陳年玉米中黃曲霉素B1含量的測定

佟嗣橋遼寧省錦州市錦州中學，遼寧錦州　121000

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陳年玉米中黃曲霉素B1含量的測定

佟嗣橋
遼寧省錦州市錦州中學，遼寧錦州121000

摘要食物中黃曲霉素B1的含量超標是導致癌癥高發的主要原因，國家衛生部門對食品中黃曲霉素B1含量也有明確的規定，（玉米中的最高限量為20μg / L）。本人采用酶聯免疫吸附法[1]測定遼寧錦州地區的玉米中黃曲霉素B1的含量，從而幫助我們了解該地區玉米中的黃曲霉素B1是否超標。

關鍵詞玉米；黃曲霉素B1；酶聯免疫吸附法

黃曲霉素是黃曲霉菌（AF）、黑曲霉菌及寄生曲霉菌等真菌的次級代謝產物。到目前為止，黃曲霉素的已知亞型已達20余種，其中AFG1、AFG2、AFB1和AFB2 為4種最基本的類型。AF廣泛分布于土壤、各類動植物食品和堅果中，尤其是以玉米和花生中含量最多。AF具有極強的致癌及致突變作用，1993年國際癌癥研究機構將AF定為Ⅰ類致癌物[2-3]。長期、過量攝入含有AF的食物，可誘發腎癌、卵巢癌、骨癌、肝癌和食道癌在內的多種癌癥[4]。在各種食品中以黃曲霉毒素B1最為多見，其毒性和致癌性也最強[5]。AF進入體內后，危害人類健康。為了家鄉人民的健康，本研究擬對遼寧錦州境內的新鮮及陳年玉米中黃曲霉素B1含量的測定，檢測其中的黃曲霉素B1是否超標，在一定程度上有助于人們購買優質的玉米。

1　實驗目的

錦州市新鮮及陳年玉米中的AFB1的含量。

2　實驗原理

利用酶聯免疫吸附法檢測玉米中的AFB1含量，酶聯免疫反應體系包括：含有aflatoxin抗體的酶標板、aflatoxin酶標結合物、aflatoxin標準液和玉米樣本提取液。aflatoxin標準液和玉米樣本提取液中的aflatoxin與酶標結合物競爭結合aflatoxin抗體，將未結合的酶標結合物洗去后加入底物，無色的底物變為藍色，然后后加入終止液，顏色逐漸變為黃色，最后利用Stat Fax 303 Plus Microstrip Reader 液晶顯示酶標儀測定樣品中aflatoxin的含量。

3　實驗材料及實驗儀器

1）Agra Quant (4-4oppb)黃曲霉素檢測試劑盒。

2）Stat Fax 303 Plus Microstrip Reader 液晶顯示酶標儀，230V、50Hz～60Hz。

3）70%的甲醇溶液。

4）試管。

5）新鮮、儲存半年、1年、1.5年、2年的玉米粉各5.0g。

4　取樣

稱取上述玉米粉各5.0g并分別加入標記有1、2、3、4和5的試管中，依次加入70%的甲醇溶液30ml，充分震蕩混勻5min后，用濾紙過濾，棄去渣滓。

5　檢測

1）首先將100μl酶標結合物加入稀釋孔中，然后加入50μl樣品充分混勻，最后吸取上述樣品100μl至抗體包被的孔中。

2）37℃溫箱孵育15min，ddH2O清洗5遍后加入100μl底物。3）37℃溫箱孵育5min后加入100μl反應停止液。4）利用Stat Fax 303 Plus Microstrip Reader液晶顯示酶標儀測定樣品中aflatoxin的含量。

5）以此類推再分別檢測其他編號試管中樣品中黃曲霉素的含量。

6 結果

1）樣品中黃曲霉素B1含量（μg/L）=儀器讀數x稀釋倍數。

2）儀器讀數及實際含量

1號管　2號管　3號管　4號管　5號管儀器讀數　6.61　7.53　8.02　9.11　11.21實際含量　46.27　52.71　56.14　63.77　78.47單位：μg/L

3）散點圖

4）計算

=2.5

=610.5165

=37.73

r==0.965758 5）統計推斷

:，即玉米中黃曲霉素B1的含量和玉米存儲的時間無直線相關關系。

:，即玉米中黃曲霉素B1的含量和玉米存儲的時間有直線相關關系。

=6.447348

n-2=3

確定P值，查t界值表得P，按P水準，拒絕，接受，可以認為玉米中黃曲霉素B1的含量和玉米存儲的時間有直線相關關系，且為正相關。

7　結論

實驗數據顯示：所有受試的5種玉米中的黃曲霉素B1的含量均已超出國家衛生標準（玉米中的最高限量為20μg/L）。

通過統計學分析，可得出玉米中黃曲霉素B1的含量和玉米的存放時間存在直線相關關系，即玉米中黃曲霉素B1的含量隨著所玉米儲存時間的延長兒增加，兩者呈正比關系。

所以我們在購買或食用玉米時，一定要查明生產日期，盡可能購買當年產的玉米，以減少黃曲霉素B1的攝入，進而降低癌癥的發病率。

參考文獻

[1]酶聯免疫吸附法測定黃曲霉素B1的，2004.

[2]Luke C，Price T，Roder D． Epidemiology of cancer of the liver andintrahepatic bile ducts in an Australian population．Asian Pac J Cancer Prev，2010，11( 6) : 1479-1485．

[3]Milita NM，Mihaescu G，Chifiriuc C．Aflatoxinshealth risk factors．Bacteriol Virusol Parazitol Epidemiol，2011，1（1）：19－24．

[4]Chen SY，Chen CJ，Chou SR，et al．Association of aflatoxin B(1) -albumin adduct levels with hepatitis B surface antigen status among adolescents in Taiwan．Cancer Epidemiol Biomarkers，2001，10(11)：1223-1226．

[5]Liu R，Jin Q，Huang J，et al． In vitro toxicity of aflatoxin B(1) and its photodegradation products in HepG2 cells． J Appl Toxicol，2011，［Epub ahead of print］

中圖分類號O6-3

文獻標識碼A

文章編號1674-6708（2016）155-0140-01