淺議生化類體外診斷試劑開瓶穩定性

張力心

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淺議生化類體外診斷試劑開瓶穩定性

張力心

【摘要】目的 探討對檢測結果的影響，為生化試劑的臨床使用提供必要的參考。方法 選取3種生化試劑盒，以朗道質控品為檢測樣本，用深圳邁瑞BS-800全自動生化分析儀進行檢測，觀察開瓶時間對檢測結果的影響。結果 開瓶時間對總蛋白和肌酐的正確度影響較大。結論試劑開瓶后應密閉低溫儲存，盡快使用，且每次檢測前應重新校準。

【關健詞】開瓶穩定性；體外診斷試劑；正確度

作者單位：401147 重慶醫療器械質量檢驗中心；重慶市醫療器械質量與安全控制工程技術研究中心

隨著我國檢驗技術的發展，生化試劑已成為化學試劑的一大類。目前，我國共有診斷試劑生產企業400多家，共生產商品2 000多種［1］。現階段由于各廠家的生產規模、技術水平和產品質量參差不齊，且生化試劑受熱、受潮、受光后，試劑中的某些組分易分解、失活，于是造成生化類試劑保存期較短，儲存條件也比較苛刻。然而，基層醫院由于業務量較小，試劑開瓶后往往需要較長時間才能使用完。為了分析試劑在開瓶后放置在全自動生化分析儀中的時間長短對檢測結果的影響，本文對總蛋白試劑盒（TP）、丙氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒（ALT）、肌酐檢測試劑盒（Cre）進行了開瓶穩定性研究，旨在對生化試劑的臨床使用提供必要的參考。

1　材料與方法

1.1儀器

BS-800全自動生化分析儀（深圳邁瑞生物醫療電子股份有限公司生產）。

1.2材料

選取3種劑盒，進行開瓶穩定性實驗，試劑盒信息見表1，校準品為朗道復合校準血清（批號：938UN），質控品為朗道復合質控血清（批號：725UE），TP、ALT、Cre的參考值分別為46.0 g/L、 139 U/L、366 μmol/L。

1.3方法［2-5］

將上述試劑置入生化分析儀中，使儀器處于開機狀態以保持試劑盤溫度，每天測定質控品3次，取平均值作為檢測結果。觀察試劑檢測結果的變化，以相對偏差超出10%為失控的判斷標準。相對偏差的計算公式為：

2　結果

將3種試劑連續測定21 d，檢測結果見表2。

3　討論

3.1總蛋白試劑盒

從表2可看出，試劑前7 d的檢測結果基本無變化；一周后，檢測結果隨時間的增加開始逐漸減小；到21 d時，檢測結果的相對偏差達到約10%的臨界點，說明該TP試劑的開瓶有效期為21 d。分析原因，由于TP試劑盒采用雙縮脲反應原理，蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構類似的肽鍵，堿性條件下，雙縮脲可與Cu2+生成紫色的絡合物，NaOH在反應中的作用為營造堿性的反應環境。當試劑開瓶后置于生化儀后，空氣中的CO2會不斷溶入試劑，中和其中的NaOH，使試劑的pH值下降，從而影響紫色絡合物的生成，導致檢測結果的降低。

3.2丙氨酸氨基轉移酶試劑盒

從表2可看出，試劑開瓶21 d后，檢測結果無變化，相對偏差較小，說明開瓶時間對試劑檢測結果的正確度基本無影響。但將放置21 d后的試劑進行線性范圍檢驗時發現，該試劑盒的線性上限由800 U/L下降至300 U/L，線性范圍變小。分析原因，可能是由于試劑中的NADH組分的保存溫度為-20℃，易被空氣中的氧氣氧化，從而導致底物濃度不足，線性范圍變小。

表1　試劑盒的基本信息

表2　試劑盒開瓶穩定性的實驗結果

3.3肌酐檢測試劑盒

從表2可看出，該試劑盒的檢測結果隨開瓶時間的增加而逐漸變大，相對偏差在15 d時接近10%的臨界點。分析原因，該肌酐檢測試劑盒采用苦味酸法，在堿性條件下，肌酐與苦味酸生成橘紅色的苦味酸-肌酐復合物，NaOH在反應中的作用為提供堿性的反應環境，使血清樣本中的肌酐和其它干擾物質與苦味酸的反應速度不同，從而準確的測定肌酐。當試劑開瓶后置于生化儀后，空氣中的CO2與試劑中的NaOH反應，使試劑的抗干擾能力下降，測試結果為肌酐與干擾物濃度之和，因此試劑盒放置時間越長，檢測結果偏大越明顯。

4　結論

當試劑中含有堿性物質時，長時間放置于生化分析儀中，空氣中的CO2會逐漸消耗掉試劑中的堿性成分，從而影響檢測結果的正確度。因此對此類試劑，每次使用之后應蓋緊瓶蓋，避免接觸空氣。由于生化分析儀的試劑盤的溫度范圍一般為5℃～15℃，因此，當試劑中含有NADH之類的對溫度敏感的組分時，試劑使用后應放置在2℃～8℃冰箱中儲存，并盡快使用。否則試劑在檢測高值樣本時，結果的正確度將不能保證。試劑開瓶7 d左右，檢測前應重新校準，以提高檢測結果的正確度。

參考文獻

［1］ 毛省俠，郭準． 淺談體外診斷試劑質量體系中企業參考品的管理［J］． 中國醫療器械信息，2011，17（10）: 46-53．

［2］ 葉應嫵，王毓三，申子瑜． 全國臨床檢驗手冊［M］． 南京: 東南大學出版社，2006: 452-456．

［3］ 王霞文． 臨床生化檢驗技術［M］． 南京：南京大學出版社，1995: 180-182．

［4］ 陸永綏，李清華，張偉民． 臨床檢驗自動化分析標準操作規程［M］．浙江：浙江大學出版社，2006: 9．

［5］ GB/T 26124-2011，臨床化學體外診斷試劑（盒）［S］． 2011．

Analyzing on the Operation Life of Biochemical Diagnostic Kits

ZHANG LixinChongqing Quality Chongqing Quality Testing and Inspection Center for Medical Devices；Chongqing Engineering Research Center For Quality and Safety Control of Medical Devices，Chongqing 401147，China

【Abstract】

Objective By studying on the influence of decapping time on results，this paper offers a guidance on clinical application of biochemical diagnostic kits． Methods With the Randox control serum as the sample，correctness of decapping time on results is tested by mindray’s BS-800 automatic biochemical analyzer． Results Decapping time of total protein and creatinine reagent greatly affect the testing results． Conclusion Having been decapped，the reagent should be stored in low temperature，and a calibration test should be run．

【Key words】Decapping life，In-vitro diagnostic kit，Correctness

通訊作者：張力心，E-mail：372619420@qq．com

doi:10．3969/j．issn．1674-9316．2016．01．099

【中圖分類號】R97

【文獻標識碼】A

【文章編號】1674-9316（2016）01-0135-02