胚胎性轉錄因子FOXC2調控卵巢癌細胞增殖與侵襲的作用機制

周 星(鄭州大學附屬洛陽中心醫院，河南 洛陽 471099)

胚胎性轉錄因子FOXC2調控卵巢癌細胞增殖與侵襲的作用機制

周 星
(鄭州大學附屬洛陽中心醫院，河南 洛陽 471099)

目的 卵巢癌已經是臨床婦科腫瘤常見腫瘤之一，其發病率逐年走高。其發病機制學說存在多種假說。本文探討了胚胎性轉錄因子FOXC2調控卵巢癌細胞增殖與侵襲的作用機制。方法 對我院2013年7月-2015年7月收治的女性患者的正常卵巢組織標本和癌卵巢組織標本免疫組織化學染色，觀察FOXC2的分布。結果 正常卵巢組織標本中沒有發現FOXC2的表達，在上皮性卵巢癌，交界性漿液性囊腺腫瘤中發現了FOXC2的表達，主要分布在間質血管、腫瘤細胞核等。結論 FOXC2對上皮細胞轉化為間質細胞過程中是關鍵的調控因子之一，可以促進細胞遷徙；可以誘導腫瘤病灶中血管生成，并促進腫瘤細胞的增殖、遷徙。

FOXC2；卵巢增殖；侵襲

1 資料與方法

1.1 研究對象

研究對象為我院2013年7月-2015年7月收治的女性患者的卵巢組織共18例，其中屬于上皮性卵巢癌14例，交界性漿液性囊腺腫瘤3例，正常卵巢組織1例。獲取的組織樣本使用磷酸鹽緩沖液進行清洗，清洗之后浸在福爾馬林中24h固定。

1.2 主要儀器

光學顯微鏡Olympus、環凱牌恒溫水箱、ERM3000 生物組織切片機

1.3 主要試劑

FOXC2 兔抗人多克隆抗體（LSBio）、SP羊抗兔/小鼠免疫組化試劑盒（上海研卉生物科技有限公司）、DAB顯色試劑盒（武漢博士德生物工程有限公司）、甲醛（上海阿拉丁生化科技股份有限公司）、蘇木精（上海邁瑞爾化學技術有限公司）。

1.4 方法

將標本進行HE和免疫組織化學染色。載玻片清洗干凈，進行酸處理24h，然后蒸餾水沖洗干凈，晾干。然后載玻片包被多聚賴氨酸，晾干。取福爾馬林中固定的標本組織進行酒精脫水。脫水的方法采用梯度法，80%酒精、90%酒精、100%酒精從低到高一次脫水；之后二甲苯透明處理。然后進行組織包埋，標本組織石蠟包埋后放在4℃冰箱過夜。將包埋好標本組織的蠟塊進行切片，將切片貼片于載玻片，60-70℃烘箱烘烤100min。將切片中的石蠟利用二甲苯進行脫蠟處理，之后利用從高到低梯度的乙醇進行復水。免疫組織化學染色需要對抗原進行修復，修復的方法采用檸檬酸鹽和微波的方式進行修復。然后，利用3%雙氧水孵育5-10min，消除內源性的過氧化物酶活性。使用滴加馬血清，室溫孵育10min封閉。滴加一抗FOXC2，37℃孵育2h。PBS沖洗5分鐘，共沖洗3次，然后加入連接辣根過氧化物酶的二抗，37℃孵育20min，然后顯色劑DAB顯色，復染，脫水并透明，最后中性樹膠封片。

1.5 觀察數據

觀察FOXC2在卵巢癌細胞、間質血管等的表達。

2 結 果

2.1 正常卵巢組織和交界性漿液性囊腺腫瘤染色結果

觀察正常卵巢組織免疫組織化學染色結果，在切片中并沒有發現棕色深染區域，即FOXC2沒有在正常卵巢組織表達。觀察交界性漿液性囊腺腫瘤切片組織免疫組織化學染色結果，在切片發現棕色深染區域主要分布在血管或者淋巴管和腺體細胞中，即FOXC2在血管或者淋巴管和腺體細胞中表達。

2.2 上皮性卵巢癌染色結果

觀察上皮性卵巢癌組織切片發現，上皮性卵巢癌組織病灶存在大量棕色深染顆粒，即FOXC2在上皮性卵巢癌中大量表達，呈陽性。FOXC2在腫瘤細胞核中大量表達，細胞核體積出現明顯的增大。

2.3 間質血管內皮細胞染色結果

上皮性卵巢癌組織切片和交界性漿液性囊腺腫瘤組織切片中發現FOXC2在間質血管內皮細胞的細胞質中表達強烈。

3 討 論

本研究中發現卵巢腫瘤間質血管有FOXC2表達，這可能是促進新生血管為其惡化腫瘤提供營養。這主要涉及到血管新生的信號通路Notch，該信號通路主要是對血管形成和胚胎時期動脈分化進行調控。FOXC2作為該信號通路上重要的分子，對動脈細胞的分化起著至關重要的作用。FOXC2可以激活Notch配體DLL4的啟動子，Notch和DLL4對動脈細胞的分化有決定性作用。因此，FOXC2通過調控的DLL4蛋白分子可以控制內皮細胞的分化[1-3]。FOXC2既可以影響內皮細胞的遷徙也可以調控動脈細胞的分化。FOXC2在腫瘤細胞核中表達強烈，可能也是調控DNA轉錄，影響腫瘤細胞發展的重要轉錄因子之一。

[1] 楊念念.中國2009年卵巢癌發病與死亡分析[J].中國腫瘤,2013(08):617-621.

[2] 鄭春花.轉錄因子 FOXC2 在宮頸癌發生的研究[D].吉林:吉林大學,2014.

[3] 馬珂等. Notch3 及 Notch 基因細胞內區在卵巢上皮性癌組織中的表達及DAPT 對卵巢上皮性癌細胞的作用[J].中華婦產科雜志, 2010, 45(12):921-926.

R737.31

A

ISSN.2095-8803.2016.09.0015.02