HPLC法測定注射用鹽酸苯達莫司汀含量

吳淑萍，趙華勇，戴國彪（.杭州領業醫藥科技有限公司，浙江　杭州　3008；.聚光科技（杭州）股份有限公司，浙江　杭州300）

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HPLC法測定注射用鹽酸苯達莫司汀含量

吳淑萍1，趙華勇2，戴國彪2
（1.杭州領業醫藥科技有限公司，浙江杭州310018；2.聚光科技（杭州）股份有限公司，浙江杭州310012）

摘要：目的：建立注射用鹽酸苯達莫司汀中鹽酸苯達莫司汀含量測定方法。方法：高效液相色譜法測定，以十八烷基鍵合硅膠為色譜柱，以甲醇-0.01 mol/L硫酸鈉（用稀硫酸調pH 至3.40）（40∶60）為流動相，流速為1.0 mL/min，檢測波長為230 nm，外標法定量。結果：鹽酸苯達莫司汀在溶液濃度為82.88～124.32 μg/mL之間時，線性關系良好（γ＝0.9995）。低、中、高濃度的平均回收率99.71%，RSD為0.52%（n=9）。結論：該方法快速簡便，準確，重復性好，可用于注射用鹽酸苯達莫司汀的含量測定。

關鍵詞：鹽酸苯達莫司??；高效液相色譜法；含量測定

鹽酸苯達莫司?。╞endamustine hydrochloride）是由Merckle公司開發的烷化抗腫瘤藥物，于2003年l0月在德國上市，商品名為Ribomustin[1]。Salme-dix公司得到授權在美國和加拿大開發，商品名為Treanda（SDX-105），目前正處于Ⅲ期臨床。臨床用于乳腺癌、慢性淋巴細胞性白血病、非霍奇金淋巴瘤（Ⅱ～Ⅳ期）、霍奇金病、漿細胞瘤的單獨治療或聯合用藥。臨床應用表明：其單獨治療或聯合用藥治療乳腺癌，療效確切，能明顯降低復發率與死亡率，且不良反應小，安全性好[2]。至今未見其含量測定的報道。本文參考其類似物的測定方法建立了HPLC法測定其含量，方法準確可靠，操作簡便[3]。

1　儀器與試藥

儀器：島津UV-2450可見紫外分光光度儀；島津LC-10ATVP液相色譜儀（紫外檢測器），工作站為CLASS-VP Ver. 5.0。

試藥及試劑：注射用鹽酸苯達莫司?。ㄅ?0070612、20070615、20070618），自制；鹽酸苯達莫司汀對照品（批號20070302-1，含量：99.6%），自制；甲醇（色譜純，SK Chemicals）；三乙胺（杭州高晶精細化工有限公司，20071025）；硫酸（杭州大方化學試劑廠，070905）；硫酸鈉（上?；瘜W試劑有限公司，021020）；磷酸（杭州化學試劑有限公司，20030902）；磷酸二氫鈉（上海三鷹化學試劑有限公司，040319）；娃哈哈純凈水。

2　方法與結果

2.1色譜條件

色譜柱：Agilent ZORBAX SB-CN（4.6 mm× 250 mm，5 μm）；流動相：甲醇-0.01 mol/L硫酸鈉（用稀硫酸調pH 3.40）（40:60）；檢測波長：230 nm；流速：1.0 mL/min；進樣量：10 μL。

2.2溶液配制

對照品溶液的制備：取對照品約10 mg，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。

供試品溶液的制備：取裝量差異項的內容物適量，精密稱定，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1 mL中約含0.1 mg的溶液，作為供試品溶液。

2.3空白試驗

取甘露醇，精密稱定，加甲醇稀釋成每1 mL中含甘露醇0.12 mg的溶液，作為空白試液。取10 μL，注入高效液相色譜儀。結果表明，空白試液對鹽酸苯達莫司汀的HPLC測定無干擾，見圖1。

2.4標準曲線

取鹽酸苯達莫司汀對照品（20070320-1）適量，加甲醇溶解并定量稀釋制成每1 mL中約含0.50 mg的溶液，精密吸取適量，分別用甲醇稀釋制成每1 mL約含80、90、95、100、105、110、120 μg的系列濃度的標準溶液。

精密量取標準溶液各10 μL，分別注入高效液相色譜儀，測量鹽酸苯達莫司汀色譜峰面積。以鹽酸苯達莫司汀的峰面積（A）對濃度（C）進行線性回歸，結果見表1。

表1　鹽酸苯達莫司汀含量測定線性試驗結果

鹽酸苯達莫司汀含量測定線性圖

回歸方程：

A＝47411×C（μg/mL）+277344

γ＝0.9995

結果表明：濃度在82.88～124.32 μg/mL的范圍內，鹽酸苯達莫司汀峰面積與濃度線性關系良好。

2.5儀器精密度

精密量取供試品溶液10 μL，注入高效液相色譜儀，見圖2，記錄鹽酸苯達莫司汀色譜峰面積。連續測定六次，計算精密度。以峰面積計算RSD為0.83%。結果表明本法精密度良好。

圖1　

圖2　

2.6日內和日間精密度

取供試品溶液和對照品溶液，精密量取10 μL，注入高效液相色譜儀，以外標法計算含量。一日內分別測定6次，計算日內偏差，日內偏差為0.42%。測定多日，計算日間偏差，日間偏差為0.29%。

2.7穩定性試驗

取供試品溶液，分別在0 h、1 h、2 h、4 h、6 h、8 h注入液相譜儀10 μL，測定鹽酸苯達莫司汀峰面積。以峰面積計算RSD為1.00%。表明本品在8 h內穩定，能夠滿足檢測條件。

2.8回收率試驗

精密稱取鹽酸苯達莫司汀對照品（批號：20070320-1）適量，加入處方量輔料，用甲醇定量稀釋制成每1 mL中約含鹽酸苯達莫司汀0.08 mg/mL、0.1 mg/mL、0.12 mg/mL的溶液各三份，精密量取10 μL注入液相色譜儀，記錄色譜圖；另取鹽酸苯達莫司汀對照品適量，加甲醇稀釋成每1 mL約含鹽酸苯達莫司汀0.1 mg的溶液，同法測定，計算回收率為99.71%，RSD為0.52%。結果見表2。

表2　注射用鹽酸苯達莫司汀含量測定回收率測定

2.9供試品含量測定

分別取對照品溶液與供試品溶液進樣測定，按外標法以峰面積計算鹽酸苯達莫司汀的含量，結果見表3。

表3　注射用鹽酸苯達莫司汀含量結果

3　討論

3.1檢測波長的選擇

取對照品，加甲醇稀釋成每1 mL中約含5 μg的溶液，在200～400 nm的波長范圍內掃描，結果注射用鹽酸苯達莫司汀最大吸收波長為232 nm，見圖3，確定檢測波長為230 nm。

圖3　

3.2流動相的選擇

流動相①：以甲醇-0.02 mol/L磷酸二氫鈉（含0.3%三乙胺，用磷酸調pH 3.0）（40:60）為流動相，流速為1.0 mL/min，測定結果表明鹽酸苯達莫司汀在10 min左右出峰，峰形不對稱。

流動相②：以甲醇-0.01 mol/L硫酸鈉（用稀硫酸調pH至3.40）（40:60）為流動相，流速為1.0 mL/min，測定結果表明鹽酸苯達莫司汀在12 min左右出峰，峰形對稱。

采用文獻1的色譜條件測定鹽酸苯達莫司汀含量。

3.3色譜柱的選擇

分別選用依利特HYPERSIL ODS2（4.6 mm× 250 mm，5 μm），Agilent ZORBAX SB-C18（4.6 mm× 250 mm，5 μm），Agilent ZORBAX SB-CN（4.6 mm× 250 mm，5 μm）色譜柱，同法進行測定，其結果基本一致，表明十八烷基鍵合硅膠對鹽酸苯達莫司汀含量測定具有較好的通用性。

3.4溶劑的選擇

鹽酸苯達莫司汀易水解，在甲醇中，在室溫下8 h內溶液穩定性良好；而在水溶液中，在室溫下2 h內溶液穩定性良好。根據其易水解性質，且參考文獻1，所以用甲醇作為溶劑。

4　結論

本法測鹽酸苯達莫司汀，以十八烷基鍵合硅膠為色譜柱，以甲醇-0.01 mol/L硫酸鈉（用稀硫酸調pH至3.40）（40:60）為流動相，流速為1.0 mL/min，檢測波長為230 nm，外標法定量。在溶液濃度為82.88～124.32 μg/mL之間時，線性關系良好（γ＝0.9995）。低、中、高濃度的平均回收率99.71%，RSD為0.52%（n=9）。建立了高效液相色譜法測定鹽酸苯達莫司汀含量及有關物質，取得了較好的結果，可用于鹽酸苯達莫司汀原料藥的質量控制。

參考文獻：

[1]高麗梅，汪燕翔，宋丹青.鹽酸苯達莫司汀的合成[J]．中國新藥雜志，2007，16（23）：1960-1961,1970．

[2]任?。}酸苯達莫司?。╞endamustine hydrochloride）[J]．中國藥物化學雜志，2008，18（5）：399．

[3]湯浩，吳曉明，彭蘇. HPLC法測定鹽酸苯達莫司汀含量及有關物質．藥學與臨床研究，2009，17（4）:303-305．

中科院青島能源所開發出石墨烯基鋰離子電容器

隨著能源危機以及環境問題的日趨嚴重，社會對基于能源互聯網的近零碳排放區推廣非常期待，這對分布式儲能技術提出更高要求。同時，新能源電動汽車、高鐵/城市軌道交通制動能量回收等領域也迫切需求高能量密度、高功率密度兼顧的電化學儲能器件。鋰離子電容器是一種兼具雙電層超級電容器高功率特性與較高能量密度特點的電化學儲能器件，具有非常好的發展前景。因此，國家工業和信息化部《中國制造2025》把高能量密度（大于20 Wh/kg）動力型電容列為重點支持領域。然而，由于相關技術被國外公司壟斷，國內相關企業還未掌握核心技術。近年來，中國科學院青島生物能源與過程研究所青島儲能產業技術研究院研究團隊圍繞高能量密度鋰離子電容器關鍵材料與核心技術，開展了一系列原創性研發工作。12月22日，青島儲能院研發出的新型石墨烯基高能量度鋰離子電容器技術在北京通過了由中國石油和化學工業聯合會組織的專家鑒定和評價。鑒定委員會專家認真聽取了工作報告、研究報告、第三方測試報告、應用報告及查新報告，審查了有關技術資料，通過質詢、答辯和討論，一致認為該項成果創新性強，總體達到國際先進水平，具有較好的推廣價值，并建議盡快推進產業化進程，滿足國家需求。該技術突破了石墨烯復合電極設計與批量制備、可控均勻預嵌鋰、充放電脹氣抑制及特殊集流極片涂布等技術難題，在實踐中總結出石墨烯基鋰離子電容器制備技術和工藝，并自力更生設計建設了國內第一條鋰離子電容器的中試生產線，研發出了最高容量3500 F/4V型鋰離子電容器單體，器件的能量密度高達55 Wh/L（20.5 Wh/kg）、功率密度高達5 kW/L，循環性能好（10 000次循環容量保持率95%以上），低溫性能良好（-30℃容量為常溫的72%以上）的鋰離子電容器，相關器件已通過原輕工業部蘇州電源所的第三方權威檢測。圍繞該儲能器件的關鍵材料和核心技術，青島儲能院已獲得授權發明專利9項，具有自主知識產權。值得說明的是，2015年初青島儲能院就已經利用該器件構建48 V系統在電動車電源等方面進行了示范應用，最近青島儲能院正爭取把此技術盡快用于軌道交通領域。

(來源：http://www.cas.cn/syky/201512/t20151231_4509413.shtml)

Determination of Bendamustine Hydrochloride for Injection by HPLC

WU Shu-ping1，ZHAO Hua-yong2，DAI Guo-biao2
（1.Hangzhou Solipharma Pharmaceutical Solid State Science & Enabling Technology Co., Ltd., Hangzhou，Zhejiang 310018，China; 2.Focused Photonics（Hangzhou）Inc., Hangzhou，Zhejiang 310018，China）

Abstract:Objective: To establish a method for determination of bendamustine hydrochloride for injection by HPLC. Methods: HPLC was employed by using C18as the column and methol-0.01 mol/L sodium sulfate（pH was adjusted by dilute sulfuric acid 3.40）（40:60）as the mobile phase. Flow rate was 1.0 mL/min; the detection wavelength was 230 nm. Results: A good linearity for determination of bendamustine was obtained in the range from 82.88～124.32 μg/mL（γ＝0.9995）.The average recoveries of low，medium and high concentrations was 99.71%，with RSD 0.52%（n=9）. Conclusion: The method is simple and fast，the results are accurate and reproducible for the determination of bendamustine hydrochloride for injection.

Keywords:bendamustine hydrochloride；HPLC；content determination

作者簡介：吳淑萍（1984-），女，工程師，從事新藥質量管理和資料申報工作。E-mail:804381792@qq.com。

收稿日期：2015-08-23

文章編號：1006-4184（2016）1-0048-04