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魚腥草注射液對急性咽炎治療作用的實驗研究

2016-03-27 01:47:16王君
中國藥業 2016年3期
關鍵詞:小鼠模型

王君

(浙江大學校醫院,浙江 杭州 310027)

魚腥草注射液對急性咽炎治療作用的實驗研究

王君

(浙江大學校醫院,浙江 杭州 310027)

目的 觀察魚腥草注射液對急性咽炎大鼠的抗炎作用。方法 運用小鼠耳腫脹試驗評價魚腥草注射液的抗炎消腫作用;采用15%氨水制備大鼠急性咽炎模型,造模2 d后,連續給藥5 d,測定大鼠血常規,并做咽部黏膜病理切片,評價魚腥草注射液抗急性咽炎的作用。結果 魚腥草注射液可抑制小鼠耳腫脹,降低急性咽炎模型大鼠血漿中白細胞含量,改善急性咽炎大鼠模型咽部黏膜病理變化。結論 魚腥草注射液具有較好的抗急性炎癥,緩解急性咽炎作用。

魚腥草注射液;急性咽炎;抗炎;病理切片

臨床急性咽炎、急性鼻竇炎在上呼吸道感染中非常常見,每年約有25億人因簡單的呼吸道感染就診其私人醫師,并有1%~2%的醫院患者因急性咽炎到醫院就醫[1]。雖然臨床具有較好的治療建議,但研究發現,對于上呼吸道感染及支氣管炎的治療,很大一部分存在不必要的抗菌藥物處方[2]。中成藥在治療中普遍具有不良反應少的優點。王慈等[3]總結分析急性咽炎中醫藥治療近況發現,中醫藥治療急性咽炎方法多,對于減少抗生素濫用具有較大幫助。魚腥草注射液主要成分為魚腥草素、甲基正壬酮、月桂烯等,每1 mL相當于含魚腥草2 g,主要用于治療病毒性感冒、上呼吸道感染、急慢性扁桃體炎、肺炎、氣管炎等。胡汝曉等[4]總結,魚腥草主要有抗病毒、增強機體免疫力、抗過敏、鎮咳、利尿作用,但個別患者存在過敏反應。曾斌等[5]比較3種中藥注射液對小兒上呼吸道感染的臨床療效,發現新魚腥草素鈉治療的臨床總有效率為95.57%。本試驗中通過小鼠耳腫脹試驗及大鼠急性咽炎模型,探討了魚腥草注射液對急性咽炎大鼠模型的功效及作用。

1 材料與方法

1.1 藥物與動物

魚腥草注射液(山西兆益生物有限公司,批號為20130909,規格為每支10 mL,相當于原生藥20 g);吸入用布地奈德混懸液(商品名普米克令舒,AstraZeneca Pty Ltd.,批號為LOT 31540115.11,規格為每支2 mL/mg);氨基甲酸乙酯(商品名烏拉糖,國藥集團化學試劑有限公司,批號為30191228,規格為每瓶500 g);氨水(杭州瓶窯和順化工試劑廠,批號為20101224,規格為每瓶500 mL),甲醛(上海三鷹化學試劑有限公司,批號為100301,規格為瓶500 mL)。ICR小鼠40只,清潔級,雌雄各半,體重(20±2)g,由上海西普爾必凱實驗動物有限公司提供,生產許可證號SCXK(滬)2008-0016。SD大鼠40只,清潔級,雌雄各半,體重(200±20)g,上海西普爾必凱實驗動物有限公司提供,生產許可證號SCXK(滬)2013-0016。

1.2 方法

1.2.1 小鼠耳腫脹試驗[6]

取小鼠40只,適應性飼養1周,溫度(26±2)℃,相對濕度50% ~60%,12 h/12 h交替照明,自由采食飲水。隨機分成空白對照組、模型對照組、陽性對照組、魚腥草注射液組,各10只。4組小鼠右耳涂抹藥液50 μL,陽性對照組及魚腥草注射液組取適量藥液涂抹于小鼠右耳,正常對照組及模型對照組涂抹同體積蒸餾水。給藥后30 min用棉簽蘸水輕輕擦拭右耳,擦去殘留藥物,然后用20 μL二甲苯涂布于小鼠右耳前后兩面,涂致炎劑30 min后,將小鼠處死,剪下雙耳用7 mm直徑打孔器分別在同一部位打下圓耳片,天平稱重。每只小鼠右耳片質量減去左耳片質量即得腫脹度。

1.2.2 急性咽炎動物造模及給藥[7]

取 SD大鼠40只,適應性飼養1周,溫度(26± 2)℃,相對濕度50% ~60%,12 h/12 h交替照明,自由采食飲水。隨機分成4組。除空白對照組外,大鼠按造模程度隨機分成模型對照組、陽性對照組、魚腥草注射液組,各10只。模型對照組、陽性對照組、魚腥草注射液組均用喉頭噴霧器將15%氨水噴于大鼠咽部,每天上、下午各噴1次。空白對照組用新的噴霧器噴純水。均連續噴3 d。每天觀察動物咽部的黏膜形態、色澤及分泌物情況等,按造模程度的不同隨機分組,保證各組大鼠急性咽炎模型程度相當。造模第4天開始,陽性藥對照組、魚腥草注射液組分別噴霧給藥。空白對照組及模型對照組每日以等容量的蒸餾水噴霧,1次/天,連續5 d。

1.2.3 觀察指標測定

血常規:給藥 5 d,末次給藥2 h后,10%烏拉坦(1 300 mg/kg)麻醉大鼠,麻醉后下腔靜脈取5 mL血樣本放入含肝素鈉試管中,立即由本院檢驗科檢測。

病理組織切片:給藥5 d,末次給藥2 h后,10%烏拉坦(1 300 mg/kg)麻醉大鼠,立即從環狀軟骨水平剪斷氣管食管,自咽后壁向上分離軟組織至腭帆水平切斷組織,摘取咽部黏膜及黏膜下組織放入預先準備好的10%中性緩沖甲醛溶液中固定48 h以上,取材后經常規脫水,石蠟包埋,6 μm連續切片,HE染色后,在光學顯微鏡下用觀察咽部黏膜以及黏膜下組織[8]。主要觀察指標為組織中有無炎細胞浸潤、血管擴張充血、上皮增生和腺體肥大擴張,并計算各組中病變的數量[9-10]。

1.3 統計學處理

采用SPSS 19.0統計軟件作單因素方差分析,計量資料數據以s表示,行 t檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 對小鼠耳腫脹度及急性咽炎大鼠白細胞的影響

結果見表1。可見,魚腥草注射液可很好地抑制二甲苯致小鼠耳腫脹,且與模型對照組比較差異有顯著性(P<0.01)。在對急性咽炎模型大鼠的治療中,陽性對照組及魚腥草注射液組均可較好地對抗大鼠白細胞水平升高,且與模型對照組比較差異有顯著性(P<0.05)。

表1 魚腥草注射液對小鼠耳腫脹度及大鼠白細胞含量的影響(s,n=10)

表1 魚腥草注射液對小鼠耳腫脹度及大鼠白細胞含量的影響(s,n=10)

注:與模型對照組相比,*P<0.01,▲P<0.05。

組別正常對照組模型對照組陽性對照組魚腥草注射液組小鼠耳腫脹度(g)-0.000 1±0.00 0.004 8±0.00 0.003 0±0.00*0.003 2±0.00*大鼠血白細胞(×109/L)10.00±4.90 13.00±3.98 11.70±15.40*12.10±1.88▲

2.2 對急性咽炎大鼠咽部病理組織的影響

結果見圖1。空白對照組大鼠咽部黏膜光鏡下觀察,黏膜固有層無炎癥細胞浸潤,結締組織較薄,無充血現象,黏液細胞形態正常;模型對照組大鼠咽部黏膜光鏡下觀察,黏膜固有層有大量炎癥細胞浸潤,結締組織增厚,具有明顯的充血現象,固有層不完整,肌纖維紊亂,腺腔擴大黏膜不完整;陽性對照組大鼠咽部黏膜光鏡下可觀察到少量的炎癥細胞浸潤,固有層無充血現象,腺腔正常黏膜完整;魚腥草注射液組大鼠咽部黏膜光鏡下觀察可見極少炎癥細胞浸潤,結締組織幾乎不可觀察到有充血現象,黏膜完整,腺腔無擴張現象。

3 討論

魚腥草民間常見于感冒咳嗽藥方中,藥理學研究亦證實其有抗菌、鎮咳及增強免疫的作用,臨床呼吸科也有應用。本研究中通過小鼠耳腫脹度及大鼠急性咽炎模型試驗,初步探討了魚腥草注射液對急性咽炎的藥效學功效。由試驗結果可見,魚腥草注射液可抑制小鼠耳廓炎性腫脹程度及大鼠炎性灶內白細胞的聚集,可緩解大鼠急性咽炎模型黏膜組織的炎癥病變。提示魚腥草注射液具有較好的抗炎抗腫脹藥效,可見抗炎作用是其治療急性咽炎的重要藥理學作用基礎。但本試驗中采用的是化學致大鼠急性咽炎模型,而日常生活中急性咽炎的發生大多由感染病原微生物所致,因此對于魚腥草注射液在急性咽炎中的抗菌作用有待考察。目前,魚腥草注射液的過敏反應較多,但魚腥草的藥理作用確切,本試驗結果可望為魚腥草中藥制劑在治療急性咽炎中的應用提供一定的理論依據。

[1]Alweis R,Greco M,Wasser T,et al.An initiative to improve adherence to evidence-based guidelines in the treatment of URIs,sinusitis,and pharyngitis[J].Journal of Community Hospital Internal Medicine Perspectives,2014,4(4):1-6.

[2]Gonzales R,Malone DC,Maselli JH,et al.Excessive antibiotic use for acute respiratory infections in the United States[J].Clin Infect Dis,2001,33(6):757-762.

[3]王 慈,郭 裕.急性咽炎中醫藥治療近況[J].遼寧中醫藥大學學報,2012(3):236-238.

[4]胡汝曉,肖冰梅,譚周進,等.魚腥草的化學成分及其藥理作用[J].中國藥業,2008,17(8):23-25.

[5]曾 斌,熊明玲,郭 彬,等.3種中藥注射液對小兒急性上呼吸道感染的療效比較[J].中國藥業,2008,17(14):68-69.

[6]王 斌,趙曉靜,呂 騰,等.黃芩提取物對小鼠耳腫脹和足腫脹的抗炎作用研究[J].陜西中醫學院學報,2014(5):70-72.

[7]王小曉,閆艷倉,王旭丹,等.復方牛蒡子含片的抗炎作用及其對急性咽炎模型大鼠的治療作用[J].中國實驗方劑學雜志,2010,16(11):147-149.

[8]馬曉光,張彩云.清咽噴霧劑對急性咽炎治療作用的實驗研究[J].蘭州大學學報:醫學版,2012,38(1):45-48.

[9]段美秀.中藥咽炎飲抗大鼠急性咽炎的實驗研究[D].錦州:遼寧醫學院,2013.

[10]劉 巖,劉志洋.羅漢果水提液對于急性咽炎模型大鼠的治療作用[J].中國實驗方劑學雜志,2014,20(19):159-162.

Experimental Research on the Efficacy of Yuxingcao Injection in Treating Acute Pharyngitis

Wang Jun
(School Infirmary of Zhejiang University,Hangzhou,Zhejiang,China 310027)

Objective To observe the anti-inflammatory efficacy of Yuxingcao Injection in treating acute pharyngitis.Methods The antiinflammation efficacy of Yuxingcao Injection was evaluated by the rat ear swelling test,judging from the histopathology of SD rat acute pharyngitis model with 15% ammonia.After 2 d of modeling,the administration was continued for 5 d.The blood routine examination of rats was measured,meanwhile the pharyngeal mucosa pathological section of SD rat acute pharyngitis model was detected.Results Yuxingcao Injection could inhibit the rat ear swelling;it had an obvious antipyretic effect and could alleviate the pathological changes on inflammatory mucous membrane in rat acute pharyngitis model.Conclusion Yuxingcao Injection can inhibit the acute inflammation,and it has the alleviating effect of the acute pharyngitis.

Yuxingcao Injection;acute pharyngitis;anti-inflammatory;pathological section

R285.5;R286

A

1006-4931(2016)03-0035-03

王君,女,大學本科,中藥師,主要從事中成藥的臨床研究工作,(電話)0571-87952634(電子信箱)117489274@qq.com。

2015-05-13;

2015-08-22)

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