微生物培養(yǎng)中平板倒置的原因淺析

李洪偉

(山東省平度經(jīng)濟(jì)開發(fā)區(qū)高級(jí)中學(xué) 266700)

在高中生物學(xué)選修教材中有關(guān)于平板培養(yǎng)細(xì)菌的內(nèi)容，其中關(guān)于平板冷凝后要將平板倒置的原因，除了教師用書中給出的參考答案“平板冷凝后，皿蓋上會(huì)凝結(jié)水珠，將平板倒置，既可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，又可以避免培養(yǎng)基中的水分過快的揮發(fā)”外，本文給予適當(dāng)補(bǔ)充。

1 接種之前平板倒置的原因

倒完平板并等待平板冷卻凝固(大約5～10 min)后將平板倒過來放置，使皿蓋在下、皿底在上的意義如下：

1.1 避免培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿脫離 倒完平板后，由于培養(yǎng)基尚有余溫且剛凝固不久，水分較大、濕度較高，皿蓋上凝結(jié)一些水珠。如果平板正放則冷凝的水滴會(huì)流到培養(yǎng)基里，不但易造成污染，還會(huì)使培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿出現(xiàn)分離，很容易滑動(dòng)，這是培養(yǎng)基黏附不牢的一個(gè)原因；此外，若倒平板時(shí)培養(yǎng)基中的水分較大，在接種培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)基中的菌種會(huì)四處流動(dòng)，長(zhǎng)成的菌膜連在一起，不能計(jì)數(shù)。

1.2 平板倒置拿取方便 打開培養(yǎng)箱取放平板時(shí)，如果一不小心容易將正放的培養(yǎng)皿的皿蓋碰開；而倒置的平板在拿取時(shí)能夠保持原狀，不易出現(xiàn)皿底和皿蓋分離的情況，從而避免環(huán)境中雜菌的污染。

2 接種后培養(yǎng)時(shí)平板倒置的原因

進(jìn)行平板培養(yǎng)的主要目的是為了分離單細(xì)胞菌落，便于觀察鑒定。將平板倒置，既可防止冷凝水滴到培養(yǎng)基上，避免雜菌污染；又利于菌種的生長(zhǎng)、繁殖和計(jì)數(shù)。

2.1 利于菌種的生長(zhǎng)和繁殖 當(dāng)培養(yǎng)條件為必須通風(fēng)時(shí)，倒置的平板可以減少培養(yǎng)基表面的空氣流動(dòng)，減慢培養(yǎng)基中水分蒸發(fā)的速度，保持瓊脂等固體培養(yǎng)基中的水分，充分的維持瓊脂等凝固劑的彈性，延長(zhǎng)培養(yǎng)基出現(xiàn)干裂的時(shí)間。所以，倒置培養(yǎng)有利于菌種的繁殖和生存。如果將平板正放，大概幾天時(shí)間培養(yǎng)基就會(huì)出現(xiàn)水分散失和開裂的情況。可見，防止培養(yǎng)過程中水分散失是非常重要的。

2.2 防止培養(yǎng)過程中雜菌污染 平板倒置培養(yǎng)時(shí)，由于平板內(nèi)的空氣不易流動(dòng), 能盡可能的減少外來雜菌的侵染，避免雜菌污染培養(yǎng)基和培養(yǎng)物。通過實(shí)驗(yàn)觀察，發(fā)現(xiàn)如果平板正放，平板的周邊容易長(zhǎng)出雜菌菌落。

2.3 有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)富集，方便觀察計(jì)數(shù) 平板倒置進(jìn)行微生物培養(yǎng)時(shí)，受重力的影響，一方面培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)主要會(huì)富集在培養(yǎng)基表面及表面以下的次層，有利于微生物生長(zhǎng)；另一方面培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的菌落相對(duì)不會(huì)太快擴(kuò)散，觀察時(shí)有利于辨別菌落特征。倒置培養(yǎng)時(shí)水珠也少, 方便觀察計(jì)數(shù)。