抗人絨毛膜促性腺激素β亞單位羧基末端肽（hCG β-CTP）單克隆抗體制備及初步鑒定

王銳 安曉麗 梁秋波 張道旭 李鄭武

（哈藥集團技術中心 黑龍江哈爾濱 150025）

抗人絨毛膜促性腺激素β亞單位羧基末端肽（hCG β-CTP）單克隆抗體制備及初步鑒定

王銳 安曉麗 梁秋波 張道旭 李鄭武

（哈藥集團技術中心 黑龍江哈爾濱 150025）

本研究以重組人促紅素-CTP融合蛋白（EPO-CTP）進行真核表達，獲得純品蛋白，免疫小鼠，采用淋巴細胞雜交瘤技術，獲得1株可穩定分泌抗人絨毛膜促性腺激素β亞單位羧基末端肽（hCGβ-CTP）的雜交瘤細胞株，命名為E4。ELISA鑒定結果表明，單抗的亞型為IgG1，輕鏈為K鏈，腹水效價都在5×10-5以上。從而為驗孕產品特異性的提高和以連接CTP的融合蛋白藥物的研制提供物質基礎。

抗人絨毛膜 hCGβ-CTP 單克隆抗體

人絨毛膜促性腺激素（human chorionie gonadotrophin，HCG）是人類受孕后胎盤合體滋養層細胞分泌的維持正常妊娠必需的一種糖蛋白激素。HCG分子含有兩個亞基，分別為α和β亞基，其生物學活性和免疫學特性由β亞基決定。在妊娠早期HCG的濃度迅速增高，監測尿中的HCG即可證實妊娠。hCG的β亞基羧基端28殘基組成的28肽是hCG分子所特有的片段，其糖含量高，可以延長體內半衰期，現很多蛋白藥物與其連接，以達到長效機制。獲得抗hCGβ羧基末端肽單克隆抗體可以進一步提高驗孕產品檢測的敏感性和特異性，并為避孕疫苗的研制和連有CTP的融合蛋白藥物的分析奠定基礎。

1 材料

重組人促紅素-CTP融合蛋白：本室提供；胎牛血清，1640培養基，H T，H A T，聚乙二醇：S i g m a公司；鼠源單抗亞類試劑盒：SouthernBiotech；其余生化試劑均為分析純。

2 方法

（1）動物免疫。按照薩姆布魯克J等［1］報道的方法，將重組人促紅素-CTP融合蛋白作為免疫蛋白。……