外源性一氧化氮對骨折患者內皮細胞及血小板功能的影響

劉先明，袁丹，黃勇全，楊德猛，王長庚，周旭東

(萍鄉市人民醫院，江西萍鄉337000)

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外源性一氧化氮對骨折患者內皮細胞及血小板功能的影響

劉先明，袁丹，黃勇全，楊德猛，王長庚，周旭東

(萍鄉市人民醫院，江西萍鄉337000)

摘要：目的觀察外源性一氧化氮(NO)對骨折患者血管內皮細胞和血小板功能的影響。方法將100例骨折手術患者隨機分為觀察組、對照組各50例，術后均予常規抗血栓治療，觀察組另吸入0.001%的NO 1次/d，共治療1周。治療前后檢測內皮細胞功能指標[血漿活化蛋白 C(APC)、可溶性細胞間黏附分子1(sICAM-1)及血管性血友病因子(vWF)]和血小板功能指標[血小板聚集率、P-選擇素(CD62P)和血小板顆粒膜糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)]，并觀察血栓發生率。結果兩組治療前各指標差異均無統計學意義(P均>0.05)，治療后除血漿APC升高外其余指標均降低(P均<0.05)，且觀察組變化更明顯(P均<0.05) ；觀察組血栓發生率2%，低于對照組的10%，P<0.05。結論外源性NO吸入有利于抑制血小板和血管內皮細胞活化，降低骨折患者術后血栓形成率。

關鍵詞：多發骨折；外源性一氧化氮；內皮細胞；血小板；靜脈血栓

血栓是骨折術后的常見并發癥，嚴重者下肢血栓后可出現肺栓塞或腦栓塞[1]。血小板和內皮細胞活化是血栓的起始步驟，如能抑制二者活化，可有效抑制血栓形成，提高患者的術后安全性。研究表明[2]，一氧化氮(NO)可抑制血管內皮細胞活化，起到降低動脈血壓的作用。2013年9月～2015年1月，我們在常規治療基礎上聯合吸入外源性NO對骨折術后患者進行干預，探討其對血栓形成的抑制作用?，F報告如下。

1資料與方法

1.1臨床資料選擇萍鄉市人民院同期收治的骨折患者100例，男51例、女49例，年齡(62.3±2.9)歲；其中行切開復位內固定術53例，全髖關節置換術47例。排除有出血高危因素者，有抗血小板和抗凝藥物治療禁忌證者，入院1個月內有質子泵抑制劑服藥史、血小板顆粒膜糖蛋白(GPⅡb/Ⅲa)受體拮抗劑服藥史者，血小板計數<100×109/L者，肝腎等重要臟器功能不全和不配合研究者。將患者隨機分為觀察組和對照組各50例，其臨床資料具有可比性。本研究經醫院倫理委員會批準，患者及家屬均知情同意。

1.2治療方法兩組術后8 h開始皮下注射低分子肝素鈉2 500 U，1次/d。觀察組術后第2天用JC502-BG95 NO治療儀治療，吸入氧濃度80%、NO濃度0.001%；其間監測血流動力學指標，維持其穩定。兩組療程均為1周。

1.3內皮細胞功能檢測治療前后取靜脈血，采用ELISA法檢測血漿活化蛋白 C(APC)、可溶性細胞間黏附分子1(sICAM-1)及血管性血友病因子(vWF)，試劑盒購自美國RD公司，按說明書操作。

1.4血小板功能檢測治療前后取靜脈血，采用比濁法測定腺苷二磷酸(ADP)誘導血小板聚集率，采用ELISA 法檢測血漿P-選擇素(CD62P)和GPⅡb/Ⅲa，試劑盒購自美國RD公司，按說明書操作。

1.5血栓形成情況觀察采用西門子S2000彩超儀，探頭頻率50～100 MHz，分別探測雙下肢血栓形成情況。

2結果

2.1兩組內皮細胞及血小板功能比較見表1。

2.2兩組血栓發生率比較觀察發生腓腸肌靜脈靜脈血栓1例，血栓發生率2%；對照組發生腓腸肌靜脈血栓2例，腘靜脈、脛后靜脈、脛前靜脈各1例，血栓發生率10%，觀察組靜脈血栓發生率明顯低于對照組(χ2=12.21，P<0.05)。

3討論

臨床上多采用低分子肝素鈉(鈣)預防術后血栓的發生，但對血小板的干預力度不夠，并且增加術后出血的風險[3]。

表1　兩組內皮細胞及血小板功能比較±s)

注：與同組治療前比較，*P<0.05；與對照組同時點比較，#P<0.05。

NO是一種多功能信號分子和細胞毒性因子[4]，其在血栓防治中的作用尚不明確?；贜O在高血壓和冠心病防治中的作用[5～7]，推測其可用于防治下肢深靜脈血栓。因此，本研究選取骨科下肢手術后患者作為研究對象，觀察NO對血管內皮細胞功能和血小板功能的影響。結果發現，除APC外，NO干預后觀察組血小板活化相關指標和內皮細胞活化相關指標均明顯降低，最終血栓發生率也降低，說明其療效是可靠的。APC是環鳥甘酸(CGMP)的激活物，其升高可激活一氧化氮合酶(NOS)下游通路，導致舒血管因子升高[8～10]。吸入外源性NO的作用機制包括：①NO可與細胞內血紅蛋白結合, 形成亞硝酞血紅蛋白, 激活鳥苷酸環化酶,使細胞內CGMP濃度增加,激活蛋白激酶G,從而降低細胞內鈣離子濃度，松弛血管平滑肌[9～11]。②NO可與血小板表面的膜受體結合，啟動CGMP通路，抑制血小板骨架蛋白變化，抑制胞吞胞吐作用，最終導致聚集和釋放降低[12～14]。另外，本研究未發現吸入外源性NO所致的不良反應，可能與吸入濃度較低有關。

綜上所述，外源性NO吸入有利于抑制血小板和血管內皮細胞活化，降低血栓形成率，且具有較高的安全性。但是，本研究納入樣本量不足，且選用NO濃度較低，并非最適濃度。因此，我們將采用動物實驗對NO的吸入濃度及時間進行比較，以探討更有效的治療濃度和時間。

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(收稿日期：2015-11-23)

中圖分類號：R683

文獻標志碼：B

文章編號：1002-266X(2016)10-0088-02

doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2016.10.040