滿，將會對其測定的結果產生一定的影響，有時候可能會腐蝕儀器。為了有效的避免此情況發生，使用者在進行測試的時候，可以將一張白紙，插入在吸收池座的通光道中，同時在可見波長下，對單色器產生給溶液吸收的單色光的光斑大小和位置進行觀察，以便于做到心中有數[6]。也就是說，其所注入吸收池內的溶液的液面高度，比吸收池座上透光窗的上邊緣高即可以。當將溶液注入吸收池以后，可以利用差勁，沿著同一方向輕輕擦拭器皿外壁的溶液，確保無痕跡。但是擦鏡紙的吸水能力較差，如果吸收池外壁的溶液較多，在進行擦拭之前，可采用干濾紙進行吸干處理，也可以采用毛巾替代擦鏡紙，但是這樣可能會損傷透光面，對于體測量結果造成一定的誤差。因此將吸收池放置于吸收池座架時需要注意兩個問題，首先，確保同套吸收池及位置具有一致性，一般情況下會將吸收池安置在其左邊或是右邊，如果將吸收池垂直放入吸收池座中，那么需要保證其靠近單色器出孔光的一側，第二個是需要確保每一個吸收池進光方向的問題，一般來說，需要根據吸收池毛面上所標的箭頭方向進行統一安放[7]。如果不存在箭頭標記，那么在對吸收池進行校正的時候，應該將沿著筆標上箭頭的方向作為進光方向。

3.3關于分光光度計吸收池成套性檢驗和處理問題

如果使用新的吸收池，或者在吸收池使用了一段時間之后，必須例行成套檢驗，檢驗方法是，選擇同套的4個吸收池，在其中注入蒸餾水，對其進行擦拭，當擦拭完成之后，按照所標箭頭的方向放入吸收池中并予以固定。接著對其測長波長進行調節，同時將第一個吸收池作為參比。但是指針是電表讀數的，可以利用透射比最大的作為參比，進而對另外3個吸收池的透射比進行測定。按照測定規程對吸收池成套進行檢驗，也就是在同一光景的吸收池當中，其蒸餾水的位置需到達222 nm或440 nm處[8]。同時調整一個吸收池的透射比為100%，對其他各個吸收池的透射比予以測定，其間的差值就是吸收池的配套性。如果吸收池尚在使用之中，那么就需要對其測定的準確度予以考慮，需要在特定波長下予以徹底檢驗。如果對于樣品的兩個分組采用雙波長測定，那么需要分別在兩個波長處進行檢驗和矯正。需要做好對成套性檢驗不合格的吸收池的處理工作，首先對其進行清洗然后進行再次檢驗，不合格的吸收池可采用(1+1)鹽酸和等體積的乙醇混合液進行浸泡，時間大約為1 h。同時可以采用自來水對其進行沖洗，然后采用蒸餾水進行洗滌，確保洗干凈，第二個便是需要對誤差較大的進行剔除，只選擇合格的部分吸收池予以測定。

3.4關于分光光度計吸收池使用之后的處理問題

關于分光光度計吸收池使用之后，其處理問題相對較為簡單，需要采用自來水對其立即沖洗，確保沖洗干凈，之后采用蒸餾水對其潤洗，然后予以安置，待吸收池被晾干之后，放置于吸收池盒內予以保存。在實際的使用過程中，很多操作人員往往僅僅將待測液倒掉，然后經采用蒸餾水進行潤洗，但實際上，這種做法是非常不科學的。

4　關于分光光度計吸光度測定重復性的問題

在采用分光光度計進行測定的時候，如果發現同一個溶液在不同的時間里，其測定的結果并不相同，這只能說明測量的重復性不好，分析其重復性不好的原因，可能是存在測定錯誤的因素，當然除此之外也存在著其他的因素。因為儀器的預熱時間不夠，便可能造成這種問題，所以對這種問題進行解決的方法是，需要對預約的時間予以延長，或者采用正確的預熱方法，對其進行預熱[9]。同時，如果光電轉換器因為長時間的使用，導致其光電轉換效率發生了改變，也能夠導致分光光度計吸光度測定存在重復性。在這種情況下，標準的溶液和待測溶液的吸光度都會一樣變低，因此進行相對定量的時候對結果產生的影響會很小。對于這一類的儀器，建議連續的使用時間不應該超過3 h，如果需要對其進行長時間的使用，那么需要間歇30 min。

5　關于分光光度計使用過程中的其他問題分析

在采用分光光度計進行測量的時候，其測量過程中可能存在著一些不良操作，或者是不利于儀器的維護和保養的操作，那么在此過程中使用者需要盡力避免這種情況發生。比如說在儀器的上方操作時，如倒入溶液或是將拿出來的吸收池放在儀器的面板上，或是在實驗室當中對于不同儀器的吸收池的混用情況，都可能造成儀器的損壞，或對儀器的準確性產生一定的影響，不利于測量的正常進行。

同時對于分光光度計的使用也存在著防塵和防潮的情況，通常情況下來說，分光光度儀本身會隨機帶有一只塑料布罩，在不使用儀器的時候，可利用布罩將整個儀器罩住，相對來說這是一種非常好的防塵方法。但是通過實踐可以發現，在實驗室當中，一般都不會采用塑料部長對其進行覆蓋，通常會采用一塊普通的布，或是利用普通的布做成部長來覆蓋儀器，這樣即防塵的效果便不會像其所附帶的塑料布罩那樣理想。而且塑料布罩之中放入了幾袋防潮硅膠，這能夠起到延長防潮的功效。防潮的時候，如果儀器并沒有防潮干燥筒，需要對儀器經常進行常規的檢查，如果發現出現變色反應，應該需要予以必要的處置。

對于長期不使用的分光光度計，需要定期對其進行開機，這樣能夠更好的進行除潮，比如說每隔一個月，對其進行通電預熱0.5 h，這樣就能夠確保整機處在干燥的狀態下，可以有效地對其電子元件的性能與維護。

6　結　語

分光光度計是實驗室當中經常使用到的儀器，在現實情況中，很多操作者并不能熟練地對分光光度儀進行操作，甚至存在著錯誤性的操作，一方面來說，這會造成檢驗結果的不準確，從另一方面來分析，也大大的損耗了分光光度計的壽命。仔細分析，造成這種情況的原因是多方面的。比如說，這和操作者自身的習慣與認知存在著很大關系，因此作為相關方面的工作人員，必須熟練的掌握分光光度計的使用情況，明確其在使用過程中的相關問題，只有這樣才能夠更好的將分光光度計應用到實際當中，更好的指導實際的工作。此外，筆者也相信，隨著技術的不斷深入，在不就的將來，分光光度計將會有更加廣泛的應用空間，而且對于其的使用也會更加的便利。

[1]錢驥.檢定紫外可見分光光度計應注意的問題[J].中國計量,2012(08):82-83.

[2]王海軍,寧新霞.紫外可見分光光度技術的應用進展[J].理化檢驗(化學分冊),2012(06):740-745.

[3]楊力榮,鄒倩.紫外可見分光光度計波長不確定度分析[J].計量與測試技術,2011,38(06):61.

[4]楊曉東,李志鋒.紫外可見分光光度計檢測結果的不確定度評定[J].科技信息,2011(20):385-386.

[5]李昌厚.紫外可見分光光度計光度準確度研究[J].分析儀器,2011(05):65-71.

[6]吳文銘.紫外可見分光光度計及其應用[J].生命科學儀器,2009,7(04):61-63.

[7]楊箴立.紫外—可見分光光度計的維護保養與維修[J].河南化工,2009,26(12):51-52.

[8]孔迪,彭觀良,楊建坤,等.紫外可見分光光度計主要技術指標及其檢定方法[J].大學物理實驗,2007,20(04):1-6.

[9]汪正范,潘甦民,姜棟,等.紫外/可見分光光度計的市場分析及前景展望[J].現代儀器,2006,12(01):69-70.

Several Problems Cannot Be Ignored in Spectrophotometer Use

LI Wei

(The 2nd Corps for Non-ferrous Metals and Nuclear Industry Geological Exploration Bureau,Guizhou Liupanshui 553004,China)

The most commonly use in the physical and chemical analysis of the instrument is the spectrophotometer,mainly based on the basic principle of the instrument and on the basis of the interaction between light and matter,when a solution of the collision absorption of radiation material molecules and photons,also can produce a kind of absorption,to measure the size of its absorbance value can be effective exist much of the amount of reaction to a substance.Based on this,several problems existing in the use process of spectrophotometer were mainly analyzed,hoped the results can provide valuable reference for the related areas.

spectrophotometer; the physical and chemical analysis; the instrument

O657

A

1001-9677(2016)011-0172-03